国家自然科学基金(30672099)
- 作品数：4 被引量：15H指数：3
- 相关作者：周利群何志嵩宋刚那彦群郝金瑞更多>>
- 相关机构：北京大学第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 紫杉醇和吉西他滨对膀胱癌细胞株T24中核小体结合蛋白1表达的影响及意义被引量：3
- 2010年
- 目的探讨不同浓度紫杉醇、吉西他滨对膀胱癌细胞株T24细胞中核小体结合蛋白1（NSBP1）表达的影响及意义。方法分别用10％、40％、80％的50％抑制浓度（IC50）的紫杉醇和吉西他滨作用T24细胞48h后收获细胞。利用RT-PCR和蛋白质印迹方法检测NSBP1在各组细胞中的表达水平，并与对照组（0％IC50）进行比较。结果RT-PCR结果提示，在0％、10%、40％、80％IC50浓度紫杉醇作用下，T24细胞中NSBPl相对表达量分别为0．392±0．024、0．227±0．037、0．135±0．063、0．091±0．017，组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）；0％、10％、40％、80％IC50浓度吉西他滨作用下，T24细胞中NSBPl相对表达量分别为0．492±0．044、0．262±0．031、0．151±0．014、0．089±0．011，组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。蛋白质印迹结果提示，0％、10％、40％、80％IC50浓度紫杉醇作用下，T24细胞中NSBP1蛋白相对吸光度A值分别为0．473±0．017、0．252±0．041、0．194±0．023、0．118±0．016，方差分析显示组间差异有统计学意义（P〈0．05）；0％、10％、40％、80％IC50浓度吉西他滨作用下，T24细胞中NSBP1蛋白相对A值分别为0．581±0．014、0．201±0．033、0．135±0．021、0．1114±0．011，组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论紫杉醇、吉西他滨能使T24细胞中NSBP1表达水平降低，可能成为化疗药物作用靶点之一。
- 张崔建李学松瓦斯里江·瓦哈甫姚鲲宋刚何志嵩周利群
- NSBP1基因干扰RNA慢病毒载体的构建及效应检测
- 2009年
- 目的构建和鉴定NSBP1基因RNA干扰慢病毒表达载体。方法针对NSBP1mRNA设计了3条siRNA,并构建pGCSIL-GFP-NSBP1慢病毒质粒,测序鉴定。用pGCSIL-GFP-NSBP1、pHelper1.0和pHelper2.0质粒共转染293T细胞包装产生慢病毒,测定病毒滴度。将慢病毒转染前列腺癌DU145细胞,Western-blot检测NSBP1表达,MTT法检测细胞生长活性,用转染细胞种植裸鼠成瘤,观察抑瘤效果。结果PCR和测序证实,成功构建LV-shNSBP1的慢病毒载体,病毒滴度达2×108TU/mL。转染细胞中NSBP1蛋白表达显著降低,且MTT检测细胞生长活性明显减慢,转染细胞在裸鼠体内成瘤率没有影响,但对肿瘤的生长有明显抑制作用。结论人NSBP1基因RNA干扰慢病毒载体构建成功,且NSBP1对前列腺癌激素非依赖DU145细胞的生长具有重要作用。
- 蒋宁周利群辛殿祺吕天敬韩文科
- 关键词：RNA干扰慢病毒WESTERNBLOTMTT
- Downregulation of the nucleosome-binding protein 1 （NSBP1） gene can inhibit the in vitro and in vivo proliferation of prostate cancer cells被引量：7
- 2010年
- 这 studay 是构造 lentiviral 向量 harbouring 指向编码人的高活动性的组 nucleosomal 绑定蛋白质的基因的一个 RNA 干扰(RNAi ) 序列 1 (NSBP1 ) ；为了在导致 G2/M 学习它的角色，在前列腺癌症(PCa ) 分阶段执行拘捕和 apoptosis DU145 房间；并且估计效果它的在在 vitro 并且在 vivo 的房间增长上击倒。RNAi 被使用由生产 NSBP1 的 lentiviral plasmids 在 PCa 房间线 DU145 将 NSBP1 表示击倒小发卡 RNA。在在 DU145 细胞击倒的 NSBP1 以后，细胞的生长率被 MTT，和 G2/M 细胞周期拘捕分析， apoptosis 用 FACScalibur 流动 cytometer 被估计。瘤生长在裸体老鼠被估计。NSBP1， cyclin B1 和 Bcl-2 的 mRNA 和蛋白质表示层次被 reverse-transcriptase 聚合酶链反应并且西方的弄污在 vitro 并且在 vivo 分析。NSBP1 击倒在 96 h，在裸体老鼠的减少的瘤生长，和 G2/M 房间周期拘捕(8.78%) 和 apoptosis (2.19 褶层) 的正式就职与 PscNC lentivirus 控制房间相比处于房间的生长率导致了 22.6% 减少。与房间周期拘捕和 apoptosis 一致， cyclin B1 和 Bcl-2 的 mRNA 和蛋白质表示层次被减少。在结论， NSBP1 原因击倒统计上重要的抑制在里面 vitro 并且在 PCa 细胞线 DU145 的 vivo 生长。生长抑制是部分至少由于 NSBP1 击倒导致 G2/M 房间骑车拘捕和 apoptosis。现在的数据提供 NSBP1 击倒导致 G2/M 阶段拘捕和 apoptosis 可以由 NSBP1 源于 cyclin B1 和 Bcl-2 的否定规定的证据，与结果这些蛋白质的减少的表示。
- Ning JiangLi-Qun ZhouXiao-Yu Zhang
- 关键词：核小体细胞周期阻滞
- 抑制核小体结合蛋白1基因对人前列腺癌细胞LNCaP增殖的作用被引量：7
- 2007年
- 目的利用 RNA 干扰(RNAi)技术,探讨核小体结合蛋白1(NSBP1)基因对人激素依赖前列腺癌细胞系 LNCaP 增殖的作用。方法设计并合成针对 NSBP1的4种小分子干扰 RNA(siRNA)(包含1种阴性对照),构建能抑制 NSBP1 mRNA 表达的重组 pSilencer 2.1-U6 neo 质粒,转染LNCaP 细胞。应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western 印迹实验检测不同质粒对 NSBP1表达的抑制效率,选取抑制效率最高的质粒转染 LNCaP 细胞,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞增殖活性,用流式细胞光度术检测细胞周期的变化。结果筛选出抑制效率最高的质粒 pSilencer-81(mRNA水平抑制80%,蛋白水平抑制85%),与阴性对照 pSilencer-Neg 质粒分别转染 LNCaP 细胞。转染60 h后,经过84 h、108 h,一直到132 h,LNCaP/81细胞 A 值(代表细胞活性)低于 LNCaP/Neg 细胞 A 值,差异均有统计学意义(t=4.501,4.282,5.229,4.759,均 P<0.05)。抑制率随时间延长而增加,在84h 有所降低,在108 h 达最大值30.2%。转染60 h 后,经过84 h,一直到108 h,LNCaP/81细胞的G_2M+S 期细胞百分率较 LNCaP/Neg 细胞的降低,差异均有统计学意义(t=3.705,3.887,8.220,均P<0.05)。结论针对 NSBP1的 siRNA 通过抑制前列腺癌 LNCaP 细胞中 NSBP1基因的表达,能明显抑制细胞的增殖,NSBP1可能参与前列腺癌细胞生长增殖过程。
- 周利群宋刚何志嵩郝金瑞那彦群
- 关键词：前列腺肿瘤载体蛋白质类RNA
