国家科技重大专项(2012ZX09506001-004)
- 作品数：27 被引量：151H指数：8
- 相关作者：黄民李嘉丽王雪丁金晶王长希更多>>
- 相关机构：中山大学中山大学附属第一医院浙江大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金广东省重大科技专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- MAPK1基因多态性与EGFR敏感型非小细胞肺癌患者吉非替尼肝毒性的相关性被引量：11
- 2018年
- 肝毒性的发生是限制吉非替尼临床使用的重要原因,为了更好实现吉非替尼的精准用药,本研究希望能够寻找到可以解释并预测吉非替尼所导致的肝毒性的遗传变异。本研究总共纳入90例非小细胞肺癌晚期的患者进行临床研究。使用MALDI-TOF平台对26个SNPs进行基因分型。在后续分析中,纳入性别、年龄及吸烟状况等混杂因素以评估各SNP对吉非替尼导致的肝毒性的影响,进行多因素分析后,得出肝毒性的严重程度与促分裂元活化蛋白激酶1(MAPK1)rs13515相关(OR=9.467,P=0.074)。本研究通过对吉非替尼药物基因组学的研究确定了其药物性肝损伤的一个预测因素,这些发现有助于设计针对吉非替尼或类似靶向药物的特定毒性的临床试验,从而使患者在长期吉非替尼治疗中受益。
- 冯薇陈曦管少兴张力黄民王雪丁
- 关键词：吉非替尼非小细胞肺癌肝毒性药物基因组学
- CYP2C19、P2Y12基因多态性与缺血性脑卒中患者氯吡格雷抵抗的相关性研究被引量：20
- 2014年
- 目的：考察CYP2C19、P2Y12受体的基因多态性与氯吡格雷抵抗的相关性研究.方法：96例中国缺血性脑卒中患者持续服用氯吡格雷75 mg,收集全血提取DNA,采用Sequenom MassARRAY iPLEX（R）基因型分析技术进行CYP2C19＊ 2（681G＞A,rs4244285）、CYP2C19＊3（636 G＞A,rs4986893）及P2Y12受体（52G＞T,rs6809699） （744T＞C,rs2046934）4个SNPs的基因型分析.采用二磷酸腺苷（ADP）诱导光比浊法测定血小板聚集功能.采用Chi-square检验或Fisher确切概率法分析相关性.结果：患者分为氯吡格雷抵抗（CR）组与非抵抗组,CYP2C19＊ 2（rs4244285）及P2Y12受体（rs2046934）基因型分布在两组间的差异有统计学意义（P=0.027,P=0.034）.其中,CYP2C19＊2 GA＋ AA基因型为CR发生的风险因素（OR=2.607,95％CI：1.062～6.399）.CYP2C19＊3（rs4986893）及P2Y12受体（rs6809699）基因型分布在两组比较中差异无统计学意义（P＞0.05）.结论：在中国缺血性脑卒中患者中,CYP2C19＊2（rs4244285） GA＋ AA型与氯吡格雷抵抗的发生密切相关,该基因型检测将有助于指导氯吡格雷的临床合理应用.
- 陈昕朦金晶黄民蔡业峰
- 关键词：CYP2C19基因多态性氯吡格雷抵抗缺血性脑卒中
- POR基因多态性与华法林维持剂量关系的研究被引量：8
- 2014年
- 目的探讨POR基因多态性与华法林维持剂量的相关性。方法共纳入185例中国汉族人工心脏机械瓣膜置换术患者,采用Sequenom MassARRAYSystem检测VKORC1及POR相关SNPs,采用PCR-RFLP法检测CYP2C9*3基因型。采用ANOVA或t检验考察目的 SNPs与患者华法林维持剂量的关系。结果在CYP2C9*1*1携带者中,POR rs17685 T等位基因携带者(TT型和CT型)华法林维持剂量明显高于CC型携带者(3.50±1.07)mg·d-1vs(3.14±0.94)mg·d-1,P=0.03。在CYP2C9*1*1及VKORC1 rs9934438 GA/GG携带者中,POR rs17685 T等位基因携带者(TT型和CT型)的华法林维持剂量明显高于CC型携带者(4.76±0.90)mg·d-1vs(4.08±1.03)mg·d-1,P=0.04。未发现POR rs2868177与华法林维持剂量存在相关性。结论在中国汉族人工心脏机械瓣膜置换术患者中,POR rs17685 T突变与华法林剂量上调相关,该基因型检测将有助于指导华法林的临床合理应用。
- 胡蓉许哲赵立子李嘉丽王雪丁郑绮姗张希黄民
- 关键词：华法林细胞色素P450单核苷酸多态性
- 供体因素对肾移植术后早期霉酚酸及其代谢物药代动力学的影响被引量：2
- 2016年
- 目的探讨供体因素对肾移植术后早期霉酚酸(MPA)及其代谢物(MPAG)药代动力学的影响。方法纳入42例服用霉酚酸酯(MMF)患者以及23例服用霉酚酸钠肠溶片(EC-MPS)患者及其供体进行研究。用高效液相色谱法检测患者行活体肾移植术后早期患者霉酚酸及其代谢物的血浆药物浓度,霉酚酸酯组采用本实验室前期建立的有限检样法计算AUC_(MPA)及AUC_(MPAG),霉酚酸钠肠溶片组用线性梯形面积法计算AUC_(MPA)及AUC_(MPAG)。分析供体生理条件及肾功能与肾移植受体术后早期体内药物水平的相关性。结果供体年龄与霉酚酸酯组、霉酚酸钠肠溶片组和全体患者术后早期MPAG水平均呈正相关(P<0.05);霉酚酸酯组及全体患者中,高龄供体(>55岁)组患者术后早期MPAG水平显著高于非高龄供体(≤55岁)组的患者(P<0.05)。受体术前的尿素氮水平在霉酚酸酯组和全体患者中与受体术后早期MPAG水平呈正相关(P<0.05)。根据联合用药方案将患者分为他克莫司(FK506)组和环孢素A(Cs A)组,Cs A组患者AUC_(MPAG)显著高于FK506组(P<0.01),FK506组中高龄供体组术后早期AUC_(MPAG)显著高于非高龄供体组(P<0.05),供体术前的尿素氮水平与患者术后早期AUC_(MPAG)呈显著正相关(P<0.05);Cs A组中供体年龄与患者术后早期AUC_(MPAG)呈显著正相关(P<0.05)。结论供体年龄与术前尿素氮水平是肾移植受体术后早期霉酚酸代谢物水平的重要影响因素。
- 刘思李嘉丽刘龙山周守宁张桓熙王长希黄民
- 关键词：肾移植术后早期霉酚酸药代动力学
- 5种人细胞色素P450 2A13突变体的异源表达及其香豆素代谢活性被引量：1
- 2015年
- 目的重组表达人细胞色素P450（CYP）2A13突变体CYP2A13＊2,CYP2A13＊5,CYP2A13＊6,CYP2A13＊8和CYP2A13＊9,并研究CYP2A13突变体与野生型CYP2A13（CYP2A13＊1）对香豆素的代谢活性上的差异。方法通过点突变法构建各CYP2A13突变体。用杆状病毒表达系统制备含各突变体c DNA的重组病毒,并将其与含人源还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸P450氧化还原酶（POR,野生型）的重组杆状病毒共转染昆虫草地夜蛾细胞（sf9）,共表达CYP2A13突变体和POR重组蛋白。将表达产物制备成微粒体与香豆素（0.25~25μmol·L-1）体外孵育30 min,高效液相色谱法测定各重组酶对香豆素的代谢活性。结果Western蛋白印迹结果表明,各重组酶在sf9细胞中得到了表达。体外代谢实验显示,CYP2A13野生型及其突变体蛋白代谢香豆素在Km值上无显著差异,而在Vmax（mol·min-1·mol-1CYP）上,CYP2A13＊2（0.58±0.05,P〈0.05）、CYP2A13＊5（0.71±0.08,P〈0.01）、CYP2A13＊6（0.84±0.09,P〈0.01）、CYP2A13＊9（0.58±0.04,P〈0.05）等突变体与CYP2A13＊1（0.33±0.06）相比有显著性差异,使得这4个突变体的代谢效率增加了40%~108%。结论体外成功表达了具有活性的CYP2A13＊2,CYP2A13＊5,CYP2A13＊6,CYP2A13＊8和CYP2A13＊9重组蛋白。CYP2A13＊2,CYP2A13＊5,CYP2A13＊6和CYP2A13＊9等突变体的香豆素代谢活性明显高于CYP2A13＊1。
- 刘亭李朝辉徐迎春陈枢青
- 关键词：细胞色素P450突变体杆状病毒表达系统香豆素
- PKC信号通路对地高辛在MDCKII-MDR1细胞模型中转运的影响研究
- 通过建立并验证MDCKⅡ-MDR1单层细胞体外药物转运模型,并以此细胞模型为工具,考察蛋白激酶C激动剂Phorbol-12-myristate-13-acetate（PMA）对P-gp介导的地高辛外排转运的影响,再用荧光...
- 黎玉华毕惠嫦钟国平李格林曾桂雄黄民
- 关键词：P-糖蛋白地高辛药物转运
- 白藜芦醇通过拮抗hPXR对P-gp的影响被引量：4
- 2013年
- 目的研究白藜芦醇通过拮抗hPXR对P-gp基因(MDR1)、蛋白表达及活性的影响。方法在LS174T细胞中,采用瞬时共转染报告基因实验研究白藜芦醇对PXR介导的MDR1的转录调节作用,并进一步应用Real-Time定量PCR和Western blot方法检测白藜芦醇作用24 h后对利福平诱导的P-gp基因和蛋白变化的影响,罗丹明转运实验考察P-gp活性的变化。结果双荧光素酶报告基因检测结果显示,25和50μmol.L-1白藜芦醇可通过拮抗PXR将利福平对MDR1的诱导作用由4.70倍分别降至1.76倍和0.69倍(P<0.01),在过表达hPXR的LS174T细胞中,50μmol.L-1白藜芦醇可以将利福平诱导的MDR1 mRNA水平由1.8倍降至1.3倍(P<0.05),Western blot结果表明白藜芦醇也可降低利福平诱导的P-gp表达。此外,罗丹明转运实验显示,25和50μmol.L-1白藜芦醇可以将利福平抑制的累积量由77.7%升至91.7%和95.1%(P<0.05),表明白藜芦醇可降低利福平诱导的P-gp活性。结论白藜芦醇可以通过拮抗PXR而影响P-gp的基因、蛋白表达及活性。
- 邓蓉蓉毕惠嫦金晶周许年应梦佳黄民
- 关键词：P-糖蛋白白藜芦醇利福平酮康唑
- 相关miRNAs对LS174T细胞中MRPs的影响被引量：1
- 2013年
- 目的探讨相关miRNAs对多药耐药蛋白MRPs转录的影响。方法经脂质体瞬时转染,将pCMX-miR-328,pC-MX-miR-206及pCMX-miR-613表达质粒转入LS174T细胞,24h后采用荧光定量RT-PCR检测相关MRPs的mRNA变化。结果在LS174T细胞内过表达hsa-miR-328,能够降低MRP3的mRNA表达水平,其抑制率为0.32(P<0.05);hsa-mir-206能够降低MRP1的mRNA表达水平,其抑制率为0.35(P<0.05)。hsa-mir-613对LS174T细胞中的相关MRPs表达无影响。结论 hsa-miR-328和hsa-miR-206在LS174T细胞系中可以抑制MRP3和MRP1的转录表达。
- 应梦佳毕惠嫦胡冰芳周许年金晶钟国平黄民
- 关键词：MRP基因调控多药耐药转染
- 人CYP的异源表达及其在新药研发早期的作用被引量：1
- 2013年
- 人细胞色素P450(cytochrome P450,CYP)在临床上对外源及内源性的物质代谢起着至关重要的作用。由于从人组织中获取的CYP成分较为复杂,且人组织本身不易获得,人们开始用各种表达系统来进行CYP的异源表达,并将表达得到的单一CYP用于药物代谢及药物-药物相互作用的研究,从而大大提高了药物高通量筛选的效率。另外,由于药物代谢酶的多态性使不同人群表现出对某种药物药效的差异,因此对某种CYP突变体的异源表达和药物代谢研究,将有助于指导治疗方案的优化,实施个体化药物治疗。
- 谢章明陈枢青
- 关键词：细胞色素P450酶系统异源表达药物利用药物设计
- NFKBIA 3'UTR不同基因型载体的构建及其功能差异性比较
- 2016年
- 验证NFKBIA基因3'非翻译区(3'UTR)两个SNP--rs8904C>T和rs696G>A的功能。以两个位点分别为CC纯合子和GA杂合子基因型的人全基因组DNA为模板,通过设计不同引物以扩增长度为503 bp的NFKBIA基因3'UTR片段,经测序验证后将该片段克隆至荧光素酶载体pGL3-promoter中,构建4种重组质粒pGL3-rs8904C/rs696G、pGL3-rs8904C/rs696A、pGL3-rs8904T/rs696G和pGL3-rs8904T/rs696A,并转染LS174T细胞,检测荧光素酶活性。与转染了pGL3-vector组(阴性对照)相比,转染重组双荧光素酶报告质粒的荧光素酶活性均显著下降(P<0.001)。对于rs696G>A,含等位基因A的两种重组质粒pGL3-rs8904C/rs696A和pGL3-rs8904T/rs696A的荧光素酶活性分别比含等位基因G的两种重组质粒pGL3-rs8904C/rs696G和pGL3-rs8904T/rs696G下降约45.1%(P<0.05)和56.1%(P<0.001)。对于rs8904C>T,含等位基因T的两种重组质粒分别与含等位基因C的两种重组质粒相比,荧光素酶活性无显著性差异。NFKBIA基因3'UTR双荧光素酶报告基因载体构建成功,并发现rs696G>A会减弱荧光素酶活性的表达,rs8904C>T对荧光素酶活性的表达无明显影响。
- 杨朔李嘉丽毕惠嫦周守宁刘晓曼曾行胡冰芳黄民
- 关键词：单核苷酸多态性
