国家自然科学基金(39830400)
- 作品数：56 被引量：346H指数：11
- 相关作者：罗向东杨宗城姜勇赵克森石富胜更多>>
- 相关机构：第三军医大学西南医院中国人民解放军第一军医大学解放军322医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 严重腹腔感染时丹参注射液对胃粘膜血流量和胃粘膜内pH值的影响被引量：1
- 2003年
- 目的 探讨丹参注射液对严重腹腔感染状态下大鼠胃粘膜血流量(GMBF)和胃粘膜内pH值(pHi)的影响。方法 将大鼠随机分为对照组、感染组和丹参组;感染组、丹参组大鼠造成肠结扎穿孔致腹腔严重感染模型;丹参组给予丹参注射液。测定穿孔前和穿孔后3、6、12、24、48h各时相大鼠GMBF及pHi。结果 与对照组比较,感染组GMBF在穿孔后3h明显降低,12h降至最低,24h开始回升,48h仍低于对照组;丹参组GMBF在6、12、24h高于感染组,pHi于穿孔后3h即有下降,6h明显低于对照组,12h下降至最低,24h有所恢复,但低于对照组;丹参组pHi在12、24、48h高于感染组。结论 严重腹腔感染状态下GMBF及pHi降低可能是引起胃粘膜屏障受损的主要原因。早期应用丹参注射液对有效预防应激性溃疡的发生有重要临床意义。
- 张超姜军杨宗诚
- 关键词：严重腹腔感染丹参注射液血流量胃粘膜应激性溃疡
- p38丝裂原活化蛋白激酶在不同细胞内定位的研究被引量：8
- 2000年
- 用共聚焦显微镜对不同原代培养细胞的p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen -activatedproteinkinase,MAPK)进行定位 ,以探讨 p38激活后入核在不同的细胞中是否具有普遍性。发现与单核细胞相似 ,未受刺激静止的心肌细胞、平滑肌细胞和内皮细胞的 p38荧光强度呈弥散性分布;脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激后 ,细胞核区荧光强度均明显增加 ,胞浆荧光强度均降低。RAW细胞对LPS诱导p38移位入核的敏感性较其它细胞高 ;在上述4种细胞LPS刺激引起的p38的移位入核速度也不相同。这表明 p38蛋白激酶移位入核依赖于其磷酸化激活 ,且在多种细胞具有普遍性;但在不同细胞LPS诱导 p38移位入核的速度和敏感性有一定差别。
- 张琳姜勇
- 关键词：P38丝裂原活化蛋白激酶细胞内定位信号转导
- TLR4在哺乳动物对脂多糖反应中的作用被引量：32
- 2001年
- Toll信号转导通路在果蝇的发育和天然免疫反应中起重要作用 .最近在小鼠进行的定点克隆研究表明Lps位座编码一种Toll样受体TLR4,该受体作为LPS受体复合物的跨膜成分而转导脂多糖 (LPS)信号 ,而其相关蛋白TLR2则在其他病原体微生物介导的细胞反应中起作用 .TLR4的发现使我们对LPS信号转导通路的认识前进了一大步 .
- 龚小卫姜勇
- 关键词：TOLL样受体4脂多糖信号转导哺乳动物内毒素
- 杀菌性/通透性增加蛋白模拟肽对内毒素致血管内皮细胞损伤的保护作用被引量：10
- 2002年
- 目的 通过杀菌性 通透性增加蛋白 (BPI)模拟肽 (BNEP)拮抗内毒素 (LPS) ,观察对血管内皮细胞分泌白细胞介素 - 6 (IL - 6 )、肿瘤坏死因子 -α(TNF -α)以及表达细胞间黏附分子 -1(ICAM - 1)的影响 ,探讨BNEP对LPS致血管内皮细胞损伤的保护作用。 方法 采用体外培养的原代人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)为模型 ,分别观察单纯应用LPS、BNEP以及不同剂量BNEP与LPS作用后各细胞因子的分泌表达。IL - 6、TNF -α应用双抗夹心酶联免疫吸附法 (ELISA)测定 ;ICAM - 1采用生物素 -抗生物素 -过氧化物酶复合物 (SABC) -cy3免疫荧光染色 ,激光共聚焦扫描显微镜下观察其表达情况。 结果 LPS 10ng ml可使IL - 6分泌量显著增加 ;BNEP 6 0 μg ml即可显著降低 10ng mlLPS诱导的IL - 6分泌 ,随BNEP浓度增加IL - 6分泌量呈降低趋势 ,达2 4 0 μg ml时 ,IL - 6分泌量与单纯应用BNEP组比较 ,差异无显著性意义 (P >0 .0 5 )。BNEP 12 0 μg ml与LPS 10ng ml作用后 ,可使TNF -α分泌量降低 94 % ;BNEP 2 4 0 μg ml可完全阻断TNF -α的分泌。激光共聚焦扫描显微镜观察结果显示 ,BNEP与LPS作用后 ,ICAM - 1在细胞膜及细胞浆的表达明显减弱。 结论 BNEP在阻断LPS对细胞的激活和损伤。
- 程君涛郑江袁建成秦孝建周红肖光夏
- 关键词：模拟肽内毒素血管内皮细胞损伤白细胞介素6胞间黏附分子1内毒素血症
- 血管通透性增高的基本机制被引量：46
- 2003年
- Theincreasedmicrovascularpermeabilityappearsmainlyinvenuleduringinflammation , shock ,andburns .Endothelialcellsplayanimportantroleinvenulepermeabilityenhancement.Therearetwo kindsofpathwayformacromoleculeextravasation .Oneisparacellularpathwayandanotheristranscellular pathway ,whicharerelatedtotheformationofendothelialgaportranscellularopeningsseperately .Thealter ationofintercellularrelatedprotein ,suchasoccludin ,claudin ,zonaoccludens (ZO) ,junctionaladhesion molecule (JAM) ,VE -cadherin ,catenin ,integrin ,etc ,andthealterationofendothelialcytoskeleton ,such asrearrangementofactinfilament,formationofstressfiberandfocaladhesion ,etc ,involveinthepathogenesis ofincreasedmicrovascularpermeability . [
- 赵克森黄巧冰
- 关键词：血管通透性增高
- LPS和TNF-α诱导血管内皮细胞ICAM-1蛋白表达的比较被引量：14
- 2001年
- 目的和方法采用细胞间接免疫荧光染色和激光共聚焦显微镜扫描技术 ,研究脂多糖(LPS)和肿瘤坏死因子α(TNF -α)对人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)表面细胞间粘附分子 -1(ICAM -1)表达的诱导作用。结果与内皮细胞表面ICAM -1的基础表达相比 ,LPS可诱导内皮细胞表面ICAM -1表达在第8～24h显著增加 ,但第36h有较明显的下降 ;TNF -α也可诱导内皮细胞表面ICAM -1表达在第8～24h显著增加 ,并在36h仍维持在较高水平。LPS和TNF -α与内皮细胞ICAM -1表达之间存在剂量反应关系。结论LPS和TNF -α可诱导血管内皮细胞ICAM -1的表达 ,但内皮细胞在表达ICAM -1时对LPS的长期刺激可能产生耐受性。
- 闫文生赵克森姜勇
- 关键词：脂多糖肿瘤坏死因子Α血管内皮细胞细胞间粘附分子-1
- p38 MAPK在脂多糖诱导的人内皮细胞表达诱导型一氧化氮合酶中的作用被引量：13
- 2002年
- 目的研究p38丝裂原激活蛋白激酶(p38 MAPK)在脂多糖(LPS)诱导的人内皮细胞－ECV304诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达和一氧化氮(NO)产生中的作用。方法用Griess法检测人内皮细胞培养液中NO水平,分别用免疫荧光法和 RT－PCR检测细胞 iNOS蛋白和mRNA的表达,采用免疫沉淀法检测细胞 p38 MAPK的活性。结果 与对照组相比,LPS刺激后的BCV304细胞iNOS蛋白和mRNA的表达显著增加,用p38特异性抑制剂SB203580预处理后,可以显著抑制细胞 iNOS的表达和NO的产生。LPS刺激内皮细胞后15 min,p38 MAPK的活性达到高峰,维持45 min后逐渐下降。结论p38MAPK参与了LPS诱导的内皮细胞iNOS的表达和NO的产生;可通过阻断信号转导通路来减少iNOS及其他细胞因子的产生,为败血症休克的防治提供一条新的思路。
- 阚文宏闫文生姜勇王静珍秦清和赵克森
- 关键词：一氧化氮一氧化氮合酶诱导型丝裂原激活蛋白激酶内皮细胞P38MAPK
- p^(38)丝裂原活化蛋白激酶活性放射自显影测定方法的建立和应用被引量：2
- 2001年
- 建立 p38丝裂原活化蛋白激酶 (mitogen activatedproteinkinase ,MAPK)放射自显影激酶活性测定方法 ,并应用于血管内皮细胞中 p38MAPK活性动态变化的研究 .结果表明放射自显影激酶活性测定方法具有很好的量效关系、灵敏性和特异性 .在脂多糖 (lipopolysaccharide ,LPS)刺激的血管内皮细胞 ,p38MAPK在LPS刺激15min后活性增高 ,30～ 6 0min达高峰 ,12 0min后活性逐渐下降 ,较好地反映了LPS刺激的内皮细胞中 p38MAPK活性的动态变化 .国内实验室完全有可能和条件 ,建立本国的放射自显影激酶活性测定方法 ,并应用于信号转导的研究 .
- 闫文生姜勇黄巧冰赵克森
- 关键词：P38丝裂原活化蛋白激酶脂多糖血管内皮细胞
- 内毒素对人脐静脉内皮细胞形态和功能的影响被引量：17
- 2001年
- 目的 研究内毒素对人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)形态和功能的影响 ,探讨内毒素对血管内皮细胞的激活全身性炎症反应、脓毒症、多器官功能衰竭中的作用。 方法 以体外培养的人脐静脉内皮细胞为模型 ,应用倒置显微镜观察内毒素对HUVEC形态的影响 ;ELISA双抗夹心法测定IL 6的含量 ;应用免疫荧光染色法 ,激光共聚焦扫描显微镜观察细胞间粘附分子 1(ICAM 1)的表达。 结果 内毒素可明显改变HUVEC的形态 ,使其发生长梭状变形。刺激HUVEC分泌IL 6的最小剂量为 1ng/ml,呈剂量依赖性增加 ,8h达高峰。激光共聚焦扫描显微镜观察结果显示 ,LPS 10ng/ml与HUVEC作用 2 4h后 ,ICAM 1在核膜及细胞膜的表达都明显增强。 结论 内毒素可明显改变HU VEC的形态和功能 ,对增加血管通透性 ,促进白细胞粘附 ,在炎症瀑布反应的触发过程中可能起着重要的始动作用。
- 程君涛袁建成郑江肖光夏
- 关键词：内毒素内皮细胞白介素6细胞间粘附分子-1
- 内毒素与内皮细胞直接结合和损伤特性的研究被引量：13
- 2001年
- 目的 观察内毒素 (LPS)和内皮细胞的结合及损伤特性。 方法 分离培养大鼠心肌微血管内皮细胞 (MMECs) ,选择不同浓度的LPS及同一浓度不同时相点 ,作用于贴壁状态的MMECs ,应用流式细胞仪、激光共聚焦荧光扫描显微镜 (laserconfocalscanningmicroscope,LCSM )进行观察和图象分析。 结果 (1)随孵育时间延长 ,LPS作用后MMECs的OD值逐渐增加 ,30min为最高点 ,有时间依赖性。 (2 )LPS和MMECs共培养 2h ,LPS浓度从 0 0 312 5～ 2 0 0 0 0 0 g/L ,都可以使MMECs的阳性细胞数及OD值增加 ,0 2 5 0 0 g/L时是OD值的峰值 ,提示该浓度是LPS与MMECs的最佳结合浓度 ,有浓度的饱和性。 (3)LPS可以进入MMECs胞浆和胞核。 (4)LPS可导致MMECs的核移位和脱核。 结论 (1)LPS在无血清状况下可以与内皮细胞结合 ,并进入细胞核。 (2 )LPS可导致内皮细胞的直接损伤。
- 王晓军张莉萍王旭罗向东梁光萍邢玉林杨宗城
- 关键词：内毒素心肌微血管内皮细胞烧伤
