国家重点实验室开放基金(SMFA12K16)
- 作品数：2 被引量：4H指数：2
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- 相关机构：安徽医科大学军事医学科学院军事医学科学院附属医院更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家重点实验室开放基金国家自然科学基金更多>>
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- poly(U)加尾microRNA检测方法建立及其检测被引量：2
- 2013年
- 目的建立一种poly(U)加尾RT-PCR检测微RNA(microRNA,miRNA)分子的新方法。方法提取细胞总RNA,用poly(U)聚合酶在miRNA 3'端添加U尾,逆转录为cDNA,实时定量PCR检测miRNA分子。结果经poly(U)聚合酶加尾RT-PCR方法可以成功地检测miRNA分子。结论本研究建立的poly(U)加尾RT-PCR方法可有效地检测并分析miRNA分子,具有特异性强,灵敏度高的特点,为miRNA的检测分析及功能机制研究提供了一种新方法。
- 李珊珊付汉江铁轶朱捷邢瑞云郑晓飞
- 关键词：微RNAPCR
- mRNA氧化损伤检测方法的优化及p53 mRNA氧化损伤分析被引量：2
- 2013年
- 目的建立并优化检测真核细胞mRNA氧化损伤的方法——反转录阻断-双引物扩增法,检测p53 mRNA氧化损伤。方法建立非细胞体系和细胞体系mRNA氧化损伤模型,提取RNA并反转录成cDNA,根据所检测mRNA的5'端和3'端各设计一对引物,以cDNA为模板进行实时定量PCR。结果非细胞体系和细胞体系氧化处理组GAPDH和p53 mRNA的氧化损伤程度均明显高于对照组,且随着过氧化氢浓度增加RNA氧化损伤增强;同时一定限度内降低反转录酶用量能提高检测灵敏度。结论本研究建立并优化的RNA氧化损伤检测方法能检测特定mRNA对氧化的敏感性及损伤程度,为分析相关疾病造成的RNA氧化损伤以及探索其发病机制和治疗方法提供了技术支持。
- 马春花铁轶付汉江刘斌邢瑞云朱捷丁勇郑晓飞
- 关键词：RNAP53MRNA
