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国家自然科学基金(31070117)

作品数：5 被引量：11H指数：2
相关作者：李学如江南屏郭泰林姚宁张波更多>>
相关机构：西南交通大学更多>>
发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金四川省科技支撑计划更多>>
相关领域：生物学医药卫生化学工程理学更多>>

文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 3篇生物学
  • 2篇化学工程
  • 2篇医药卫生
  • 1篇轻工技术与工...
  • 1篇理学

主题

  • 3篇球菌
  • 3篇链球菌
  • 2篇兽疫
  • 2篇透明质酸
  • 2篇突变株
  • 2篇缺失突变株
  • 2篇马链球菌兽疫...
  • 2篇化脓性链球菌
  • 2篇基因缺失
  • 2篇基因缺失突变...
  • 1篇毒素
  • 1篇多克隆
  • 1篇多克隆抗体
  • 1篇溶血素
  • 1篇生产菌
  • 1篇透明质酸合成...
  • 1篇突变菌株
  • 1篇重组蛋白
  • 1篇外毒素
  • 1篇烯醇化酶

机构

  • 5篇西南交通大学

作者

  • 5篇李学如
  • 3篇江南屏
  • 3篇郭泰林
  • 2篇任瑶瑶
  • 2篇黄新河
  • 2篇张波
  • 2篇姚宁
  • 1篇马超
  • 1篇孟涛
  • 1篇刘玉川
  • 1篇杨思源
  • 1篇李尧
  • 1篇黎明
  • 1篇李宇兴
  • 1篇邓强
  • 1篇王硕
  • 1篇胡珊
  • 1篇蓝小玲
  • 1篇刘彦宏

传媒

  • 2篇微生物学报
  • 1篇高等学校化学...
  • 1篇中国生物工程...
  • 1篇中国感染控制...

年份

  • 2篇2016
  • 1篇2013
  • 2篇2012
共 5 条 记 录，以下是 1-5
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排序方式：
透明质酸生产菌溶血素S基因缺失突变菌株的构建及其特性被引量：4
2016年
【目的】马链球菌兽疫亚种是工业上生产透明质酸的主要菌种,该菌能产生引起宿主细胞溶血的链球菌溶血素S(streptolysin S,SLS)毒素,因而其产品的安全性一直是人们所担心的问题。本实验的目的就是通过基因敲除的方法构建不产SLS的透明质酸生产工程菌,同时探讨溶血素sag A基因缺失对菌株透明质酸合成和其他毒力因子的影响。【方法】利用温度敏感/自杀性质粒p JR700载体系统,构建马链球菌兽疫亚种sag A基因缺失突变株;通过PCR扩增,溶血平板和SLS含量测定等方法确定sag A基因缺失;采用分光光度、SDS-PAGE和细胞毒性试验等分析方法,对野生菌株和sag A基因缺失突变菌株透明质酸含量、透明质酸分子量、溶血素Hylc、透明质酸分解酶、甘油醛-3-磷酸脱氢酶和菌体表面蛋白等相关毒力因子进行对比研究。【结果】获得了透明质酸产量提高30%而溶血活性极低的马链球菌兽疫亚种sag A基因缺失突变株。该突变株与野生菌株相比较,透明质酸分解酶活性增加而透明质酸相对分子量降低,此外,与毒力相关的表面蛋白含量、溶血素Hylc和甘油醛-3-磷酸脱氢酶活性也显著降低。细胞毒性实验结果表明,野生菌株与sag A基因缺失突变菌株的培养物上清液,对细胞活性的影响存在显著差异。【结论】在马链球菌兽疫亚种中sag A不仅是表达溶血素SLS的基因,同时sag A基因对菌株透明质酸合成、透明质酸分解酶、菌体表面蛋白、溶血素Hylc和甘油醛-3-磷酸脱氢酶等都具有调节作用。
刘玉川李宇兴赖永勤李学如黄新河郭泰林姚宁
关键词：马链球菌兽疫亚种基因缺失突变株透明质酸
链球菌致热外毒素SpeB致病性研究进展被引量：5
2012年
链球菌致热外毒素B（Streptococcal exotoxin B,SpeB）是A群链球菌（group A Streptococcus,GAS）以酶原形式分泌到胞外后形成的活性巯基蛋白酶。其能降解宿主胞外基质、免疫球蛋白和补体成分以及GAS自身表面黏附素M蛋白、F1蛋白、C5a肽酶和其他一些分泌蛋白,破坏宿主防御系统,帮助细菌逃避免疫清除，协助GAS最初感染部位的扩散和入侵宿主深层组织。
张波李学如江南屏任瑶瑶
关键词：A族链球菌免疫病原菌
链球菌烯醇化酶与致热外毒素B成熟的相关性被引量：2
2013年
在化脓性链球菌致热外毒素B(SpeB)活性阳性菌株对数生长末期的细胞培养液中发现1个分子量约为50000的蛋白,该蛋白随后消失;用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离,串联质谱(MS/MS)分析确认该蛋白为链球菌烯醇化酶(Enolase,Eno);通过基因敲除方法构建eno基因缺失突变株,研究了Eno蛋白对SpeB活性形成的影响.结果表明,eno基因的缺失推迟SpeB成熟的时间;通过Far-Western blot分析显示,Eno与SpeB之间能发生相互作用.考虑到化脓性链球菌胞外蛋白通过同一通道分泌,推测Eno可能参与了SpeB酶原分泌到胞外的过程,为新发现的SpeB蛋白分子伴侣.
胡珊马超李学如黎明刘彦宏江南屏郭泰林姚宁
关键词：烯醇化酶化脓性链球菌
构建无抗性标记双拷贝透明质酸合成酶基因工程菌被引量：1
2012年
【目的】探讨一种构建无抗生素选择标记链球菌透明质酸合成酶基因工程菌的方法。【方法】PCR扩增链球菌透明质酸合成酶操纵子hasABC基因,用温度敏感载体pJR700构建携带hasABC基因重组质粒pXL32;电转化pXL32质粒到马链球菌兽疫亚种感受态细胞,卡那霉素(Kanamycin,kan)平板37℃培养筛选重组子,在不含kan液体培养基中30℃传代,37℃平板分离挑取抗生素敏感菌落,RT-PCR检测工程菌染色体hasABC基因表达,Bitter-Muir法测定菌体透明质酸含量。【结果】在无抗生素选择压力条件下,获得透明质酸产率提高34%的马链球菌兽疫亚种透明质酸合成酶基因工程菌。【结论】用pJR700温度敏感载体系统,构建能提高透明质酸产量的无抗生素选择标记的基因工程菌是可行的。
蓝小玲张波李学如李尧郭泰林孟涛任瑶瑶江南屏
关键词：马链球菌兽疫亚种
化脓性链球菌溶血素O活性结构重组蛋白的制备
2016年
生物信息分析化脓性链球菌溶血素O(streptolysin O,Slo)蛋白结构表明,Slo蛋白除含有由461氨基酸残基组成的溶血活性结构域Thiol_cytolysin外,在N端还有一跨膜结构域。利用pET101-GENE蛋白表达系统,成功构建出表达具有Slo活性重组蛋白的重组子,采用镍柱亲和层析分离技术,纯化目的蛋白;纯化蛋白SDS-PAGE检测分析表明,重组蛋白与预测的溶血活性结构域的分子量相一致;溶血实验显示,纯化重组蛋白具有溶血活性。以纯化的重组蛋白为免疫原,对大鼠进行4次免疫,所获得免疫血清经Elisa检测,抗Slo血清效价达到1∶12 800;Western blot检测猪链球菌、马链球菌和化脓性链球菌中的链球菌溶血素结果显示,抗Slo多克隆抗体仅能与化脓性链球菌溶血素O发生反应,表明研究制备的化脓性链球菌溶血素O活性结构重组蛋白抗原具有较好的特异性,所制备的抗原Slo可用于进一步开发抗链球菌溶血素O(ASO)试剂盒。
杨思源潘敬梅王硕邓开轩邓强黄新河李学如
关键词：化脓性链球菌多克隆抗体
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