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细菌菌影作为新型疫苗和递送载体的研究进展被引量：4: 2014年; 细菌菌影(bacterial ghost,BG)是革兰阴性生菌在噬菌体PhiX174的裂解基因E的作用下形成不含核酸、核糖体等胞质内容物的细菌空壳。这种细菌空壳保留了与天然细菌一样的完整外膜结构,且不具有活菌样的致病作用,可作为疫苗无需佐剂就能诱导机体产生体液免疫应答和细胞免疫应答。菌影内部及外膜上可装载DNA、抗原和药物等异源物质,易被机体免疫细胞识别捕获,使其成为一种新型的生物递送载体。另外,菌影具有制备简单,易于保存等优点。; 杨慧焦红梅; 关键词：疫苗

淋病奈瑟菌rmp基因缺失突变株的构建及其抗体杀菌作用研究被引量：1: 2013年; 目的研究淋病奈瑟菌的外膜蛋白Rmp在免疫阻抑中的作用及其消除策略。方法PCR扩增淋病奈瑟菌rmp基因，将rmp中间200个核苷酸残基用卡那霉素抗性基因Kan取代，含rmp两侧侧翼区和Kan的DNA片段△rmp：Kan转化淋病奈瑟菌WHO—A菌株，PCR和Westernblot鉴定野生rmp被突变基因（△rmp：：Kan）取代并不能表达Rmp的突变株。突变株免疫小鼠，并用抗体介导的补体杀菌作用研究免疫血清的抗菌活性。结果构建了珊p基因缺失的淋病奈瑟菌突变株，突变株诱生的抗体具有更强的杀伤淋病奈瑟菌活性。结论淋病奈瑟菌丌印基因缺失突变株可能消除了野生株中Rmp的免疫阻抑作用，在新型全细胞减毒活疫苗研制中具有潜在应用价值。; 李国才解如山冒艳丽刘双喜焦红梅陈红菊严华季明春; 关键词：淋病奈瑟菌同源重组减毒活疫苗

淋病奈瑟菌NspA原核表达及其抗原性研究: 2012年; 目的研究淋病奈瑟菌表面蛋白A（NspA）的抗原性及其在淋病快速诊断技术中的应用价值。方法用PCR技术克隆淋病奈瑟菌NspA基因，构建其原核表达载体，在大肠杆菌中表达重组NspA，表达产物复性后免疫小鼠，Western blot、ELISA分别检测免疫血清与淋病奈瑟菌细胞裂解液中NspA及与淋病奈瑟菌全细胞的结合能力。结果NspA基因可在大肠杆菌中表达，纯化并复性的重组NspA（rrNspA）可在小鼠体内刺激产生高效价特异性抗体，抗rrNspA抗体可与淋病奈瑟菌完整细胞及细胞裂解液中NspA特异性结合。结论获得的rrNspA及抗rrNspA抗体在建立淋病奈瑟菌抗体或抗原快速检测方法中具有潜在的应用价值。; 李国才解如山蒋桂花朱立天焦红梅潘兴元陈红菊严华季明春; 关键词：淋病奈瑟菌抗原性

菌影作为疫苗佐剂的潜力及其机制的研究进展被引量：1: 2020年; 细菌菌影(bacterial ghosts,BGs)是革兰阴性菌的细菌空壳,含有天然的免疫刺激剂(如脂多糖、鞭毛蛋白等),是固有免疫和适应性免疫细胞的强效激活剂。体内外试验研究表明,BGs具有免疫佐剂效应,能够诱导多种细胞产生前炎症细胞因子,后者可招募T细胞和B细胞聚集淋巴结,进而激活一系列体液免疫、细胞免疫及黏膜免疫应答。本文总结了菌影作为疫苗佐剂的广泛应用及其诱导免疫应答的机制,以期为新型疫苗制剂的研制提供思路。; 赵丹郑文浩(综述)焦红梅李国才(审校); 关键词：疫苗佐剂

人癌胚抗原相关细胞黏附分子1介导的小鼠淋病奈瑟菌易感性: 2011年; 目的研究制备淋病奈瑟菌感染人癌胚抗原相关细胞黏附分子1（hCEACAMl）转基因小鼠模型的可行性。方法用hCEACAMl真核表达载体pCDPGICEAl，通过显微注射法制备转基因小鼠，PCR及序列分析法检测目的基因在小鼠基因组中的整合，Westernblot及FACS技术检测目的基因的表达，镜检及培养法检查淋病奈瑟菌对转基因小鼠的感染。结果产生的22只F0代小鼠中4只为转基因整合阳性，其中1只可表达hCEACAMl蛋白，且目的蛋白表达在细胞膜上。淋病奈瑟菌可在转基因小鼠中形成感染。结论hCEACAMl转基因小鼠可作为淋病奈瑟菌感染研究的转基因动物模型。; 李国才杜庆辉王晓红王劲松于峰刘双喜解如山焦红梅严华季明春; 关键词：转基因小鼠淋病奈瑟菌易感性

大肠杆菌菌影制备及介导pEGFP-N1在RAW264.7细胞中表达被引量：3: 2014年; 通过PCR扩增噬菌体PhiX174裂解基因E,并将其插入到温控表达载体pBV220中,构建重组温控表达质粒pBV220-E。将重组质粒pBV220-E转化至大肠杆菌DH5α中,升温到42℃诱导E基因的表达。将真核表达质粒pEGFP-N1与大肠杆菌菌影孵育后转染小鼠巨噬细胞RAW264.7,荧光显微镜观察pEGFP-N1的表达情况。结果表明:扩增的E基因全长为276bp,与GenBank公布的基因序列一致。电镜观察结果显示,细菌表面出现跨膜孔道,细菌内容物经孔道排出形成空壳。荧光显微镜观察结果显示,大肠杆菌菌影介导的pEGFP-N1在小鼠巨噬细胞中获得表达。为进一步研究以细菌菌影为基础的新型灭活疫苗和载体疫苗提供参考依据。; 焦红梅贺丽杨慧李国才陈红菊严华戴华季明春; 关键词：转染

肠炎沙门菌菌影的制备及其作为疫苗载体的特性分析被引量：3: 2019年; 目的制备肠炎沙门菌菌影并对其作为疫苗载体的特性进行研究。方法以带有噬菌体裂解基因E的溶菌质粒为模板,温控溶菌盒EBOX经PCR扩增和酶切后重组到pBBR1MCS2载体中并导入沙门菌,经42℃诱导表达后测定裂解效率;将真核表达载体pEGFP-N1负载沙门菌菌影后转染小鼠巨噬细胞,荧光显微镜观察和流式细胞仪检测GFP的表达情况;用负载重组质粒pVAX1-NspA的沙门菌菌影经口灌胃免疫BALB/c小鼠,ELISA检测诱导抗体产生情况。结果重组菌诱导后的裂解效率达99%。沙门菌菌影负载pEGFP-N1转染小鼠巨噬细胞后可检测到GFP的表达。3次免疫两周后,负载重组质粒pVAX1-NspA沙门菌菌影免疫小鼠特异性血清IgG水平和黏膜IgA水平(A_(450)值)分别为0.60±0.05和0.53±0.06,负载pVAX1沙门菌菌影免疫组分别为0.32±0.07和0.22±0.03,差异有统计学意义(P<0.01)。结论制备的肠炎沙门菌菌影免疫能诱导特异性IgG和IgA抗体产生,可作为疫苗载体介导抗原的表达。; 焦红梅郑文浩杨慧堵嘉诚刘夕珑周芳鸣成伟; 关键词：疫苗载体

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