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国家科技攻关计划(2003BA712A09-01)

作品数:1 被引量:1H指数:1
相关作者:周爱国周晓俊曹毅宁北芳朱淮民更多>>
相关机构:第二军医大学更多>>
发文基金:国家科技攻关计划更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇单克隆
  • 1篇单克隆抗体
  • 1篇乙型
  • 1篇乙型脑炎
  • 1篇乙型脑炎病毒
  • 1篇原核
  • 1篇原核细胞
  • 1篇膜蛋白质类
  • 1篇脑炎
  • 1篇脑炎病毒
  • 1篇抗体
  • 1篇克隆
  • 1篇包膜蛋白
  • 1篇病毒
  • 1篇病毒包膜蛋白
  • 1篇病毒包膜蛋白...

机构

  • 1篇第二军医大学

作者

  • 1篇朱淮民
  • 1篇宁北芳
  • 1篇曹毅
  • 1篇周晓俊
  • 1篇周爱国

传媒

  • 1篇中华实验和临...

年份

  • 1篇2008
1 条 记 录,以下是 1-1
排序方式:
乙型脑炎病毒prM蛋白单克隆抗体的制备被引量:1
2008年
目的克隆日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)前膜蛋白(prM)编码基因,原核表达、纯化prM蛋白,以纯化产物为免疫原制备单克隆抗体(mAb);方法从感染JEV病毒的鼠脑中克隆编码JEV prM蛋白的基因并将其克隆人原核表达载体pET32a,转化大肠埃希菌BL21(DE3)LysS后以IPTG诱导表达。表达产物经Ni-NTA纯化后进行SDS-PAGE分析。用纯化的蛋白免疫BALB/c小鼠,经细胞融合和亚克隆后筛选出能分泌识别prM蛋白的mAb的杂交瘤细胞株。用Western Blot和免疫组化方法检测单克隆抗体的特异性。结果从鼠脑中克隆出约500bp的JEV prM基因,将其克隆人原核表达载体中,在大肠埃希菌中获得了较好表达。纯化的prM蛋白免疫BALB/c小鼠,经传统细胞融合及筛选方法制备出单克隆抗体,抗体滴度为10^5。ELISA、Western Blot和免疫组化检测结果证实该株单抗具有较好的特异性。结论成功的表达和纯化了日本乙型脑炎病毒的prM蛋白,并完成了单克隆抗体的制备,为乙型脑炎病毒感染的早期诊断及预防的研究奠定了良好的基础。
宁北芳朱淮民周晓俊曹毅周爱国
关键词:脑炎病毒病毒包膜蛋白质类原核细胞抗体单克隆
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