国家自然科学基金(30672038)
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 相关作者：范有明蔡明春崔岐黄庆愿黄缄更多>>
- 相关机构：第三军医大学汕头大学更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- NgR受体复合体介导中枢神经再生抑制机制研究被引量：5
- 2010年
- 范有明崔岐
- 关键词：中枢神经
- Nogo-66受体RNA干扰质粒的构建及其干扰效率鉴定被引量：2
- 2007年
- 目的构建及筛选高效率针对Nogo-66受体(Nogo-66receptor,NgR)进行RNA干扰(RNAi)的质粒。方法RT-PCR克隆NgR,插入表达质粒中,构建NgR-GFP融合蛋白表达质粒。根据NgR序列,设计4对针对NgRmRNA进行RNAi的寡核苷酸。退火后,插入短发夹RNA(shorthairpinRNA,shRNA)表达质粒中,构建shRNA表达质粒。将NgR-GFP融合蛋白表达质粒与shRNA表达质粒共转染AAV-293细胞。通过对GFP表达量的观察及Westernblotting定量检测NgR-GFP融合蛋白表达量,鉴定shRNA表达质粒对NgR的干扰效率。结果针对NgR进行RNAi的4个序列中,有1个序列的干扰效率大于90%以上。结论成功构建了1个针对NgR的高效RNAi表达质粒。
- 范有明蔡明春
- 关键词：RNA干扰质粒
- GST-Nogo-66融合蛋白的表达及纯化
- 2010年
- 目的建立GST-Nogo-66融合蛋白的表达及纯化方法,获取高纯度Nogo-66蛋白。方法RT-PCR克隆F344大鼠大脑皮层Nogo-66基因片段,插入pGEX-6P-3表达质粒中,构建GST-Nogo-66融合蛋白表达质粒。通过GST-Nogo-66融合蛋白表达及纯化实验,确立有效的表达及纯化GST-Nogo-66融合蛋白的方法。结果得到了较高纯度的GST-Nogo-66融合蛋白。结论成功建立了GST-Nogo-66融合蛋白的表达及纯化方法,为Nogo-66蛋白功能的深入研究奠定了基础。
- 范有明黄缄刘福玉蔡明春高钍琪黄庆愿
- 关键词：克隆纯化
