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茶树不同儿茶素含量愈伤组织的蛋白差异分析被引量：8: 2010年; 【目的】建立适合于茶树愈伤组织的蛋白质双向电泳技术,并比较不同愈伤组织间的蛋白表达差异,为深入开展茶树儿茶素生物合成的蛋白质组学研究奠定基础。【方法】在优化蛋白质提取技术的基础上,分别对"云茎63X"(儿茶素含量低)、"云茎63Y"(儿茶素含量较高)和光照诱导的"云茎63Y"(儿茶素含量最高)三类愈伤组织的蛋白质进行双向电泳分析,并对表达差异的蛋白质点进行质谱(LTQ-ESI-MS/MS)分析。【结果】通过对蛋白得率和SDS-PAGE单向电泳图谱的比较,发现TCA-丙酮法最适合茶树愈伤组织中蛋白质的提取;从三类愈伤组织的蛋白双向电泳图谱中,分析检测出14个差异较大的蛋白质;经质谱分析和数据库检索,14个蛋白中包括有谷胱甘肽S-转移酶、WD40蛋白、咖啡酸-O-转甲基酶、S-腺苷甲硫氨酸合成酶、果胶甲酯酶等。【结论】这些蛋白可能参与了苯丙烷及类黄酮途径的合成及其调控、乙烯合成、细胞壁代谢、糖酵解和信号转导等生理作用。; 张立明王云生高丽萍夏涛; 关键词：茶树愈伤组织儿茶素蛋白质组学

类黄酮及茶儿茶素生物合成途径及其调控研究进展被引量：83: 2009年; 类黄酮化合物是植物的次生代谢产物,广泛分布于植物界且具有较强的生物活性。儿茶素是主要的类黄酮化合物之一,其含量占茶树鲜叶干重的12%～25%。作为茶叶的主要风味物质,儿茶素还具有抗氧化、抗诱变与防癌、抗心血管疾病、抗紫外线辐射等功能。本文从类黄酮及茶儿茶素的生物合成途径、组织化学定位、合成调控措施等方面,综述有关茶树儿茶素的生物合成代谢及其调控的研究进展,旨在为茶儿茶素生物合成的基因调控、代谢工程提供新的思路。; 夏涛高丽萍; 关键词：类黄酮儿茶素生物合成途径

霍山金鸡茶树根、茎、叶中微量元素及铅含量分析: 2011年; 茶叶中含有丰富的对人体有益的微量元素。本实验采用原子吸收光谱法对一株采自霍山的祖代金鸡茶树根、茎和叶中的微量元素及有害元素铅含量进行了测定。实验结果表明:金鸡茶树中铜和锌的含量变化相似,都是按茎、叶、根的顺序依次降低,其中茎中含铜量最高为32.535mg/kg、含锌量为53.205mg/kg,根中含铜量最低为25.377mg/kg、含锌量为23.43mg/kg;锰元素的含量变化较大,叶中锰含量最高为700.667mg/kg,根其次,茎中含量最低为139mg/kg;铅元素的含量变化没有规则性,根、茎、叶中的铅含量差异很大,且叶的含量低于国家限定的标准,镉元素的含量变化不大。; 魏晓飞王在贵田胜尼高丽萍杨静; 关键词：原子吸收光谱法微量元素铅

茶儿茶素-香草醛酸性试剂检测方法的研究被引量：5: 2010年; 香草醛酸性试剂比色法是检测儿茶素含量最常见方法,但其准确性及实用性一直受到质疑。利用溶剂萃取、TLC和HPLC等方法,对儿茶素-香草醛酸性试剂显色方法的特异性、准确性进行了研究。结果显示,儿茶素类显色反应的灵敏度远高于黄酮醇、二氢黄酮醇和茶皂素类,又由于这些物质在茶叶中的含量很低,因此不会干扰儿茶素总量的测定。通过对显色试剂中酸的种类、酸浓度、显色温度和显色时间的研究,得出儿茶素检测的最佳方法:采用1%香草醛-浓盐酸试剂,在室温下反应5min,以Y(A505)=aX+b公式计算茶树中儿茶素的总含量。; 王正荣刘亚军高丽萍夏涛孙美莲; 关键词：茶树儿茶素

茶树新梢中非酯型儿茶素及其合成酶的变化规律被引量：14: 2009年; 对不同季节茶树新梢不同部位鲜叶中儿茶素组分和非酯型儿茶素合成酶的变化规律进行了研究。结果表明,在茶树新梢上,从芽到第四叶,四种非酯型儿茶素中除了GC外,C、EC和EGC含量均逐步增加;两种非酯型儿茶素合成酶中,DFR/LAR活性呈下降趋势,而ANR在第三叶中达到最高。相关分析进一步表明,不同部位鲜叶中儿茶素的总量变化与DFR/LAR活性变化呈显著正相关,而与ANR变化相关性不大。; 张宪林高丽萍夏涛刘亚军高可君; 关键词：茶树生物合成

茶树酯型儿茶素水解酶鉴定及其检测体系的建立被引量：4: 2011年; 本试验利用体外酶学方法,结合薄层层析(TLC)、高效液相色谱(HPLC)和液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析,首次从茶树中检测到活性较高的酯型儿茶素水解酶(Galloylated Catechins Hydrolase,GCH)的存在。在酯型儿茶素水解酶催化下,酯型儿茶素发生水解反应,生成没食子酸(GA)和非酯型儿茶素。试验确立了酯型儿茶素水解酶的最适检测体系,在2.5 mL反应体系中包含0.2 mmol/L酯型儿茶素、2.4 mmol/L抗坏血酸、粗酶提取液若干(含0.1 mg酶蛋白)和0.1 mol/L磷酸缓冲液(pH6.5),在30℃下,反应30 min。此外,试验利用硫酸铵分级沉淀、阴离子交换层析和凝胶过滤层析对该酶进行了初步纯化。; 聂志银刘亚军刘莉高丽萍夏涛; 关键词：茶树

茶树不同器官组织总RNA提取方法的研究被引量：4: 2011年; 从茶树组织中提取高质量的总RNA,是开展茶树基因组学、功能基因组学研究的重要前提,而RNase、多酚类物质严重干扰茶树总RNA的分离提取。鉴于茶树组织总RNA提取过程难易不一、总RNA提取质量良莠不齐的现状,现对材料用量、提取液、DNA和蛋白质抽提液、RNA沉淀试剂、多酚氧化抑制剂等进行了比较研究,建立了一种适合茶树各器官组织总RNA提取的简单高效的方法(简易CTAB-LiCl法),并与实验室常用的改良Tri-Reagent法、改良CTAB法进行了比较。核酸定量和琼脂糖凝胶电泳检测结果显示,简易CTAB-LiCl法从茶树各器官组织中提取到的总RNA质量高、得率高。总RNA的得率是改良CTAB法的1.6-5倍。因此,简易CTAB-LiCl法具有效率高、适用范围广,且操作简单、实验成本低的特点。RT-PCR和cDNA-AFLP实验表明,提取的总RNA能够用于后续的分子生物学研究。; 杨冬青王云生孙美莲单育骆洋韦朝领高丽萍夏涛; 关键词：茶树总RNA 器官

茶树叶绿体及其蛋白的分离研究被引量：4: 2011年; 茶树叶片叶绿体的有效分离纯化是进行茶树叶绿体代谢组学和蛋白质组学研究的基础。本文以茶树鲜叶为材料,通过叶绿体得率、希尔反应等纯度和完整度指标,比较了Percoll密度梯度离心法和蔗糖密度梯度离心法对叶绿体分离纯化的效果;通过蛋白质含量和SDS-PAGE电泳图谱,比较了涨破法和冻融法对叶绿体蛋白的提取效果。结果发现Percoll密度梯度离心法和冻融法适合茶树完整叶绿体分离及叶绿体蛋白提取。在此基础上本文还对茶树鲜叶及叶绿体蛋白质进行了双向电泳的初步分析比较;并检测到茶树叶绿体内含有儿茶素合成相关酶PAL、DFR/LAR和ANR。; 张立明刘亚军王云生高丽萍夏涛; 关键词：茶树叶绿体儿茶素合成酶

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安徽省自然科学基金(090411006)