国家高技术研究发展计划(2011AA020107)
- 作品数：5 被引量：12H指数：3
- 相关作者：张文健刘虹麟娄晋宁宁光成兰云更多>>
- 相关机构：中日友好医院上海交通大学医学院附属瑞金医院中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人胚胎主动脉血管内皮祖细胞的分离、培养及鉴定被引量：3
- 2012年
- 目的研究人胚胎血管内皮祖细胞(EPCs)分离、扩增及鉴定的方法,并评价其分化成血管内皮细胞的能力,为人胚胎血管来源EPCs作为干细胞技术治疗疾病的细胞材料提供依据。方法从14周龄流产人胚胎主动脉中应用胶原酶消化法分离获得EPCs,用含有碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子和白血病抑制因子的低血清培养基体外扩增培养EPCs。分离培养的EPCs鉴定采用细胞免疫荧光染色、RT-PCR及流式细胞术,检测EPCs细胞的特异标志CD133、CD34和血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)。培养的EPCs应用VEGF进行诱导分化,并评价其分化成为血管内皮细胞的能力。结果分离的人胚胎主动脉EPCs细胞表达EPCs的标志分子CD133、CD34和VEGFR2。EPCs在体外特定低血清培养条件下表现很强的增殖能力。培养的EPCs细胞经过VEGF诱导后,细胞表达CD133明显降低,表达vWF、CD31和ELAM-1增强,并且体外成管能力和摄取Ac-LDL能力增强,表明细胞分化成为血管内皮细胞。结论人胚胎早期主动脉的EPCs具有很好的体外自我更新能力和分化成为血管内皮细胞的潜能,可作为EPCs治疗疾病的细胞材料。
- 庄乾淑张文健叶丽亚刘虹麟曹妍婷成兰云丁浩娄晋宁刘鹏李建中
- 关键词：血管内皮生长因子受体2主动脉细胞分离
- 糖尿病足溃疡治疗1年内不同阶段病情变化的随访分析被引量：4
- 2013年
- 目的:随访糖尿病足溃疡(DFU)患者治疗1年中的病情变化,观察DFU治疗的疗效、心脑血管事件发生情况和影响因素。方法:详细记录158例DFU患者住院期间的一般病史资料及实验室检查指标,随访观察患者3、6及12个月溃疡愈合、复发,心脑血管事件发生及死亡等预后情况。结果:DFU愈合率在随访3、6和12个月分别为75.3%、84.8%和89.2%;随访至12个月时,溃疡复发33例(23.4%),发生心脑血管事件34例(21.5%),死亡12例(7.6%),其中死于心脑血管事件8例(66.7%)。年龄、严重的足溃疡为DFU患者心脑血管事件发生的危险因素(P<0.05)。结论:绝大部分DFU能够愈合,DFU患者足溃疡复发率、心脑血管事件发生率和病死率高,提示后续治疗仍需要严密观察。
- 钱泓洁许蕾张杉杉方萍顾雪明周云飞刘宏顾俊义汤正义宁光
- 关键词：糖尿病足溃疡心脑血管事件病死率
- 大鼠胰岛素瘤实验模型的建立及其应用
- 2013年
- 目的通过移植大鼠胰岛素瘤INS-1细胞至糖尿病小鼠肾包膜下使之形成胰岛素瘤,并诱导其发生凋亡,建立可用于研究胰岛β细胞凋亡机制的动物模型。方法将5×106INS-1细胞接种于链脲霉素(STZ)造模的糖尿病小鼠左肾包膜下,监测动物空腹血糖和血清胰岛素水平的变化,当血糖趋近正常后摘取动物左侧肾脏并检测其血糖和血清胰岛素水平的变化;固定包埋摘取的肾脏,进行HE染色以及胰岛素的免疫组化染色,确定胰岛素瘤模型的建立。在胰岛素瘤动物模型中,腹腔给予毒胡萝卜素(TG)或软脂酸钠(PA),监测给药后动物空腹血糖的变化,当血糖浓度出现逆转时,摘取动物左侧肾脏,通过TUNEL原位染色法检测移植瘤细胞的凋亡。结果将INS-1细胞移植到糖尿病小鼠肾包膜下后,从第9天开始,动物空腹血糖进行性降低,血清胰岛素水平逐渐升高,当动物血糖接近至正常时,摘取动物左肾导致动物血糖显著升高,在摘取的左肾可见明显的移植瘤,免疫组织化学染色显示移植瘤细胞为胰岛素阳性。在胰岛素瘤动物模型给予TG或PA刺激后,动物空腹血糖出现逆转,显著升高,血清中胰岛素含量明显降低,摘取动物左侧肾脏后,TUNEL原位染色发现移植瘤内有明显的细胞凋亡。结论大鼠胰岛素瘤INS-1细胞肾包膜下移植可以建立胰岛素瘤动物模型,应用此动物模型可以在体内研究胰岛β细胞凋亡的机制。
- 彭亮刘虹麟成兰云房青许世清门秀丽娄晋宁张文健
- 关键词：胰岛素瘤胰岛素分泌细胞
- 动力相关蛋白-1参与糖皮质激素诱导的胰岛β细胞凋亡
- 2013年
- 目的探讨动力相关蛋白-1（DRP-1）对糖皮质激素诱导的胰岛13细胞凋亡的影响。方法采用地塞米松（Dex）处理大鼠胰岛13细胞系INS-1细胞，通过亚G1（Sub-G1）法检测细胞凋亡，Westernblotting检测DRP-1的表达。利用四环素诱导表达系统在INS-1细胞构建可诱导表达野生型DRP-1（DRP-1wt）基因和突变型DRP-1（DRP-1 k38A）基因的稳转细胞系，并用细胞免疫荧光和Westernblotting验证强力霉素（Dox）对转染基因的可诱导性。采用TUNEL法分析在Dex处理情况下，DRP-1wt基因或DRP．1k38A基因表达对Dex诱导的胰岛B细胞凋亡的影响，并同时测定相应细胞凋亡蛋白酶Caspase-3活性及细胞内活性氧（ROS）的变化情况。多组间均数比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用t检验。结果不同浓度Dex处理组细胞凋亡率[（15．7±4．2）％、（30．4±3．3）％、（61．6±5．4）％]明显高于未处理组[（3．3±1．3）％，t=6．44、14．07、30．26，均P〈0．05]；200nmol／LDex处理24、48及96h后细胞凋亡率[（10．6±1．2）％、（15．1±4．6）％、（42．6±9．8）％]明显高于处理0h组[（2．4±1．3）％，t=2．99、4．63、14．66，均P〈0．05]。Westernblotting显示Dex可诱导胰岛β细胞DRP-1基因的表达。DRP-1wt基因表达能够显著促进Dex诱导的β细胞凋亡[（53．8±7．2）％比（16．2±3．2）％，t=10．02，P〈0．05]，而DRP-1k38A基因表达反而抑制Dex诱导的B细胞凋亡[（6．2±1．1）％比（14．5±1．8）％，t=10．63，P〈0．05]。DRP-1wt基因表达能够促进Dex诱导的caspase-3活化[（1979±132）比（921±182），t=11．13，P〈0．05]及ROS产生[（772±62）比（290±56），t=13．66，P〈0．05]，而DRP-1k38A基因表达反而抑制了Dex诱导的caspase-3活化[（506±47）比（681±44），t=5．25，P〈0．05]及ROS产生[（235±14）比（309±44），t=3．86，P〈0．05]。结论DRP-1参与了糖皮质激素诱导
- 彭亮房青刘虹麟许世清门秀丽娄晋宁张文健
- 关键词：胰岛Β细胞凋亡糖皮质激素
- 肱踝脉搏波速度和体重指数对糖尿病合并高血压发生风险的独立和联合作用被引量：5
- 2018年
- 目的探讨体重指数（BMI）和肱踝脉搏波速度（brachial—ankle pulse wave velocity，baPWV）预测糖尿病合并高血压发生风险的联合效应。方法用累积发生风险Kaplan—Meier曲线和Cox回归模型预测分析baPWV和BMI水平对糖尿病合并高血压发生风险的联合效应。结果本项研究总共纳入2222名受试者，以baPWV低四分位数（Q1-Q3）为参照组，baPWV位于最高四分位数（04）对新发糖尿病合并高血压的风险比（HR）值在未校正模型、模型Ⅰ和模型Ⅱ分别为4．16（95％CI 2．14，8．09）、2．52（95％CI1．10，5．78）和2．45（95％CI1．05，5．70）。基线baPWV（Q4）和BMI（≥25kg／m2）水平共同预测糖尿病合并高血压发生风险，在未校正模型、模型Ⅰ和模型Ⅱ中的HR值分别为11．50（95％C14．5，29．9）、4．20（95％CI1．4，13．1）和4．30（95％CI1．4，13．3），均有统计学意义（P〈0．05）。结论baPWV与BMI水平共同预测糖尿病合并高血压发生风险的效应优于独立效应，BMI≥25kg／m^2且baPWV在较高水平的人群发生糖尿病合并高血压的风险显著增加。
- 王杰裴育陈康闫文华王安平李一君谷伟君王海滨安平金昕晔宁光母义明
- 关键词：糖尿病合并高血压肱踝脉搏波速度体重指数
