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甘肃省科技重大专项计划(092nkDA025)

作品数：12 被引量：124H指数：7
相关作者：陈克明葛宝丰马慧萍明磊国翟远坤更多>>
相关机构：兰州军区兰州总医院兰州理工大学兰州军区疾病预防控制中心更多>>
发文基金：甘肃省科技重大专项计划更多>>
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文献类型

  • 12篇中文期刊文章

领域

  • 12篇医药卫生

主题

  • 12篇成骨
  • 7篇细胞
  • 6篇骨细胞
  • 6篇骨性
  • 6篇干细胞
  • 6篇成骨细胞
  • 6篇成骨性分化
  • 5篇体外
  • 5篇体外培养
  • 5篇OSTERI...
  • 4篇增殖
  • 4篇缺氧
  • 4篇黄酮
  • 4篇间充质干细胞
  • 4篇骨髓间充质
  • 4篇骨髓间充质干...
  • 4篇充质干细胞
  • 3篇异黄酮
  • 3篇体外培养成骨...
  • 3篇缺氧诱导

机构

  • 12篇兰州军区兰州...
  • 2篇兰州理工大学
  • 1篇兰州军区疾病...

作者

  • 12篇陈克明
  • 10篇葛宝丰
  • 10篇马慧萍
  • 7篇明磊国
  • 6篇翟远坤
  • 4篇韩桂秋
  • 2篇周建
  • 2篇朱瑞清
  • 1篇姚娟
  • 1篇宋鹏
  • 1篇郭晓宇
  • 1篇李志忠
  • 1篇李志锋
  • 1篇吕享
  • 1篇王鸣刚
  • 1篇程国政
  • 1篇张娜

传媒

  • 4篇中国药理学通...
  • 3篇中国中药杂志
  • 2篇中国药学杂志
  • 1篇药学学报
  • 1篇生物化学与生...
  • 1篇中药材

年份

  • 3篇2012
  • 7篇2011
  • 2篇2010
共 12 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
淫羊藿素和脱水淫羊藿素对骨髓间充质干细胞成骨性分化影响的比较研究被引量：12
2011年
目的比较研究淫羊藿素和脱水淫羊藿素对体外培养大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow stromal cells,rBMSCs)成骨性分化的影响。方法贴壁筛选法体外培养rBMSCs,以1×10-5 mol.L-1的淫羊藿素和脱水淫羊藿素对rBMSCs的成骨性分化进行药物干预,比较淫羊藿素组、脱水淫羊藿素组以及不加药的对照组之间碱性磷酸酶(ALP)活性、ALP阳性克隆数(colonies stained positive for alkaline phosphatase,CFU-FALP)、骨钙素分泌量、钙盐沉积量以及钙化结节数量的差异,Real TimeRT-PCR法检测IGF-1、Osterix和Runx-2的基因表达情况。Western-blot法检测Ⅰ型胶原蛋白的分泌量。结果淫羊藿素可显著增强rBMSCs的ALP活性,促进钙盐沉积和骨钙素的分泌,增加CFU-FALP和钙化结节数量,提高IGF-1、Osterix和Runx-2的mRNA水平,同时也可增强Ⅰ型胶原蛋白的分泌,而脱水淫羊藿素并未表现出类似效应。结论淫羊藿素促进rBMSCs成骨性分化的活性显著高于脱水淫羊藿素,可能是二者异戊烷链上的构型差异,导致淫羊藿素的生物活性强于脱水淫羊藿素,提示我们可以通过对药物进行化学结构的改造,增强药效,降低毒性,从而研究开发出新型抗骨质疏松药物。
翟远坤李志忠陈克明张娜程国政朱瑞清
关键词：淫羊藿素骨髓间充质干细胞成骨性分化I型胶原
8-异戊烯基柑橘素促进体外骨髓基质干细胞成骨性分化的研究被引量：3
2011年
目的研究8-异戊烯基柑橘素对体外培养大鼠骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)的增殖与成骨性分化的影响。方法取大鼠股骨及胫骨全骨髓,利用全骨髓培养法培养于含体积分数为10%FBS的DMEM-F12培养液中。以碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)为指标,96孔板梯度筛选作用最佳浓度。增殖分析采用MTT法。以1×10-6 mol.L-1的最佳浓度作用并成骨性诱导(1×10-7mmol.L-1地塞米松、10 mmol.L-1β-甘油磷酸钠和50 mg.L-1抗坏血酸)培养的d 4、8、12、16测ALP活性、钙盐沉积量,d 16进行ALP和钙化结节组织化学染色及计数。成骨性诱导后不同时间点提取Total RNA,RT Real-Time PCR法检测bFGF、IGF-1、Osterix、Runx-2、BMP-2及COL-Ⅰ的基因表达情况。结果 8-异戊烯基柑橘素不能促进BMSCs增殖,但8-异戊烯基柑橘素在1×10-6 mol.L-1时能促进其向成骨性分化,表现为提高BMSCs的ALP活性、促进钙盐沉积、增加钙化结节数量、提高bFGF、IGF-1、Osterix、Runx-2、BMP-2及COL-Ⅰ的mRNA表达水平。结论 8-异戊烯基柑橘素可诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,作为促进骨修复和抗骨质疏松的有效成分具有较大的药用价值。
明磊国陈克明葛宝丰马慧萍翟远坤
关键词：骨髓基质干细胞骨形态发生蛋白OSTERIX
淫羊藿苷与染料木黄酮对体外培养成骨细胞增殖及矿化成熟影响的对比研究被引量：18
2011年
目的:对比研究淫羊藿苷(icariin,I)与染料木黄酮(genistein,G)对体外培养大鼠成骨细胞(rat calvarial osteo-blasts,ROB)增殖与分化成熟的影响及其药理活性的强弱。方法:取新生SD大鼠颅骨,多次酶消化法获得成骨细胞,培养于含10%FBS的MEM培养液中,3 d后首次换液,铺满90%皿底后传代培养;I与G的作用终浓度为1×10-5 mol.L-1,增殖分析采用96孔板,MTT法分析;分化成熟分析采用24孔板,于成骨性诱导培养第3,6,9,12天分别测碱性磷酸酶(alkaline phospha-tase,ALP)活性、钙盐沉积量、骨钙素,第12天进行ALP组织化学染色、茜素红染色和钙化结节计数;于成骨性诱导培养0,6,12,24,48,72 h提取总RNA,Real-time RT-PCR法检测Runx-2,bFGF,IGF-Ⅰ,Osterix(OSX)等成骨性相关因子的表达情况。结果:终浓度为1×10-5 mol.L-1的I与G均不促进ROB的增殖,均能显著提高细胞ALP活性、增加钙含量、促进骨钙素分泌,并增加钙化结节数量;同时上调Runx-2,bFGF,IGF-Ⅰ和Osterix等成骨性相关因子的表达量;在成骨细胞水平上I促进ROB矿化成熟的药理学活性明显强于G的活性。结论:1×10-5 mol.L-1的I与G均能促进ROB矿化成熟,均有抗骨质疏松的作用,但在成骨细胞水平上I促进ROB矿化成熟的药理学活性显著强于G。
明磊国陈克明葛宝丰马慧萍周建
关键词：成骨细胞淫羊藿苷染料木黄酮骨钙素OSTERIX
异补骨脂素对体外培养骨髓间充质干细胞增殖与成骨性分化的研究被引量：26
2011年
目的:研究异补骨脂素对体外培养大鼠骨髓基质干细胞(bone marrow stromal stem cells,BMSCs)增殖与成骨性分化的影响。方法:取大鼠股骨及胫骨全骨髓,利用全骨髓贴壁培养法培养单核层细胞,培养于含10%FBS的DMEM-F12培养液中,3 d后首次换液,9 d后成骨性诱导培养并用药物干预。异补骨脂素在培养基中终浓度分别为1×10-4,1×10-5,1×10-6,1×10-7 mol.L-1。增殖分析采用MTT法,于成骨性诱导培养第4,8,12,16天测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性、钙盐沉积量、骨钙素分泌量,第15天进行ALP和钙化结节组织化学染色及计数。成骨性诱导后不同时间点提取总RNA,Real-time RT-PCR法检测bFGF,IGF-1,Osterix与Runx-2等成骨性相关的基因表达情况。结果:异补骨脂素剂量依赖性抑制BMSCs增殖,但能促进其成骨性分化,表现为提高BMSCs的ALP活性、促进骨钙素分泌、钙盐沉积量、增加钙化结节数量、提高bFGF,IGF-1,Osterix,Runx-2 mRNA表达水平。结论:终浓度为1×10-5 mol.L-1异补骨脂素能显著促进BMSCs的成骨性分化,证明异补骨脂素是中药补骨脂中抗骨质疏松的有效成分。
明磊国葛宝丰陈克明马慧萍翟远坤
关键词：骨髓基质干细胞异补骨脂素IGF-1OSTERIX
西地那非促进体外培养大鼠骨髓间充质干细胞的成骨性分化被引量：4
2010年
目的研究西地那非对体外培养大鼠骨髓间充质干细胞(Rat bone marrow stromal stem cells,rBMSCs)增殖与成骨性分化的影响。方法取大鼠股骨及胫骨全骨髓,贴壁筛选法培养rBMSCs,每3天换液1次,9d后传代培养。采用终浓度分别为1×10-4、1×10-5、1×10-6、1×10-7mol·L-1的西地那非进行药物干预,MTT法检测细胞增殖率,同时检测成骨性诱导培养后9d的碱性磷酸酶(ALP)活性,筛选出最佳浓度。以最佳药物浓度干预rBMSCs的成骨性分化,比较西地那非组和不加药的对照组之间的钙化结节数量及阳性克隆数(colonies stained positive for alkaline phosphatase,CFU-FALP);提取Total RNA,Real-Time PCR检测Runx-2与Osterix mRNA的表达情况;Western blot法检测Ⅰ型胶原蛋白的分泌量。结果西地那非剂量依赖性抑制细胞的增殖,但可强烈促进成骨性分化,最佳药物浓度为1×10-5mol·L-1。该浓度下的西地那非可明显增加钙化结节和CFU-FALP数量,促进与成骨相关的转录因子Runx-2与Osterix mRNA的表达,同时也可增强Ⅰ型胶原蛋白的分泌。结论浓度为1×10-5mol·L-1的西地那非可明显促进rBMSCs的成骨性分化,提示西地那非在具备其他药理作用的同时,也有较强的抗骨质疏松活性,具备开发为抗骨质疏松药物的潜力。
翟远坤陈克明李志锋明磊国马慧萍
关键词：西地那非骨髓间充质干细胞成骨性分化碱性磷酸酶OSTERIX
金雀异黄酮对体外培养成骨细胞抗缺氧的机制研究被引量：2
2012年
目的:观察金雀异黄酮对缺氧成骨细胞的抗缺氧作用。方法:以大鼠成骨细胞为材料,用三气培养箱建立缺氧模型。设常氧对照组、缺氧对照组和含不同浓度金雀异黄酮的缺氧加药组。比较各组缺氧36 h后细胞活力、ROS含量、细胞凋亡、细胞周期、PCNA表达i、NOS活性和钙化结节面积等,荧光定量PCR检测HIF-1α、BCL-2及Caspase-3 mRNA的表达。结果:金雀异黄酮显著提高缺氧成骨细胞存活率、G1期细胞百分比、钙化结节面积、HIF-1α和BCL-2 mRNA的表达水平,降低凋亡、ROS含量、PCNA表达量i、NOS酶活性和Caspase-3 mRNA表达。结论:金雀异黄酮能保护缺氧成骨细胞并促进其分化。
韩桂秋葛宝丰陈克明马慧萍
关键词：缺氧诱导因子-1Α金雀异黄酮成骨细胞增殖细胞核抗原活性氧簇
金雀异黄酮对体外培养缺氧大鼠骨髓间充质干细胞增殖与成骨分化的影响被引量：9
2011年
目的观察金雀异黄酮对缺氧体外培养大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖与成骨分化的影响。方法采用贴壁筛选法体外培养BMSCs并用三气培养箱建立缺氧模型。设常氧对照组、缺氧对照组和缺氧加药组,其中缺氧加药组细分为1×10-8、1×10-7和1×10-6 mol.L-1组金雀异黄酮组,缺氧处理36 h后分析各组的细胞增殖和成骨性指标包括碱性磷酸酶(ALP)活性、Ⅰ型胶原表达、钙盐沉积量和钙化结节面积等,并用Real Time RT-PCR法检测Runx2和骨形成蛋白(BMP)-2的基因表达情况。结果与缺氧对照组比较,金雀异黄酮抑制BMSCs增殖,显著提高ALP活性、Ⅰ型胶原表达量、钙盐沉积量和钙化结节面积,并提高基因Runx2和BMP-2的表达水平,且呈现出剂量依赖性特点。结论金雀异黄酮具有抑制缺氧BMSCs增殖并促进其成骨分化的作用。
韩桂秋葛宝丰陈克明马慧萍
关键词：金雀异黄酮骨髓间充质干细胞缺氧成骨性分化核心结合因子A1骨形态蛋白-2
金雀异黄酮对体外培养成骨细胞缺氧损伤的保护作用被引量：6
2012年
目的:研究金雀异黄酮(genistein,Ge)对缺氧培养条件下成骨细胞增殖、细胞周期、凋亡和成骨分化等的影响。方法:采用酶消化法分离培养SD大鼠颅骨成骨细胞并用三气培养箱建立缺氧模型。将细胞分为常氧对照组、缺氧对照组和缺氧加药组,其中缺氧加药组进一步分为Ge-6组、Ge-5组及Ge-4组,分别加入1×10-6,1×10-5,1×10-4mol.L-1金雀异黄酮。于缺氧处理36 h后分析各组的细胞存活率、乳酸脱氢酶漏出率、细胞凋亡率、细胞周期等,并用Real time RT-PCR法检测HIF-1α,Bcl-2及Caspase-3的基因表达情况。缺氧处理48 h后检测碱性磷酸酶活性、钙化结节数量和面积等成骨分化指标。结果:与缺氧对照组比较,金雀异黄酮可显著提高细胞存活率,降低乳酸脱氢酶漏出率,减少细胞凋亡并提高G1期细胞百分比,提高HIF-1α和Bcl-2 mRNA的表达水平,抑制Caspase-3 mRNA的表达水平,对碱性磷酸酶活性和钙化结节数量与面积等也有显著提高作用,并都呈现出剂量依赖性特点。结论:金雀异黄酮对成骨细胞缺氧损伤具有明显保护作用。
韩桂秋葛宝丰陈克明马慧萍
关键词：缺氧诱导因子-1Α金雀异黄酮成骨细胞细胞周期
8-异戊烯基柑橘素促进体外培养成骨细胞成熟矿化的研究被引量：6
2011年
研究8-异戊烯基柑橘素对体外培养大鼠颅骨成骨细胞(rat skull osteoblasts,ROB)的分化成熟及生物矿化的影响.取新生大鼠颅骨多次酶消化法得到成骨细胞,培养于含10%FBS的MEM培养液中,3天后首次换液,待细胞铺满皿底传代培养.以碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)为检测指标,96孔板梯度筛选作用最佳浓度,在最佳浓度作用并成骨性诱导培养的第3、6、9、12天测ALP活性、钙盐沉积量;第12天进行ALP和钙化结节组织化学染色及计数;成骨性诱导后不同时间点提取Total RNA,RT real-time PCR法检测成纤维细胞生长因子(bFGF)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、成骨相关转录因子Osterix、Runx-2和骨形态发生蛋白-2(BMP-2)的基因表达情况;成骨性诱导的第4、8、12天裂解获得细胞总蛋白,蛋白质印迹法检测人Ⅰ型胶原蛋白(COL-Ⅰ)的蛋白质表达量.研究结果表明:1×10-6 mol/L能显著促进成骨细胞的成熟分化,表现为提高ROB的ALP活性、促进钙盐沉积、增加钙化结节数量;提高bFGF、IGF-1、Osterix、Runx-2和BMP-2 mRNA表达水平;促进COL-Ⅰ的合成.由此可知终浓度为1×10-6 mol/L 8-异戊烯基柑橘素能显著促进ROB的分化成熟及生物矿化,证明8-异戊烯基柑橘素能促进成骨细胞的分化成熟及生物矿化,作为促进骨修复和抗骨质疏松的有效成分具有较大的药用价值.
明磊国陈克明葛宝丰翟远坤
关键词：成骨细胞分化矿化
脱水淫羊藿素与山柰素对体外培养成骨细胞成熟矿化影响的比较研究被引量：13
2012年
比较研究脱水淫羊藿素与山柰素对体外培养大鼠成骨细胞(rat osteoblasts,ROB)增殖与成熟矿化的影响。取新生SD大鼠颅骨,多次酶消化法获得成骨细胞,培养于含10%FBS的MEM培养液中,3天后首次换液,铺满皿底90%以上后传代培养。分别用1×10 4、1×10 5、1×10 6和1×10 7mol.L 1的脱水淫羊藿素和山柰素进行药物干预,增殖分析采用MTT法,诱导培养9天后检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,筛选出最佳浓度。采用最佳浓度的脱水淫羊藿素和山柰素进行药物干预,比较脱水淫羊藿素、山柰素和对照组之间的ALP、钙盐沉积量、骨钙素分泌量、CFU-FALP和矿化结节数量等成骨性指标。提取总RNA,实时荧光定量PCR(real time PCR)检测BMP-2、Osterix(OSX)及Runx-2的mRNA表达情况,同时提取总蛋白,Western blotting法检测Ⅰ型胶原蛋白的分泌量。结果表明,1×10 4mol.L 1脱水淫羊藿素和山柰素对细胞增殖有抑制作用;1×10 5mol.L 1脱水淫羊藿素虽对ROB增殖无明显影响,但能显著提高成骨细胞中ALP活性、钙盐沉积量和骨钙素分泌量,增加CFU-FALP和矿化结节数量,与成骨细胞成熟矿化相关的因子BMP-2、OSX和Runx-2的基因表达量也显著升高,同时I型胶原蛋白的分泌量也明显增多;而山柰素并没有表现出促进体外培养ROB成熟矿化的特性。脱水淫羊藿素促进成骨细胞成熟矿化的作用明显高于山柰素,很可能是由脱水淫羊藿素8位C原子上存在的异戊烯基引起的。
宋鹏姚娟马慧萍葛宝丰陈克明郭晓宇吕享
关键词：山柰素成骨细胞增殖矿化骨质疏松
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