上海市科学技术委员会基础研究重点项目(08Jc1405200)
- 作品数：1 被引量：4H指数：1
- 相关作者：葛宜兵祁培培王锦红庞强廖文婷更多>>
- 相关机构：武警江西总队医院安徽医科大学第二军医大学更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会基础研究重点项目国家自然科学基金安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 噬菌体展示HIV-1 Tat38-61碱性区51和55位随机突变体文库的构建被引量：4
- 2011年
- 为了构建噬菌体展示Tat38-61(51N/55N)碱性区突变体文库,进一步研究HIV-1 Tat38-61表位的分子进化筛选,采用含随机核苷酸序列的引物,通过Overlap PCR的方法获得51和55位氨基酸随机突变的全长Tat编码序列,再以此为模板PCR扩增出两端含有Xba I识别序列的Tat38-61突变体片段HIV-1 Tat38-61(51N/55N),克隆至噬菌体展示载体pCANTAB5S上,转化大肠杆菌TG1,经M13K07辅助噬菌体拯救,构建噬菌体展示Tat38-61(51N/55N)碱性区突变体文库。结果显示文库的库容量为5.0×106,滴度为2.65×1012 TU/mL,阳性克隆率为56.50%;序列分析显示文库中51、55位核苷酸与氨基酸均呈随机性分布,达到了对文库进行分子进化筛选的要求,为获得可用作疫苗候选物的新型Tat突变体奠定基础。
- 葛宜兵杨旭芳杜哲明庞强曹洁陈秋莉王锦红张华群廖文婷祁培培刘超章萍萍邓松华潘卫
- 关键词：HIV-1TAT随机突变噬菌体展示
