青岛市科技发展计划项目(05-2-NS-31)
- 作品数：3 被引量：11H指数：2
- 相关作者：王志亮陈义平范忠军柴虹徐天刚更多>>
- 相关机构：中国动物卫生与流行病学中心更多>>
- 发文基金：青岛市科技发展计划项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学更多>>
- 伪狂犬病病毒gE囊膜糖蛋白主要抗原表位区基因的原核表达被引量：1
- 2007年
- 参照GenBank上公布的伪狂犬病病毒gE基因序列设计1对引物,通过PCR方法扩增一段包含gE主要抗原表位编码区的564 bp的片段,扩增产物克隆于pMD18-T vector中,酶切后插入原核表达载体pET-32a的T7启动子下游,构建的原核表达质粒pET-gE在大肠杆菌BL21中获得了高效表达。SDS-PAGE结果显示:表达产物分子质量为38 ku,以包涵体的形式存在,表达产物用His亲和层析柱进行纯化。Western blotting分析表明:该蛋白能与标准阳性血清发生特异性反应。结果证明该表达产物具有生物学活性,可作为鉴别诊断的抗原。
- 柴虹范忠军陈义平王志亮
- 关键词：伪狂犬病病毒主要抗原表位
- 猪伪狂犬病血清抗体gE-ELISA检测方法的建立被引量：7
- 2007年
- 以纯化的猪伪狂犬病病毒gE蛋白为抗原建立了检测猪伪狂犬病血清抗体的间接gE-ELISA方法。最佳反应条件为,抗原包被浓度为1.7μg/mL,待检测血清1∶40稀释。与伪狂犬病阳性血清反应为阳性,与猪瘟、猪细小病毒病、猪繁殖与呼吸综合征(猪蓝耳病)、猪乙型脑炎、猪布氏杆菌病5种疾病阳性血清和猪伪狂犬病gE缺失疫苗接种的猪免疫血清及SPF猪阴性血清均无交叉反应。批间、批内试验变异系数分别不超过5%和9%。用该方法与Ingezim ELISA试剂盒和HerdChek ELISA试剂盒同时对172份血清进行了平行检测,总符合率分别达93.6%和83.7%。试验结果表明:猪伪狂犬病血清抗体间接gE-ELISA检测方法具有较高的敏感性和特异性,且重复性好,可用于猪伪狂犬病野毒感染猪的血清抗体检测。
- 柴虹范忠军陈义平王志亮徐天刚
- 关键词：猪伪狂犬病抗体试剂盒
- 三种检测禽流感抗体方法的比较被引量：3
- 2006年
- 应用胶体金免疫层析法(GICA)、血凝抑制试验(HI)和琼脂扩散试验(AGID)三种方法同时检测所采集的342份鸡血清样品,并对三者的检测结果进行比较。结果发现,HI试验的阳性检出率最高(78.65%),其次为GICA(69.88%)和AGID试验(59.36%);GICA与HI的符合率为89.47%,与AGID的符合率为84.21%,HI与AGID的符合率为80.70%。结果表明,GICA比AGID试验更为敏感,且与HI试验有较好的符合率,可用于禽流感的血清学监测。
- 冯娟陈义平王志亮刘春菊张喜悦
- 关键词：禽流感抗体胶体金免疫层析法血凝抑制试验琼脂扩散试验
