转基因生物新品种培育专项(2008ZX08008-004)
- 作品数:1 被引量:2H指数:1
- 相关作者:杨艳靳亚平陈华涛刘军李倩更多>>
- 相关机构:西北农林科技大学更多>>
- 发文基金:转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 奶山羊BLG基因敲除载体的构建被引量:2
- 2011年
- 根据已知的BLG序列设计引物,通过PCR技术克隆同源臂序列,5′端同源臂2 264bp,包括外显子1,3′端同源臂4 461bp,包括全部的外显子3、4、5、6、7,分别连入克隆载体pMD18-T Simple载体中并测序。然后以含有正负筛选标记基因的ploxpⅡ载体为基础,将5′端和3′端同源臂片段先后连入其中,进行酶切、PCR鉴定。将构建好的基因敲除载体转化组成型表达Cre重组酶的大肠杆菌BM25.8,验证Loxp位点的活性。结果表明,构建了奶山羊BLG基因第2外显子缺失的基因敲除载体pBLG2T,且pBLG2T载体中的正选neo基因可以被Cre重组酶去除。为获得BLG 1条等位基因缺失型细胞株以及培育高产优质奶山羊新品种奠定基础。
- 陈华涛李倩胡林勇王爱华靳亚平刘军杨艳
- 关键词:奶山羊基因敲除打靶载体
- 用乳腺上皮细胞生产人乳铁蛋白转基因克隆羊的研究
- 引言国内外普遍采用胎儿成纤维细胞作为生产转基因克隆动物的供体细胞。但目前国内外还没有用转基因乳腺上皮细胞作供核细胞获得克隆羊的报道,其重构胚的发育能力还不清楚。
- 袁玉国成勇丁国梁安礼友赵俊辉曹玉娟
- 关键词:核移植乳腺上皮细胞人乳铁蛋白山羊
- 文献传递
- 人乳铁蛋白cDNA乳腺特异性表达载体的构建及其生物学功能分析
- 本试验的目的是构建人乳铁蛋白(hLF)基因的乳腺特异性表达载体并验证其在乳腺细胞中的表达情况。本载体以山羊β-casein基因上游包括启动子、外显子1、内含子1、部分外显子2作为5’端调控序列,下游包括部分外显子7、内含...
- 孟立张艳丽许欣钟部帅闫益波黄荣宋洋王子玉王锋
- 关键词:HLF生物学功能
- 文献传递