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针对小鼠早期生长反应因子-1发夹结构小干扰RNA载体的构建及其干扰效率鉴定: 2009年; 目的:构建及筛选高效率针对早期生长反应基因-1(Egr-1)进行RNA干扰(RNAi)的质粒。方法:根据Egr-1基因mRNA序列,设计有小发夹结构的3条寡核苷酸序列,克隆到空载体pGCSIL-GFP中,构建重组质粒,同时设计构建不针对任何特异基因的质粒作为阴性对照。将shRNA表达质粒转染HEK293细胞。通过对GFP表达量的观察,荧光定量PCR及western blotting定量检测Egr-1基因的表达,鉴定shRNA表达质粒对Egr-1的干扰效率。结果:针对小鼠Egr-1基因进行RNAi的3个序列中,有1个序列的干扰效率大于70%以上。结论:成功构建了1个针对小鼠Egr-1基因的高效RNAi表达质粒。; 蒋晶晶刘双珍文丹王沙; 关键词：早期生长反应因子-1 RNA干扰质粒

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湖南省科技厅重点项目(08sk3101)