福建省卫生厅青年科研基金(2004-2-20)
- 作品数：2 被引量：4H指数：2
- 相关作者：陈静程祖建欧启水杨上英杨滨更多>>
- 相关机构：福建医科大学更多>>
- 发文基金：福建省卫生厅青年科研基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 等位基因特异PCR结合熔解曲线分析快速检测线粒体DNA A1555G突变被引量：2
- 2009年
- 目的建立一种线粒体DNA A1555G突变的快速检测方法。方法以45例线粒体耳聋患者为研究对象,采用等位基因特异PCR结合熔解曲线分析对线粒体DNA A1555G突变位点进行检测,根据得到的熔解曲线分析线粒体DNA A1555G突变。并与PCR产物直接测序法结果进行比较。结果线粒体DNA A1555G同质性突变时只出现一个峰且峰尖所对应的Tm为(82±0.5)℃;线粒体DNA A1555G未发生突变时只出现一个峰且峰尖所对应的Tm为(79±0.5)℃;线粒体DNA A1555G异质性突变时出现2个峰且各自峰尖所对应的Tm为(82±0.5)℃和(79±0.5)℃。45例样本的检测结果与PCR产物直接测序法的结果符合率达100%。结论等位基因特异PCR结合熔解曲线分析具有操作简便、结果准确、快速等特点,可作为线粒体DNA A1555G突变检测的常规方法。
- 程祖建杨滨江凌陈静杨上英欧启水
- 关键词：熔解曲线分析线粒体DNA突变
- 多重PCR诊断线粒体突变聋病的临床应用价值被引量：2
- 2008年
- 目的采用多重PCR和多重限制性内切酶法同时检测线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)1 555G、3243G7、445G三个突变位点,探讨多重PCR法在线粒体突变聋病中的诊断价值。方法收集311例耳聋患者外周血标本,提取DNA模板,以三对引物在同一PCR反应体系中进行多重PCR扩增;产物在同一体系中用三种相应的限制性内切酶分析,同时对扩增产物进行mtDNA基因序列测定。结果采用本法检测出mtDNA 1 555G点突变20例,7 444A点突变1例,结果与测序相符。结论多重PCR和酶切法可同时检测多个mtDNA突变位点,利用这一方法可快速简捷地诊断线粒体突变聋病,便于临床推广应用。
- 陈静程祖建欧启水
- 关键词：多重PCR线粒体基因组耳聋限制性内切酶
