江苏省脑病生物信息重点实验室开放课题(Jsbl0702)
- 作品数:4 被引量:4H指数:1
- 相关作者:程言博杨亚萍胡伟东刘春风印晓星更多>>
- 相关机构:苏州大学附属第二医院苏州大学徐州医学院附属医院更多>>
- 发文基金:江苏省脑病生物信息重点实验室开放课题国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学化学工程更多>>
- 银杏叶提取物对6-OHDA诱导PC12细胞氧化应激的影响被引量:1
- 2010年
- 目的探讨银杏叶提取物(Ginkgo bilobaextract,GBE)对6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OH-DA)诱导的PC12细胞氧化应激的保护作用及其机制。方法经不同剂量GBE预处理体外培养的PC12细胞后,加入6-OHDA诱导多巴胺能神经元损伤模型。用MTT法检测PC12细胞活力;分光光度法测定细胞过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)的活性和总抗氧化能力(T-AOC)的水平;硫代巴比妥法测定细胞丙二醛(MDA)含量。结果100μmol/L的6-OHDA处理PC12细胞24 h,细胞活力较正常对照组明显降低(P<0.01),CAT、GSH-Px、T-SOD的活性和T-AOC的水平明显降低(P<0.05),MDA含量明显升高(P<0.05);与模型组比较,不同剂量GBE预处理组的PC12细胞活力逐渐升高,CAT、GSH-Px、T-SOD的活性和T-AOC的水平明显升高(P<0.05),MDA含量明显减少(P<0.05)。结论GBE对6-OHDA诱导的PC12细胞氧化应激具有抑制作用,提高CAT、GSH-Px、T-SOD的活性和T-AOC的水平可能是其抗氧化作用的机制之一。
- 王杰程言博印晓星
- 关键词:银杏叶提取物6-羟基多巴胺PC12细胞氧化应激
- 银杏叶提取物对6-OHDA致PC12细胞损伤的保护作用及机制
- 2011年
- 目的探讨6-羟基多巴胺(6-OHDA)对PC12细胞的损伤作用,观测银杏叶提取物(Ginkgo biloba extract,GBE)对该损伤的保护作用并探讨其作用机制。方法采用细胞培养的方法,建立PC12细胞的6-OHDA损伤模型。MTT比色试验检测细胞活性,Hoechst33342荧光染色观察细胞形态变化,ELISA法检测胞质多巴胺(DA)的含量,免疫印迹法检测caspase~3观察细胞凋亡。结果40mg/LGBE对100umol/L6~OHDA作用于PC12细胞24h具有一定的保护作用,GBE可明显升高6-OHDA诱导的PC12细胞DA的含量(与损伤组比较,P〈0.05),GBE可减少6-OHDA诱导的PCI2细胞caspase-3过度表达。结论GBE可减轻6-OHDA诱导的PCI2细胞损伤和凋亡,其作用可能与抑制caspase-3蛋白酶的激活有关。
- 王杰程言博牟杰印晓星
- 关键词:银杏叶提取物PC12细胞6-羟基多巴胺
- 自噬参与老龄大鼠对Rotenone神经毒性的易感性被引量:3
- 2009年
- 目的探讨自噬是否参与老龄SD大鼠多巴胺(DA)能神经元对Rotenone神经毒性的易感性。方法♂SD大鼠,分别构建3、12、20mon组,每个月龄组又随机分为自然增龄组和Rotenone处理组,以Rotenone1.0mg·kg-1.d-1背部皮下注射,连续给药30d,每周停药1d,构建SD大鼠Rotenone染毒模型。大鼠黑质连续切片,进行酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)免疫组化染色;Western blot检测黑质部位微管相关蛋白轻链-3(LC3)蛋白表达水平;透射电镜观察黑质神经元中自噬体形成和溶酶体激活。结果在自然增龄组,大鼠黑质TH阳性细胞计数以12mon组为最高;Rotenone处理后各月龄组TH阳性细胞计数均比相应自然增龄组降低(P<0.01),且20mon组降低最为明显。Western blot结果显示,自然增龄组大鼠黑质部位LC3表达在20mon组比3mon组下降(P<0.01),Rotenone处理后各月龄组大鼠黑质部位LC3表达均比相应自然增龄组上调(P<0.01)。透射电镜显示Rotenone处理后大鼠黑质神经元可见自噬小体和溶酶体数目增多。结论自噬参与老龄大鼠DA能神经元对Rotenone神经毒性的易感性。
- 胡伟东柯国秀程言博杨亚萍苏敏李冬辉孙雪刘春风
- 关键词:自噬鱼藤酮LC3
- 四环素调控A30P突变α-synuclein转基因小鼠的构建
- 2009年
- 为了构建四环素调控的人A30P突变α-synuclein转基因小鼠模型,将外源基因pTRE2-syn和pBC-rtTA同时显微注射到FVB小鼠(Mus muscculus)受精卵的雄原核中,将注射后存活的受精卵移植到同期发情的假孕受体鼠输卵管中,出生个体经PCR检测,获得rtTA和A30P突变α-synuclein双阳性转基因雌鼠1只,A30P单基因阳性雄鼠13只并传代。强力霉素诱导后双阳性后代脑区各部分A30P突变α-synucleinmRNA均有表达,而在诱导满4周后,脑干α-synuclein蛋白表达明显增加,8周后增加更明显。结果表明,通过强力霉素诱导后,可在小鼠小脑、脑干、海马、皮层检测到A30P mRNA表达,脑干α-synuclein表达量显著增加。
- 胡伟东杨亚萍程言博钱进军李莉张萍石际俊刘春风
- 关键词:四环素Α-SYNUCLEIN转基因