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辽宁省教育厅高等学校科学研究项目(L2010127)

作品数:3 被引量:5H指数:2
相关作者:卢建民范松涛秦秀虹张珍珍张晨曦更多>>
相关机构:大连医科大学附属第一医院上海交通大学上海市第一人民医院更多>>
发文基金:辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 3篇中文期刊文章

领域

  • 3篇医药卫生

主题

  • 2篇血管
  • 2篇视网膜
  • 2篇网膜
  • 1篇新生血管
  • 1篇新生血管性
  • 1篇新生血管性疾...
  • 1篇血管内皮
  • 1篇血管内皮生长...
  • 1篇血管性疾病
  • 1篇眼部
  • 1篇眼部新生血管
  • 1篇眼部新生血管...
  • 1篇乙酰转移酶
  • 1篇人血
  • 1篇人血管
  • 1篇视网膜病
  • 1篇视网膜病变
  • 1篇视网膜新生血...
  • 1篇糖尿
  • 1篇糖尿病

机构

  • 3篇大连医科大学...
  • 1篇上海交通大学
  • 1篇上海市第一人...

作者

  • 3篇范松涛
  • 3篇卢建民
  • 2篇张珍珍
  • 2篇秦秀虹
  • 1篇张晨曦

传媒

  • 2篇眼科新进展
  • 1篇大连医科大学...

年份

  • 2篇2013
  • 1篇2012
3 条 记 录,以下是 1-3
排序方式:
强力霉素诱导携带人血管内皮生长因子A-shRNA的1/2型重组腺相关病毒的包装及鉴定被引量:3
2013年
目的通过Helper-Free腺相关病毒包装系统包装由强力霉素(doxycycline,DOX)诱导的携带hVEGFA-shRNA-GFP的1/2型重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus,rAAV),测定病毒滴度并检测其对人视网膜血管内皮细胞(human ret-inal vascular endothelial cell,HRVEC)血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor,VEGFA)的敲除作用。方法将AAV-293细胞复苏、培养后传代。用磷酸钙转染法将质粒pAAV-hVEGFA-shRNA-GFP、1/2型腺相关病毒质粒(pAAV1/2)和pHelper质粒共转染AAV-293细胞,包装生成带有hVEGFA-shRNA-GFP的1/2型rAAV,将此rAAV感染AAV-293细胞,荧光显微镜观察病毒转染和感染效率。斑点杂交法测定病毒滴度。将HRVEC分为3组培养,正常对照组、HRVEC+rAAV组及HRVEC+rAAV+DOX诱导组,Western-blotting法检测VEGFA的敲除作用。结果 3种质粒共转染AAV-293细胞,发现病毒包装过程中细胞培养基颜色由红色变为橘黄色,细胞变圆并脱离培养皿底部,漂浮于培养基中。荧光显微镜下观察可见,24h后AAV-293细胞表达绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP),72h表达GFP细胞数比例可达95%~100%;共转染成功,包装得到DOX诱导的携带有hVEGFA-shRNA-GFP的1/2型rAAV,斑点杂交法检测病毒滴度为1015v.g.·L-1。HRVEC于重组病毒感染后第3天高表达GFP。免疫印迹法检测正常对照组、HRVEC+rAAV组及HRVEC+rAAV+DOX诱导组HRVEC中VEGFA表达量的变化发现:HRVEC+rAAV组其VEGFA表达量较正常对照组明显下降,HRVEC+rAAV+DOX诱导组其VEG-FA表达量较HRVEC+rAAV组明显降低。提示rAAV对细胞内VEGFA具有显著的敲除作用,并且DOX有加强VEGFA敲除的作用,病毒包装成功。结论 DOX诱导的携带有hVEGFA-shRNA-GFP的1/2型rAAV的包装获得成功,收获病毒具有较高滴度,能成功地感染HRVEC,并对HRVEC的VEGFA具有明显敲除作用,同时DOX有加强VEGFA敲除的作用,为眼底新生血管疾病基因治疗的研究提供了实验基础。
秦秀虹范松涛卢建民张珍珍
关键词:重组腺相关病毒SHRNA强力霉素血管内皮生长因子
Tubedown-1与眼部新生血管性疾病
2013年
Tubedown-1是一种新发现的N-末端乙酰转移酶,是酵母菌NAT-1氨基末端乙酰转移酶的同源异型体,编码一个大约69 kD大小的有乙酰转移酶活性的蛋白质。目前认为tubedown-1可能参与脉管系统发育的调控,并抑制缺氧及糖尿病视网膜新生血管形成,有望为眼科血管性疾病的治疗提供新的方法。
秦秀虹范松涛张珍珍卢建民张晨曦
关键词:乙酰转移酶视网膜新生血管
阿司匹林与糖尿病患者玻璃体出血以及玻璃体切割术疗效的相关性研究被引量:2
2012年
目的探讨糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)患者应用小剂量阿司匹林对玻璃体出血发生率以及玻璃体切割术(pars plana vitrectomy,PPV)疗效的影响。方法回顾性采集具有阿司匹林应用史或玻璃体出血病史458例DR患者,并对其中97例行PPV的DR患者进行随访研究。结果应用阿司匹林DR患者年龄49~85(69.3±4.2)岁高于未应用阿司匹林患者年龄45~82(60.3±3.4)岁(P<0.05)。应用阿司匹林患者中具有玻璃体出血病史患者占45.59%(93/204),而未应用阿司匹林患者中具有玻璃体出血病史患者占40.94%(104/254),差异无统计学意义(P>0.05)。应用阿司匹林患者中,具有玻璃体出血病史患者阿司匹林应用剂量和应用时间与无玻璃体出血病史患者比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。应用阿司匹林患者与未应用阿司匹林患者术后视力与术前比较均明显提高(均为P<0.05),且术后玻璃体出血发生率、二次手术率以及视力改善程度差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论小剂量阿司匹林的应用并不增加DR患者玻璃体出血的发病率,同时也不增加PPV术后并发症。DR患者可以应用小剂量阿司匹林,且PPV术前仍可继续应用。
范松涛卢建民
关键词:阿司匹林糖尿病视网膜病变玻璃体出血玻璃体切割术
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