国家自然科学基金(31271264) 作品数:7 被引量:8 H指数:2 相关作者: 江华 章杰 芦立轩 刘安堂 汪汇 更多>> 相关机构: 第二军医大学 南昌大学第一附属医院 上海伊莱美医疗美容医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市基础研究重大(重点)项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
兔肋软骨解剖及生物力学实验模型研究 2016年 目的:通过对兔肋软骨进行解剖测量以及生物力学测试,探索建立兔肋软骨解剖及生物力学实验模型的方法。方法:对8只新西兰大白兔进行解剖,观察胸廓及肋骨、肋软骨的结构和排列。剥离软骨膜后测量肋软骨的长度及横径;对第4至第7肋软骨进行压缩测试和拉伸测试。结果:兔胸廓是由胸骨、肋骨(含肋软骨)及脊柱构成的上小下大的笼状结构,多数兔拥有12对肋骨,12.5%有13对肋骨。其中第1-7肋通过软骨直接与胸骨相连,称为真肋;第8-10肋软骨不直接与胸骨相连,而是通过韧带连接,称为假肋;第11-13肋游离在腹壁中,是为浮肋。肋软骨的长度从第1至第7肋逐渐增加,从第8至第13肋逐渐减少。真肋的横径明显比假肋及浮肋的大。正常兔肋软骨压缩测试中抗压强度平均12.73±1.06 MPa,极限压缩应变平均63.77%±2.67%,压缩模量平均27.64±1.88 MPa;拉伸测试中抗拉强度平均3.78±0.48 MPa,极限拉伸应变19.79%±2.38%,拉伸模量平均25.94±4.09MPa。结论:新西兰大白兔可提供数量可观且有一定尺寸的肋软骨,其力学性能与青年人类肋软骨接近,可作为研究软骨手术操作的实验动物。 郭荣 史滢深 侯强 刘蔡钺 刘安堂 朱鴷 江华关键词:肋软骨 动物模型 生物力学 敲减水通道蛋白1对小鼠雪旺细胞形态及水转运的影响 2014年 目的探讨水通道蛋白1(AQP1)基因表达和雪旺细胞肿胀之间的关系。方法细胞免疫荧光双标法验证小鼠面神经来源的原代雪旺细胞AQP1表达;应用慢病毒RNA干扰技术下调雪旺细胞AQP1表达;AQP1-shRNA感染雪旺细胞后,与CTRL组(scr-shRNA)比较,每天在倒置相差显微镜下观察细胞形态变化,连续6d;细胞容积测定量化AQP1-shRNA细胞与CTRL(scr-shRNA)细胞水含量变化;MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测AQP1-shRNA对雪旺细胞凋亡的影响。结果小鼠面神经来源的原代雪旺细胞表达AQP1;构建的小鼠AQP1-shRNA慢病毒载体感染雪旺细胞后,能在mRNA和蛋白水平明显抑制AQP1表达(P<0.05);AQP1-shRNA能使雪旺细胞形态皱缩,细胞水含量明显降低(P<0.01);AQP1-shRNA细胞较CTRL组细胞增殖活力低(P<0.05),但不会引起雪旺细胞明显的凋亡。结论 AQP1是控制雪旺细胞快速水转运的主要因素,抑制AQP1表达可能提供一种临床治疗面神经水肿的新方法。 章杰 江华 刘安堂 朱鴷 张文俊 芦立轩关键词:水通道蛋白 慢病毒 面瘫 水通道蛋白在胶质细胞的表达及其意义 被引量:3 2013年 20世纪80年代,美国学者Peter Agre发现质膜上存在一类介导水快速跨膜转运的膜蛋白,这类膜蛋白被称作水通道蛋白。已有大量研究发现胶质细胞表达的水通道蛋白对神经系统疾病的发生有重要作用。本文综述水通道蛋白在胶质细胞的表达定位及其意义,为中枢和周围神经系统疾病的诊断和治疗提供新的靶点。 章杰 芦立轩 江华关键词:水通道蛋白 胶质细胞 神经系统 慢病毒介导的shRNA干扰大鼠施万细胞RSC96 MYH14基因的表达 被引量:1 2018年 目的应用RNA干扰技术构建大鼠肌球蛋白重链14(MYH14)基因重组慢病毒载体并鉴定。方法根据MYH14 mRNA序列设计合成单链引物形成双链寡核苷酸序列,连接入经AgeⅠ和BamHⅠ双酶切线性化的GV298慢病毒质粒载体中,菌液经PCR鉴定并测序验证。取测序正确的菌液提取质粒转染大鼠施万细胞RSC96,利用免疫荧光法观察转染效率,蛋白质印迹法筛选有效敲低MYH14的shRNA质粒,CCK-8法检测转染后RSC96细胞的活力。结果合成3对MYH14-shRNA序列并将其克隆到GV298载体中,构建了重组质粒MYH14-shRNA1、2、3,经菌液PCR鉴定和测序筛选出测序正确的载体MYH14-shRNA1和MYH14-shRNA2。免疫荧光检测结果显示转染72 h时RSC96细胞荧光表达最强;蛋白质印迹法检测结果显示,与阴性对照(scramble序列)组相比,MYH14-shRNA2转染后RSC96细胞中MYH14蛋白的表达水平降低(0.57±0.15 vs 1.11±0.06,P<0.01),而MYH14-shRNA1转染后MYH14蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。MYH14-shRNA2转染RSC96细胞24 h后的细胞活力与阴性对照组相比差异无统计学意义(1.09±0.16 vs 1.00±0.15,P>0.05)。结论成功构建大鼠MYH14基因重组慢病毒干扰载体,该载体能有效下调RSC96细胞中MYH14的表达。 胡皓 孟威 刘安堂 汪汇 朱晓海 江华 钱玉鑫关键词:短发夹RNA 慢病毒 施万细胞 水通道蛋白1在周围神经系统中的分布与功能研究进展 被引量:3 2019年 水通道蛋白1(AQP1)是分布于周围神经系统的主要水通道蛋白,其在三叉神经节、背根神经节和肠神经系统等外周神经结构的神经元和神经胶质细胞中均有表达。AQP1可能参与周围神经系统神经节和神经纤维束在生理和病理情况下水平衡的调节,在维持周围神经系统病理状态下细胞内外的水平衡中起关键作用。研究AQP1分布与功能将有助于深入理解神经系统的病理生理活动,并为临床治疗提供新的途径和方法。本文对近年来相关研究进展作一综述。 孟威 江华关键词:水通道蛋白1 周围神经系统 三叉神经节 脊神经节 肠神经系统 水通道蛋白1过表达对小鼠施万细胞形态及水转运的影响 2016年 目的探讨水通道蛋白1(AQP1)基因表达和施万细胞肿胀之间的关系,明确AQP1在面神经损伤后水肿中的功能。方法细胞免疫荧光双标法验证小鼠面神经来源的原代施万细胞AQP1表达;应用慢病毒介导的过表达技术上调施万细胞AQP1表达;Lenti—AQP1感染施万细胞后,每天在倒置相差显微镜下观察细胞形态变化,并与CTRL组(emptyvector)比较,连续6d;细胞容积测定量化Lenti—AQP1细胞与CTRL细胞水含量变化。结果小鼠面神经来源的原代施万细胞表达AQP1;构建的小鼠Lenti—AQP1慢病毒载体感染施万细胞后,能在mRNA和蛋白水平明显增加AQP1表达(P〈0.05);AQP1过表达能使施万细胞肿胀,细胞形态近似圆形,细胞水含量显著增加(P〈0.01)。结论AQP1是控制施万细胞快速水转运的主要因素,对面神经水肿的发生有重要作用。 章杰 杨红华 彭丽 江华关键词:水通道蛋白1 施万细胞 面神经损伤 基因治疗 小鼠水通道蛋白1基因慢病毒载体构建及其在神经膜细胞中的表达 被引量:2 2013年 目的构建表达小鼠水通道蛋白1(AQP1)基因的慢病毒载体,体外感染原代培养的C57BL/6小鼠神经膜细胞,观察是否提高AQP1的表达,为进一步研究AQP1与周围神经系统损伤后水肿的关系奠定基础。方法将小鼠AQP1基因克隆到慢病毒pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP载体,通过PCR和测序鉴定获得连接正确的克隆。将鉴定后的重组表达质粒pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP-AQP1与包装质粒psPAX2、pMD共转染293T细胞,制备携带AQP1基因的慢病毒lentivirus-AQP1。体外培养C57BL/6小鼠的神经膜细胞,将lentivirus-AQP1感染神经膜细胞,RT-PCR和蛋白质印迹法检测感染后神经膜细胞AQP1 mRNA和蛋白的表达情况。结果构建的慢病毒载体pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP-AQP1经PCR鉴定和测序正确。慢病毒lentivirus-AQP1感染神经膜细胞后AQP1表达增加(P<0.05)。结论成功构建了小鼠AQP1基因的慢病毒表达载体,该载体能有效感染神经膜细胞,使AQP1 mRNA和蛋白表达水平增高。 章杰 江华 汪汇 方帆 宋艳玲 芦立轩关键词:水通道蛋白1 慢病毒 神经膜细胞