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浙江省科技计划项目(2005C23001)

作品数：2 被引量：2H指数：1
相关作者：王建伟王许安李江涛刘颖斌王勇更多>>
相关机构：浙江大学医学院附属第二医院上海交通大学医学院附属新华医院浙江中医药大学更多>>
发文基金：浙江省医药卫生科学研究基金浙江省科技计划项目更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 2篇医药卫生

主题

  • 2篇肿瘤
  • 2篇免疫
  • 1篇原发性
  • 1篇原发性肝癌
  • 1篇原核表达
  • 1篇原核表达载体
  • 1篇肿瘤学
  • 1篇肿瘤疫苗
  • 1篇细胞
  • 1篇疗法
  • 1篇免疫疗法
  • 1篇免疫治疗
  • 1篇免疫治疗作用
  • 1篇基因
  • 1篇基因表达
  • 1篇肝癌
  • 1篇肝细胞
  • 1篇B7-1基因

机构

  • 2篇上海交通大学...
  • 2篇浙江大学医学...
  • 1篇浙江中医药大...

作者

  • 2篇刘颖斌
  • 2篇李江涛
  • 2篇王许安
  • 2篇王建伟
  • 1篇彭淑牖
  • 1篇马孝明
  • 1篇李松岗
  • 1篇孔颖
  • 1篇曹岩菁
  • 1篇王勇

传媒

  • 1篇中华实验外科...
  • 1篇中华普通外科...

年份

  • 2篇2009
共 2 条 记 录，以下是 1-2
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排序方式：
人B7-1基因与GPI信号肽序列融和基因的原核表达载体的构建及表达被引量：1
2009年
目的构建GP1锚定蛋白基因与B7—1分子融合的原核高效表达载体（GPI—B7—1），观察融合蛋白的抗肿瘤效应。方法分别从新鲜胎盘和ConA刺激的外周血单核细胞中克隆人胎盘碱性磷酸酶（hPLAP-1）C末端信号肽序列（GPI）和CD80（B7—1）基因。利用PCR技术将GPI和B7—1胞外编码区基因进行融合，并将融合基因亚克隆入原核表达载体（pET-30a）中。重组载体pET-30a—GPI—B7—1转化表达菌株E．coli BL，纯化GPI—B7—1融合蛋白，SDS—PAGE、Western blot分析鉴定其免疫活性。结果PCR和RT—PCR产物经电泳鉴定，在100～250bp处可见到133bp的GPI目的条带。在750bp左右可见到792bp的B7-1胞外编码区基因目的条带。重组载体pET-30a—GPI-B7—1经PCR检测获得900bp左右的目的片段，经EcoRI、Sall双酶切鉴定，得到5000bp和900bp左右大小2个片段，实现了融合蛋白（GPI—B7—1）在大肠杆菌中的高效表达，在非变性条件下纯化该融合蛋白，SDS—PAGE分析显示，表达蛋白的分子量约为38kDa，Western blotting证实38kDa处出现一条特异的显色带，该融合蛋白即为目的蛋白。结论GPI—B7—1表达载体可在大肠杆菌中高效表达获取融合蛋白，为肿瘤免疫治疗奠定了基础。
王建伟刘颖斌曹岩菁王许安李江涛孔颖马孝明彭淑牖
关键词：基因表达免疫疗法肿瘤学
GPI锚定B7蛋白对原发性肝癌的免疫治疗作用被引量：1
2009年
目的GPI—B7—1蛋白转移修饰肝癌细胞膜，观察其对肿瘤细胞的免疫诱导效应。方法GPI—B7—1和B7—1蛋白修饰肝癌细胞膜，流式法测定其CD80（B7—1）的表达，分离患者外周血T细胞，检测不同蛋白修饰的肝癌细胞膜对T淋巴细胞的致增殖效应及granzyme B、perforin、IFN-γ mRNA表达的影响。结果GPI—B7-1蛋白修饰肝癌细胞膜表面B7—1表达率为85％。GPI—B7—1蛋白修饰的肝癌细胞膜致T淋巴细胞的增殖程度显著强于对照组和B7—1蛋白修饰组（P〈0．01）；该作用源于其可上调肝癌外周血T淋巴细胞granzyme B、perforin及IFN-γ mRNA表达水平。结论GPI—B7—1蛋白转移修饰的肝癌细胞膜可上调granzyme B、perforin及IFN-γ mRNA表达，激活T细胞增殖，促进杀伤性T细胞的效应。
李松岗刘颖斌李江涛王勇王建伟王许安
关键词：肝细胞肿瘤疫苗
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