公共文化服务平台

口服牛Ⅱ型胶原蛋白诱发类风湿关节炎大鼠模型的建立及评价被引量：2: 2017年; 按照动物建模方案分别给不同组大鼠灌胃一定剂量的阿司匹林,再给大鼠灌胃牛II型胶原蛋白诱导其产生类风湿关节炎;建模期间进行踝关节直径的测量及关节炎指数评分;然后ELISA实验检测大鼠血清中特异性抗体(IgE、IgG)和炎症因子(IL-6、TNF-α和IFN-γ);再进一步观察大鼠踝关节组织病理改变.结果表明:经过不同剂量阿司匹林(5、10 mg·kg-1)处理的大鼠,用牛II型胶原蛋白灌胃后,大鼠踝关节呈现不同程度的肿胀及关节炎症状;10 mg·kg-1处理的大鼠炎症更明显,其血清中特异性抗体(IgE、IgG)和炎性细胞因子IL-6、TNF-a也显著增加,而细胞因子IFN-r显著降低,同时踝关节组织也发生明显炎症病变.这表明10 mg·kg-1处理的大鼠要比5 mg·kg-1处理大鼠更易用于口服食物抗原牛II型胶原蛋白类风湿关节炎的建成.; 关丽毋丹丹胡东生刘冬舟刘志刚; 关键词：类风湿关节炎口服 II型胶原蛋白动物模型

花生主要过敏原Ara h1单克隆抗体的制备与应用被引量：7: 2017年; 目的制备与鉴定抗花生主要过敏原Ara h1单克隆抗体,建立双单抗ELISA法,检测食品中花生过敏原。方法以花生主要过敏原Ara h1为抗原免疫Balb/c小鼠,融合免疫鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞NS-1。半固体培养基法结合有限稀释法筛选稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株后诱生小鼠腹水,采用蛋白A亲和层析法获得纯化抗体。利用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定该单克隆抗体的Ig亚型。间接ELISA法和Western blot鉴定抗体效价和特异性以及与其他过敏源的交叉反应性。建立双单抗夹心ELISA法检测食品中的花生过敏原。结果共获得抗Ara h1细胞株4株,分别命名为2G9、5G4、5B5、2C7,效价均高于1∶106。经抗体亚型鉴定,4株抗体均为Ig G1型。Western blot的结果表明4株抗体均能识别Ara h1,其中2G9与5G4结合能力较强。在特异性检测实验中,2G9和5G4与其他种类过敏原无交叉反应。通过建立双单克隆抗体夹心ELISA法,发现花生Ara h1蛋白的检出低限为:5 ng/ml,标准曲线在~80 ng/ml范围内线性良好。利用此法检测了10种食品,结果显示在5种含有花生成分的食品中均检测到了花生过敏原。结论获得高效价抗体4株,建立了高效、高特异性的食品中花生过敏原的检测方法,为食品中花生过敏原的检测提供了依据。; 陈献雄邬玉兰吉琼梅杨平常刘志刚; 关键词：单克隆抗体过敏原检测

改良中药复方Formula-3治疗BN大鼠食物过敏模型的疗效及肠道的病理变化: 2016年; 目的探讨改良中药复方Formula-3治疗卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏BN大鼠食物过敏模型的疗效及肠道的病理变化。方法将24只BN大鼠按随机数字表法分为生理盐水对照组、OVA模型组、中药复方Formula-3治疗组和中药复方Formula-3对照组,每组6只。将OVA模型组6只BN大鼠建立OVA模型,均成功建模。前6周,OVA模型组、中药复方Formula-3治疗组BN大鼠均给予OVA混合液灌胃,生理盐水对照组、中药复方Formula-3对照组BN大鼠均给予生理盐水灌胃。第7周开始,中药复方Formula-3治疗组、中药复方Formula-3对照组BN大鼠均给予中药复方灌胃,生理盐水对照组、OVA模型组BN大鼠均给予生理盐水灌胃,同时第7、9、11、13周,OVA模型组、中药复方Formula-3治疗组BN大鼠均给予OVA混合液灌胃。第13周后用100g·L-1 OVA灌胃激发,24h后给予乙醚注射液麻醉,处死,摘除眼球取血。检测各组BN大鼠血清OVA-免疫球蛋白E(IgE)、IL-4的水平,光学显微镜和透射电镜下观察各组BN大鼠肠道组织的病理变化。结果 OVA模型组、中药复方Formula-3治疗组BN大鼠血清OVA-IgE、IL-4水平均明显高于生理盐水对照组、中药复方Formula-3对照组(均P<0.05)。中药复方Formula-3治疗组BN大鼠血清OVA-IgE、IL-4水平均明显低于OVA模型组(均P<0.05)。光学显微镜下观察显示中药复方Formula-3治疗组的肠道炎症程度、肠绒毛破坏明显减轻。透射电镜下观察显示OVA模型组可见肠道上皮细胞消失,微绒毛排列紊乱,细胞器破坏,肥大细胞脱颗粒严重,细胞核固缩、消失。中药复方Formula-3治疗组的肠道上皮细胞排列整齐,微绒毛轻度肿胀,肥大细胞脱颗粒减少,细胞核结构正常。结论改良中药复方Formula-3能够通过保护肠道黏膜屏障和抑制炎症来治疗食物过敏性疾病。; 贺守第李建杰黄胜光杨平常刘志刚; 关键词：食物过敏肠道病理变化疗效 BN大鼠

蜂毒肽对成熟树突细胞诱导T细胞分化的免疫调节的影响被引量：4: 2017年; 通过蜂毒肽(Melittin,MT)干预脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激树突细胞(Dendritic Cell,DC)与淋巴细胞共培养,以探究MT对Th1/Th2分化的影响。用MTS检测LPS、MT对DC与淋巴细胞共培养活性;流式细胞术检测MT对LPS刺激DC与淋巴细胞共培养中Th1、Th2比例;ELISA检测LPS刺激DC与淋巴细胞共培养中细胞上清液中IL-4、INF-γ浓度。结果显示MT、LPS在一定浓度下刺激DC与淋巴细胞共培养的活性;在成熟的DC诱导下,MT能上调Th1/Th2比例、Th1百分率(P<0.05)及IFN-γ浓度(P<0.01);对IL-4浓度、Th2百分率无影响(P>0.05)。本研究说明MT通过上调Th1细胞比例,IFN-γ浓度,促进Th1/Th2细胞向Th1方向分化途径对T细胞起免疫调节作用。; 熊浪平贺守第关彤莫丽华杨平常刘志刚吉琼梅黄胜光; 关键词：蜂毒肽树突细胞 T细胞免疫调节

小麦GLB 1蛋白单克隆抗体的制备及鉴定: 2014年; 以小麦主要过敏原Glb-1蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤NS-1细胞融合。采用细胞融合和有限稀释法相结合的方法快速筛选获得稳定分泌的特异性杂交瘤细胞株,用杂交瘤细胞株诱生小鼠腹水并用蛋白A亲和层析法纯化抗体后检测。采用间接ELISA法鉴定该单克隆抗体的IgG亚型;通过间接ELISA鉴定该单克隆抗体的特性和交叉性。利用双单抗夹心ELISA法检测单抗的抗原表位特异性。结果表明:共获得4株可稳定分泌小鼠抗小麦主要过敏原Glb-1蛋白的单克隆抗体,分别命名为1C4、4H5、1A9、4F5,经检测其Ig亚型均为IgG1,且4株单抗效价均在10-9以上。ELISA结果分析表明该4株单抗均能特异性识别小麦主要过敏原Glb-1蛋白且和其他常见食物无交叉反应性。将4株单抗两两配对进行ELISA实验,结果发现1C4与4H5可能有不同的抗原表位,以此建立的双抗夹心ELISA系统可以检测小麦Glb1-G3蛋白。实验成功制备了鼠抗小麦主要过敏原Glb-1蛋白抗原的单克隆抗体,并且建立了双单抗夹心ELISA检测系统,为小麦主要过敏原蛋白的检测奠定了基础。; 孔令超杨成彬詹政科刘志强刘立忠刘志刚朱清仙; 关键词：蛋白单克隆抗体免疫学鉴定

大蒜抗菌活性蛋白的分离、纯化和鉴定被引量：5: 2012年; 目的从大蒜中分离纯化具有抗真菌活性的蛋白。方法提取大蒜粗提液,通过DEAE-SephadexTM A-50阴离子交换层析、Affi-gel blue gel亲和层析和ResourceTMS阳离子交换层析纯化目的蛋白。通过Tricine-SDS-PAGE、抗真菌活性检测鉴定该蛋白对不同真菌的抑制活性。结果纯化得到的蛋白分子质量为13ku,该蛋白对落花生褐斑病菌有明显的生长抑制活性,而对绿色木霉、黑曲霉、白地霉和产黄青霉没有生长抑制活性。纯化得到另外一种蛋白的分子质量约为4.6ku,该蛋白对绿色木霉有明显的生长抑制活性,而对落花生褐斑病菌、黑曲霉、白地霉和产黄青霉没有生长抑制活性。结论大蒜中存在抗真菌活性蛋白。; 魏雪盈徐栋梁闫浩夏立新刘志刚; 关键词：大蒜离子交换层析活性抑制

花生过敏原Ara h1的热变性及其与还原糖相互作用的研究被引量：1: 2013年; 运用圆二色光谱(CD)和荧光光谱以及ELISA方法对花生蛋白Ara h1的热变性及其与还原糖的相互作用,以及过敏原性的变化进行了系统研究。实验表明,温度高于85℃时,Ara h1蛋白的二级结构才发生显著变化,表现为α螺旋结构的相对含量减少,β折叠及无规卷曲等结构的相对含量增加,其过敏原性也相应降低;木糖、果糖能与Ara h1蛋白进行相互作用进而有效稳定其蛋白结构,并显著降低其过敏原性。研究结果对食物过敏原致敏机理的深入研究,以及花生食品的合理加工具有重要的理论指导意义。; 徐宏沈亮亮胡章立肖杰肖华新吴锦霞李逸魏波倪卓吴序栎刘志刚; 关键词：ARA 圆二色光谱 ELISA

蜂毒肽通过Th1/Th2途径对胶原诱导关节炎大鼠模型免疫调节的影响被引量：3: 2019年; 目的探讨蜂毒肽对胶原诱导关节炎大鼠模型免疫调节的影响。方法成功建立胶原诱导关节炎大鼠模型,随机分为模型组、蜂毒肽(0.5 mg/kg)组、甲氨蝶呤(1 mg/只)组,每组6只,另选取未造模大鼠为对照组;造模第14天起,隔日1次ip蜂毒肽,每周1次ip甲氨蝶呤,对照组、模型组ip等量生理盐水,给药21 d。观察关节肿胀程度、进行关节炎指数(AI)评分;给药结束后,收集血清,ELISA法检测血清中免疫球蛋白G(IgG)、IgG1、IgG2a、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)水平;分离大鼠脾脏,提取淋巴细胞,流式细胞术检测Th1、Th2细胞比例。结果蜂毒肽组大鼠关节皮肤发红,关节肿胀明显减轻;与模型组比较,蜂毒肽显著抑制AI评分(P<0.05);显著降低血清中IgG、IgG2a、IFN-γ浓度(P<0.05),升高IgG1、IL-4浓度(P<0.05);显著下调Th1细胞比例、Th1/Th2比值(P<0.05),上调Th2细胞比例(P<0.05)。结论蜂毒肽能通过调节Th1/Th2平衡抑制胶原诱导关节炎大鼠的炎症。; 贺守第范钊坤关丽黎德育杨平常刘志刚黄胜光; 关键词：蜂毒肽 TH1细胞 TH2细胞胶原诱导关节炎

牛奶过敏原β-乳球蛋白的单克隆抗体制备及其双抗体夹心法的建立被引量：6: 2015年; 目的制备与鉴定牛奶主要过敏原β-乳球蛋白(β-LG)的单克隆抗体,并建立双抗体夹心检测法。方法以β-LG为抗原免疫BALB/c小鼠,融合免疫鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤NS-1。半固体培养基法结合有限稀释法筛选稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株。杂交瘤细胞株诱生小鼠腹水,采用蛋白A亲和层析法获得纯化抗体。利用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定该单克隆抗体的Ig亚型。间接ELISA方法和Western Blot鉴定抗体效价和特异性以及与其他过敏原的交叉反应性。建立双单克隆抗体夹心法,检测β-LG。结果共获得抗β-LG细胞株6株,分别命名为1H8,4A7,4C3,1F9,1G5,3D11,效价均高于20万。经抗体亚型鉴定,6株抗体均为Ig G1型。Western Blot的结果表明6株抗体能识别β-LG。在特异性检测实验中,6株抗体与其他种类食物过敏原无交叉反应,而1G5和3D11与牛奶酪蛋白过敏原有交叉反应性。通过建立双单克隆抗体夹心ELISA法,发现牛奶β-LG蛋白的检出低限为:15.625 ng/m L,标准曲线在15.625~250 ng/m L范围内线性良好。结论获得高效价抗体6株,建立了高效、高特异性的牛奶过敏原β-LG的检测方法,为食品中牛奶过敏原的检测提供了依据。; 陈献雄邬玉兰吉琼梅杨平常刘志刚; 关键词：单克隆抗体过敏原检测

蜂毒肽对胶原诱导关节炎大鼠模型Th17/Treg平衡及炎症的影响被引量：12: 2019年; 目的探讨蜂毒肽干预胶原诱导关节炎大鼠模型后对Th17/Treg平衡调控及关节炎症的影响。方法将30组SD大鼠随机分为正常对照组6只,其余24只SD大鼠于第1天尾根部注射牛II胶原,第10天再次注射II胶原建立胶原诱导关节炎模型,第14天淘汰6只未建模成功的大鼠,筛选出18只建模成功的大鼠按随机数字表法分为模型组、蜂毒肽组、甲氨蝶呤组,每组6只。第14天蜂毒肽组腹腔注射蜂毒肽(0. 5 mg/kg,隔日1次),甲氨蝶呤注射组注射甲氨蝶呤(每只1 mg,每周1次,共3次),模型组、正常组腹腔注射等量灭菌注射用水,第32天麻醉处死后,收集血清,ELISA法检测血清中TNF-α、IL-10、IL-17 A浓度,分离大鼠脾脏,提取淋巴细胞,MTS检测单个核细胞活性,流式细胞术检测Th17、Treg细胞的比例,HE染色观察踝关节病理变化。结果蜂毒肽、甲氨喋呤降低血清中TNF-α、IL-17 A浓度(P<0. 01,P<0. 05),升高IL-10浓度(P<0. 05);蜂毒肽、甲氨喋呤抑制淋巴细胞活性(P<0. 05);蜂毒肽、甲氨喋呤能下调Th17细胞比例(P<0. 05),上调Treg细胞比例(P<0. 01,P<0. 05);蜂毒肽、甲氨喋呤组减少滑膜增生,抑制炎性细胞浸润,延缓骨和关节软骨破坏。结论蜂毒肽能调节胶原诱导关节大鼠模型Th17/Treg平衡,抑制关节的炎症。; 谭宁谭宁关丽关丽杨平常刘志刚; 关键词：蜂毒肽 TH17 TREG 胶原诱导关节炎炎症

渝B2-20050021-1　渝公网安备 50019002500403号　违法和不良信息举报中心　互联网出版许可证　新出网证(渝)字10号

国家自然科学基金(81271950)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

国家自然科学基金(81271950)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈