国家自然科学基金(30772038136071989)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 相关作者：吴轲高英方泽民周鸿敏何文涛更多>>
- 相关机构：华中科技大学孝感市中心医院更多>>
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- 相关领域：生物学更多>>
- 小鼠骨髓源性肥大细胞的培养及鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的:在体外利用小鼠骨髓干细胞诱导获得高纯度的肥大细胞。方法:从小鼠股骨获得骨髓细胞,放入含10%胎牛血清的RPMI1640培养基中,加入不同浓度的刺激因子,即IL-3和SCF各分别为10ng/ml、15ng/ml、20ng/ml,放入CO2培养箱中培养4周,用免疫组化观察CD117的表达,用流式细胞术检测CD117和FcεRIα双阳性细胞的比例,用甲苯胺蓝染色法观察细胞的成熟度,并与较常用的肥大细胞系P815做比较。结果:培养获得的肥大细胞,其中IL-3和SCF分别为10ng/ml和15ng/ml时均可在4周后得到纯度大于95%的CD117和FcεRIα双阳性肥大细胞,而20ng/ml时FcεRIα的表达却有所降低,双阳性细胞仅达90%,而P815细胞系表达FcεRIα的比例很低。免疫组化发现培养获得的细胞大部分均表达CD117。甲苯胺蓝染色发现培养获得的细胞核被染成深蓝色,胞浆中布满大量紫红色的颗粒,呈现肥大细胞的典型特征。而P815却少见典型的紫红色异染颗粒。结论:用IL-3和SCF各10ng/ml可在体外成功培养获得高纯度的小鼠骨髓源性肥大细胞,且其在表型和成熟度方面均好于P815细胞系。
- 张维娜吴轲周鸿敏彭清臻何文涛高英林星光方泽民陈忠华
- 关键词：肥大细胞骨髓小鼠
