江苏省研究生培养创新工程项目(CX07S042z)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：卜平徐海荣李湘鸣更多>>
- 相关机构：扬州大学更多>>
- 发文基金：江苏省研究生培养创新工程项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 真核表达载体p4ARE-TK-GFP/Neo的构建及其表达被引量：1
- 2009年
- 目的:构建真核表达载体p4ARE-TK-GFP/Neo,并在HepG2细胞中进行表达。方法:PCR法扩增TK启动子克隆到pEGFP-N1上,构建表达载体pTK-GFP/Neo。人工合成4个ARE序列,经退火和磷酸化后插入pTK-GFP/Neo载体的TK启动子上游,构建由TK启动子启动以及上游有4个ARE调控的真核表达载体p4ARE-TK-GFP/Neo,将其转染入HepG2细胞株并筛选,进行稳定表达。结果:成功构建了真核表达载体p4ARE-TK-GFP/Neo,并建立HepG2细胞稳定表达株。结论:成功地构建了由TK启动子启动以及上游有4个抗氧化反应元件(ARE)重复序列调控的真核表达载体p4ARE-TK-GFP/Neo,并在HepG2细胞中稳定表达,为下一步研究ARE的调控作用奠定了基础。
- 徐海荣卜平李湘鸣
- 关键词：真核表达载体HEPG2细胞
- 基于抗氧化反应元件的转基因细胞模型的建立被引量：1
- 2010年
- 建立基于抗氧化反应元件(ARE)调控的GFP报告基因细胞模型。首先用PCR法扩增TK基本启动子克隆到pEGFP-N1上,构建pTK-GFP/Neo报告载体,再将人工合成的4个ARE重复序列依次插入到pTK-GFP/Neo载体的TK启动子上游,构建成ARE调控的真核报告载体p4ARE-TK-GFP/Neo,将该载体用脂质体转染法转染人HepG2肝癌细胞,经G418筛选,获得阳性克隆。扩增后经Ⅱ相代谢酶诱导物PDTC和tBHQ实验验证。结果表明:细胞发光度与诱导物有明显剂量效应关系,成功建立了基于抗氧化反应元件的转基因细胞模型。
- 徐海荣卜平李湘鸣
- 关键词：绿色荧光蛋白细胞模型
