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HPLC法测定宫颈癌患者血浆顺铂浓度的研究: 2015年; 目的建立一种便捷、准确测定宫颈癌化疗患者血浆中顺铂（Cisplatin,DDP）浓度的高效液相色谱测定法（HPLC）,为实时监测血浆顺铂浓度及制定化疗方案提供实验依据。方法取500μL待检者血浆,先将血浆样本经甲醇沉淀蛋白,取上清液经二乙基二硫代氨基甲酸钠（DDTC）衍生,再由三氯甲烷萃取。色谱柱为Ultimate Acclaim120C18（5μm,4.6mm×250mm）,流动相为甲醇∶水=75∶25;流速为1.0mL/min;紫外检测波长为254nm;柱温35℃;进样量20μL。结果血浆顺铂浓度检测的线性范围为0.2~10mg/L（r=0.9995）,最低检测限为0.057mg/L（S/N=3）,相对回收率为100.8%±3.6%,日内和日间RSD均〈10%。结论该方法处理过程简便、快速,重复性好,可用于宫颈癌化疗患者血浆顺铂浓度测定和顺铂药物动力学研究。; 董滨华孙蓬明毛晓丹阮冠宇林芬; 关键词：妇科肿瘤宫颈癌顺铂血药浓度

HAI-1与妇科恶性肿瘤的研究进展被引量：2: 2017年; 妇科恶性肿瘤严重威胁女性健康,已逐渐成为重大公共健康问题,从而引起广泛的重视。其中,女性肿瘤中三大肿瘤的发病率也位居全国恶性肿瘤发病率的前十位,并且其发病率和死亡率呈逐年上升趋势。由于肿瘤的发生、发展是一个多因素、多步骤的复杂过程,因此控制其发生、发展极为重要。肝细胞生长因子激活物抑制因子(HAI)基因是一种位于15号染色体上的内源性抑制因子,主要生理功能是抑制肝细胞生长因子激活物、丝氨酸蛋白酶等体内生物酶的活性。近年来有众多学者发现HAI-1与恶性肿瘤生长抑制有关,同时发现在妇科恶性肿瘤的发生、发展、浸润、转移、分化以及肿瘤血管形成中HAI-1发挥重要作用。; 金琼董滨华孙蓬明; 关键词：宫颈肿瘤子宫内膜肿瘤卵巢肿瘤

Matriptase与子宫内膜癌侵袭转移相关性的研究进展被引量：4: 2015年; 侵袭和转移是恶性肿瘤的重要生物学特征之一,也是造成肿瘤患者死亡的主要原因。肿瘤的侵袭和转移是一个复杂的病理过程,涉及多种蛋白酶,包括基质金属蛋白酶和丝氨酸蛋白酶等。近来研究发现一种Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶Matriptase可通过激活尿激酶型纤溶酶原激活物、肝细胞生长因子/扩散因子、蛋白酶活化受体2和前列腺蛋白酶原促进肿瘤细胞的侵袭和转移,与多种恶性肿瘤,如乳腺癌、食管癌、前列腺癌、宫颈癌、卵巢癌、子宫内膜癌等的发生、发展密切相关。因而Matriptase有望成为恶性肿瘤一个新的诊断和治疗靶标。综述Matriptase与子宫内膜癌侵袭转移的相关性。; 薛丽芳孙蓬明项双卫; 关键词：丝氨酸内肽酶类子宫内膜肿瘤肿瘤转移

顺铂对人子宫内膜癌RL-952细胞系Matriptase,uPA-mRNA表达的影响被引量：1: 2015年; 目的探讨顺铂对人子宫内膜癌RL-952细胞系Matriptase,uPA-mRNA表达的影响。方法体外培养人子宫内膜癌RL-952细胞,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测顺铂对人子宫内膜癌RL-952细胞Matriptase,uPA-mRNA表达的影响。结果 Matriptase,uPA-mRNA在人子宫内膜癌RL-952细胞系呈阳性表达。顺铂可下调Matriptase,uPA-mRNA在人子宫内膜癌RL-952细胞系的表达,具有浓度依赖性。8mg/L顺铂溶液作用不同时间后,4h后RL-952细胞Matriptase-mRNA表达量即明显下降(P<0.05),而uPA-mRNA表达量于作用8h后才开始下降(P<0.05),具有时间依赖性。结论顺铂可抑制人子宫内膜癌RL-952细胞系Matriptase,uPA-mRNA的表达,并具有浓度依赖性。8 mg/L的顺铂作用于人子宫内膜癌RL-952细胞后,Matriptase-mRNA比uPA-mRNA更早出现表达下调的变化。; 吕玉琼孙蓬明江忠清毛晓丹薛丽芳; 关键词：MATRIPTASE UPA 顺铂子宫内膜癌

不同转移能力的卵巢上皮性癌细胞中matriptase mRNA和蛋白的表达及与其转移能力的相关性被引量：2: 2013年; 目的研究不同转移能力的卵巢上皮性癌（卵巢癌）细胞中胰蛋白酶样Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶（matriptase）的表达，并探讨其与卵巢癌细胞转移能力的相关性。方法选取卵巢癌细胞系H08910及其配对高转移能力细胞系H08910PM，应用体外划痕实验及穿膜（transwell）小室法检测两种细胞的体外迁移及侵袭能力，应用逆转录（RT）-PCR和细胞免疫荧光技术检测两种细胞中matriptase mRNA和蛋白的表达水平，并对卵巢癌细胞中matriptasemRNA和蛋白的表达水平与其体外迁移、侵袭能力的相关性进行Pearson相关性分析。结果体外戈4痕实验最示，划痕后培养24h，H08910PM细胞的迁移距离为（347±8）μm，明显大于H08910细胞的（154±10）灿m（P〈0．01）；穿膜小室法检测显示，24h后H089IOPM细胞的穿膜细胞数为（90．7±2．1）个，明显高于H08910细胞的（63．3±1．5）个（P〈0．01）。RT—PCR技术检测显示，H08910PM细胞巾matriptase mRNA的表达水平为0．72±0．03，明显高于H08910细胞的0．38±0．04（P〈0．01）；细胞免疫荧光技术检测显示，H08910PM细胞叶1matriptase蛋白的表达水平为15．6±0．8，明显高于H08910细胞的7．6±1．3（P〈0．01）。Pearson相关性分析显示，卵巢癌细胞中matriptase mRNA和蛋白的表达水平与其迁移（r=0．992，r=0．971；P〈0，01）及侵袭（r=0．973，r=0．958；P〈0．01）能力均呈明显正相关。结论高转移能力的卵巢癌细胞系H08910PM细胞中matriptase mRNA和蛋白的表达水平均明显高于低转移能力的卵巢癌细胞系H08910细胞，matriptase基因的表达与卵巢癌细胞的迁移和侵袭能力可能存在相关性，其机制有待进一步研究。; 江忠清陈小芳孙蓬明毛晓丹林芬宋一一; 关键词：卵巢肿瘤肿瘤转移丝氨酸内肽酶类

赖氨酰氧化酶样-4与尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体在人宫颈癌细胞中的表达及意义被引量：2: 2014年; 目的探讨赖氨酰氧化酶样基因-4(LOXL4)、尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)及其受体(uPAR)在人宫颈癌细胞株中的表达。方法采用半定量RT-PCR方法检测人宫颈癌细胞株Hela、ME180、HCC94中LOXL4、uPA和uPAR mRNA的表达,同时运用Western blot技术检测各细胞中LOXL4蛋白的翻译情况。结果 LOXL4mRNA在三株人宫颈癌细胞株中表达差异有统计学意义(P<0.01),其中在Hela细胞株中表达浓度最高,ME180细胞株表达浓度次之,而HCC94细胞株表达浓度最低;而uPA、uPAR mRNA表达浓度水平在HCC94细胞中最高,明显高于Hela、ME180细胞的表达浓度水平(P<0.05)。结论 LOXL4、uPA、uPAR基因表达可能与宫颈癌细胞的侵袭和迁移有关。; 于祥远王秀萍董滨华毛晓丹林芬孙蓬明; 关键词：宫颈癌尿激酶型纤溶酶原激活物尿激酶型纤溶酶原激活物受体反转录PCR 蛋白免疫印迹

Matriptase与子宫内膜癌细胞株侵袭迁移能力的相关性研究被引量：4: 2015年; 目的:探讨Matriptase与子宫内膜癌细胞侵袭转移能力的相关性。方法:采用荧光定量PCR和Western blot法检测HEC-1A、HEC-1B和RL952细胞中Matriptase、HAI-1 mRNA和蛋白表达水平;构建Matriptase基因SiRNA慢病毒载体,采用RNA干扰技术,对Matriptase高表达的HEC-1A和RL952细胞进行瞬时转染,从而达到抑制Matriptase基因表达水平的目的。应用细胞划痕实验及穿膜小室实验观察干扰前后癌细胞体外侵袭及迁移能力的改变。结果:荧光定量PCR检测结果显示,Matriptase和HAI-1 mRNA在HEC-1A细胞(0.2123±0.021和0.2827±0.049)和RL-952细胞(0.1778±0.013和0.2420±0.032)中为均阳性表达;在HEC-1B细胞中为阴性表达(0.000695±0.00012和0.00263±0.00043)。Western blot结果显示,Matriptase和HAI-1在HEC-1A细胞和RL-952细胞中为阳性表达,在HEC-1B细胞中为阴性表达。转染siRNA后,HEC-1A细胞和RL-952细胞的Matriptase mRNA和蛋白表达水平显著下降,抑制率达80%以上,HAI-1表达水平未见明显改变,Matriptase/HAI-1比值明显降低(HEC-1A:0.75 vs 0.11,P<0.01;RL-952:0.0.73 vs 0.12,P<0.01)。细胞划痕实验和穿膜小室实验显示,癌细胞体外侵袭及迁移能力显著下降。结论:Matriptase表达水平与子宫内膜癌细胞侵袭迁移能力呈正相关,Matriptase/HAI-1比值降低亦可能抑制癌细胞的侵袭迁移。; 薛丽芳孙蓬明项双卫毛晓丹阮冠宇董滨华林芬; 关键词：MATRIPTASE HAI-1 RNAI

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福建省自然科学基金(2012J01310)

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