国家自然科学基金(30901473)
- 作品数：9 被引量：25H指数：3
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- 类糖尿病环境对P19细胞分化为心肌细胞的影响
- 2013年
- 目的:探讨在类糖尿病环境下诱导P19细胞向心肌细胞分化过程中心肌转录因子GATA结合蛋白4(GATA bindingprotein 4,GATA4)和心肌特异标志物心肌肌钙蛋白T(cardiac troponin T,cTnT)的表达水平。方法:体外类糖尿病环境下,诱导P19细胞向心肌细胞分化,通过Real-time PCR和蛋白质印迹法分别检测其cTnT和GATA4在不同时间点的mRNA以及蛋白表达水平。结果:在分化过程中,类糖尿病组P19细胞分化形成的胚胎样小体较正常组增殖缓慢,形成的生长晕松散零乱。类糖尿病环境下GATA4 mRNA的表达量在分化第6、8、10天(0.05±0.06、0.11±0.04、0.45±0.12)均明显低于同时间点的对照组(1.00±0.04、0.44±0.06、0.78±0.20),cTnT mRNA的表达量(0.12±0.03、0.07±0.04、0.46±0.11)均明显低于同时间点的对照组(1.02±0.25、0.25±0.02、0.71±0.21)。蛋白质印迹法结果用积分光密度值量化数据,类糖尿病环境下分化第6、8、10天GATA4蛋白表达(0.40±0.06、0.25±0.03、0.92±0.13)均明显低于同时间点的对照组(0.69±0.09、0.75±0.08、1.05±0.07)。类糖尿病环境下分化第6、8天cTnT蛋白表达(0.39±0.08、0.37±0.05)均明显低于同时间点的对照组(0.79±0.05、0.54±0.07)。统计结果表明在分化第6、8天时,类糖尿病环境下GATA4和cTnT mRNA和蛋白的表达量与对照组相比,差异均有统计学意义。结论:类糖尿病环境培养降低了P19细胞向心肌细胞的分化。
- 方旭杨荣徐春阳张浩钱玲梅盛燕辉孔祥清
- 关键词：P19细胞分化心肌细胞
- NOMO1基因在大鼠胚胎心脏发育过程中的表达被引量：1
- 2013年
- 目的:检测NOMO1基因在SD大鼠胚胎心脏发育过程中mRNA表达变化及定位,并探讨其在胚胎心脏发育的意义。方法:24只孕鼠随机分为6组,每组4只,分别于妊娠12 d(D12)、15 d(D15)、16 d(D16)、17 d(D17)、19 d(D19)、21 d(D21)时取出胎鼠,取其心脏,采用实时定量PCR(real-time PCR)技术检测心脏组织中NOMO1基因mRNA的表达丰度,并应用荧光原位杂交(FISH)的方法对其进行定位分析。结果:在妊娠D12、D15、D16、D17、D19、D21的胚胎心脏中NOMO1基因mRNA均有表达,且呈由弱到强再减弱趋势,表达高峰出现在D16;该基因主要表达于心外膜中,而在心肌层、心内膜、心瓣膜等处未见表达。结论:NOMO1基因的表达随大鼠胚胎的心脏发育呈动态表达,可能与心脏发育相关。
- 徐春阳杨荣张浩盛燕辉孔祥清
- 关键词：胚胎心脏发育
- 小鼠NOMO1基因RNA干扰载体的构建及其功能的初步研究被引量：2
- 2012年
- 目的:构建小鼠NOMO1基因RNA干扰载体,比较其对P19细胞NOMO1基因的抑制效率,以研究NOMO1基因与P19细胞向心肌细胞方向分化的关系。方法:利用Designer3.0软件设计小鼠NOMO1基因干扰片段,合成shRNA序列,再行寡核苷酸双链的合成,退火后形成的寡核苷酸双链克隆到pGPU6/Hygro载体的黏性末端,连接产物转化到感受态细胞,增菌,质粒扩增,质粒DNA抽提,使用PstⅠ、BamHⅠ进行双酶切和DNA测序鉴定重组克隆。将小鼠NOMO1基因RNA干扰载体转染P19细胞,以RT-PCR技术验证NOMO1基因在P19细胞中的mRNA表达。以DMSO诱导分化方案诱导P19细胞向心肌细胞分化,采用定量RT-PCR技术检测P19细胞中α-MHC等基因mRNA的表达,评估NOMO1与P19干细胞向心肌细胞方向分化的关系。结果:双酶切证实shRNA正确插入质粒,测序结果表明插入的序列正确。载体转染的P19细胞筛选稳定表达株,经RT-PCR和Western blot验证4个位点设计的干扰质粒对NOMO1在P19细胞中的mRNA表达均具有较高的抑制效率。转染后P19细胞的α-MHC基因mRNA表达则显著下调(P<0.05)。结论:成功构建小鼠NOMO1基因RNA干扰载体,为研究NOMO1基因与P19细胞向心肌细胞方向分化的关系提供了稳定的转染细胞工具,NOMO1可能通过诱导α-MHC等基因表达,促进P19干细胞向中胚层的分化。
- 沈震陈欢欢张浩盛燕辉杨荣孔祥清
- 关键词：先天性心脏病RNA干扰RNA干扰载体P19细胞
- 先天性心脏病患者介入治疗前后血浆NT-proBNP和cTnT变化被引量：10
- 2015年
- 目的探讨先天性心脏病(CHD)患者介入治疗前后血浆N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)和心肌肌钙蛋白T(cTnT)水平的变化。方法检测98例左向右分流型CHD患者介入术前后血浆NT-proBNP及cTnT水平,采用超声心动图测定左室舒张末期内径(LVEDD)和射血分数(EF)。结果介入治疗均获得成功。与术前1d相比,动脉导管未闭(PDA)和室间隔缺损(VSD)患者术后1d和3d血浆NT-proBNP均降低,而房间隔缺损(ASD)患者术后1d增加、术后3d降低(P<0.01)。所有患者术前、术后cTnT无显著变化(P>0.05)。与术前1d相比,PDA和VSD患者术后3d的LVEDD减小、EF增加(P<0.01),而ASD患者LVEDD和EF无显著变化(P>0.05)。结论 CHD患者介入治疗后短期内心功能即有改善,无明显心肌损伤。检测血浆NT-proBNP水平有助于评估CHD患者介入前后的心功能。
- 张莉张浩杨荣盛燕辉孙伟张海锋孔祥清
- 关键词：先天性心脏病心脏介入治疗N末端脑钠肽前体心脏肌钙蛋白T
- 年龄≥60岁的房间隔缺损患者的介入封堵治疗被引量：2
- 2016年
- 目的：探讨年龄≥60岁的房间隔缺损（atrial septal defect,ASD）患者介入封堵治疗的安全性和有效性。方法：分析51例拟行ASD介入封堵术的年龄≥60岁患者的临床资料特征及手术效果,并与其他年龄段的成人ASD进行比较。结果：年龄≥60岁的ASD患者（60ASD）占成人ASD的7.9%（51/647例）。60ASD的房颤发生率（27.45%）明显高于18~60岁的ASD患者（59ASD）（3.52%）。60ASD与59ASD患者相比：心脏结构的重构改变更加明显,包括心房和心室增大更多,心腔内压力和肺血管阻力明显增高。但相关性分析显示,ASD患者年龄与肺动脉压力、左房内径、右房内径、左室舒张末内径、右室舒张末内径和肺阻力仅有较弱相关性（r分别为：0.263、0.500、0.215、0.174、0.153、0.335）。60ASD与59ASD患者的手术成功率和主要并发症发生率无差别。不论任何年龄段的患者,术后右心重构均明显改善,表现在右房右室过度充盈减轻,内径缩小;但是60ASD患者心脏重构的改善程度小于59ASD。结果：介入封堵治疗年龄≥60岁的ASD患者安全有效,术后患者心脏重构改善。
- 孙正旭杨荣孔祥清盛燕辉雍永宏张浩张海锋孙伟周艳丽钱玲梅
- 关键词：年龄房间隔缺损介入封堵
- 封堵器介入治疗室间隔缺损对术后传导阻滞发生的影响被引量：6
- 2012年
- 目的分析对称型和不对称型封堵器介入治疗膜周部室间隔缺损(PMVSD)术后传导阻滞的发生率及其影响因素。方法成功植入106例偏心型室间隔缺损封堵器(AVSDO)和122例对称型室间隔缺损封堵器(SVSDO)的PMVSD患者,于术前、术后1周、1、3、6个月及每年分别行常规ECG和Holter检查。结果术后新发生传导阻滞33例,AVSDO组与SVSDO组发生率无统计学差异(14.2%vs.14.8%)(P>0.05)。33例中以右束支传导阻滞(RBBB)最常见(19例),其次为左束支传导阻滞(LBBB)(8例)和房室传导阻滞(AVB)(6例);1例Ⅱ度Ⅱ型AVB和3例Ⅲ度AVB均经临时起搏、激素治疗后恢复为正常窦性心律;出院前21例传导阻滞消失。发生传导阻滞者较未发生者的PMVSD距主动脉瓣距离(DDRAV)长,PMVSD距三尖瓣隔瓣的距离(DDSTV)短,封堵器直径与PMVSD直径的差值(DDOV)大(P<0.05)。新发生传导阻滞出现时间越早越难恢复。结论应用AVSDO和SVSDO介入治疗PMVSD术后传导阻滞发生率相似,且多数能恢复正常。DDSTV、DDRAV和DDOV可作为术后新发传导阻滞较好的预测指标。
- 张浩杨荣盛燕辉孔祥清雍永宏孙伟周蕾许迪钱岭梅曹克将宋和鉴
- 关键词：介入封堵室间隔缺损
- 糖尿病致畸作用与氧化应激关系的研究进展被引量：1
- 2012年
- 氧化应激是糖尿病致畸作用的发病机制之一。妊娠合并糖尿病能引起胚胎氧化应激,进一步增高胚胎畸形发生率。氧化应激通过抑制糖尿病孕妇胚胎重要发育控制基因表达、引起胚胎细胞凋亡增加、导致胚胎卵黄囊异常、引起胚胎心脏流出道缺陷,产生致畸作用。
- 沈震杨荣张浩
- 关键词：妊娠合并糖尿病氧化应激致畸作用畸形发生率糖尿病孕妇发病机制
- 房间隔缺损并发的心房颤动的治疗探讨被引量：3
- 2015年
- 目的 :探讨房间隔缺损(atrial septal defect,ASD)并发的心房颤动(atrial fibrillation,AF)的临床特点和治疗AF的不同方法的效果。方法:分析641例行ASD封堵术患者的AF发生率和危险因素,比较药物或者导管消融治疗AF的疗效。结果:641例ASD患者的AF发生率为4.8%,其中年龄≥40岁的AF发生率为8.4%,年龄≥60岁的患者的AF发生率高达25%。与无AF的患者相比,AF者中男性多见、年龄大、右心房平均压力高、肺动脉平均压力高、左心房内径大、左室舒张末内径大以及左室射血分数低,进一步分析发现,男性、年龄≥40岁和左房内径增大是ASD并发AF的高危因素。AF转复及维持窦性心律治疗,导管射频消融优于药物治疗。结论:ASD患者中AF的发生率高于正常人群,男性、年龄≥40岁和左房内径增大是ASD并发AF的高危因素,导管射频消融在AF转复及维持窦性心律治疗上优于药物。
- 潘子磊杨荣孔祥清盛燕辉张浩孙伟张海峰雍永宏杨悉微陈明龙杨兵张凤祥居维竹
- 关键词：房间隔缺损心房颤动
- Nodal信号通路相关基因NOMO1在斑马鱼早期胚胎发育过程中的表达
- 2013年
- 目的:研究斑马鱼NOMO1基因在早期胚胎发育过程中的时空表达情况。方法:首先克隆斑马鱼NOMO1同源基因全长cDNA,然后运用半定量RT-PCR技术初步检测NOMO1基因在斑马鱼早期胚胎的表达情况,最后通过原位杂交技术检测NOMO1基因在斑马鱼早期胚胎发育过程中的时空表达情况。结果:通过半定量RT-PCR及原位杂交技术显示NOMO1从受精卵时期开始即有表达,在24 hpf(受精后24 h)之前,NOMO1基因表达广泛,并主要集中在中、内胚层。从24 hpf开始其表达主要集中于神经系统如前脑、中脑、小脑、脊索前板、眼和耳囊等处。在心脏处也有少量表达。结论:NOMO1基因对斑马鱼早期胚胎发育具有一定的作用,推测NOMO1基因影响早期心脏发育。
- 曹娜张浩盛燕辉杨荣孔祥清
- 关键词：斑马鱼基因克隆
