沈阳市科学技术计划项目(1091174-1-00)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 相关作者：杨滢孟亮于波李阳姜振环更多>>
- 相关机构：中国医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：沈阳市科学技术计划项目辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大鼠心房肌细胞Kir3.1基因siRNA的筛选与鉴定
- 2010年
- 目的应用特异性siRNA抑制新生SD大鼠心房肌细胞Kir3.1基因表达;筛选出干扰效率最高的siRNA,并应用分子生物学方法进行鉴定。方法设计并化学合成3条针对Kir3.1基因的siRNA,脂质体法转染原代培养的新生SD大鼠心房肌细胞,应用Real-time PCR筛选出抑制效率最高的siRNA,将其转染入细胞;于转染后24h、48h、72h提取细胞总RNA及蛋白质,分别采用Real-time PCR和Western blot检测Kir3.1 mRNA及蛋白质表达情况。结果 Real-time PCR显示siRNA-3干扰效率强于siRNA-1,2,能够显著下调心房肌细胞Kir3.1 mRNA的表达;siRNA-3转染心房肌细胞后,发现其在24,48,72h均能使Kir3.1 mRNA及蛋白表达下降。结论针对Kir3.1 mRNA合成的siRNA能够特异性干扰Kir3.1基因表达和蛋白质的合成,这可能为心律失常性疾病的治疗提供新的实验性依据。
- 府晓丹于波李阳姜振环杨滢孟亮
- 关键词：基因SIRNA转染
