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中药肝复康干预肝星状细胞及肝组织的蛋白质组学分析被引量：1: 2009年; 目的:本实验通过中药对肝星状细胞和肝组织蛋白质组的干预实验,从蛋白质组学角度进一步揭示肝纤维化的发病机制和中药的药理作用,为新药研制提供理论依据。方法:制备正常大鼠肝星状细胞、加入血小板衍生生长因子的肝星状细胞及加入肝复康药物血清和血小板衍生生长因子的肝星状细胞,分别设定为正常对照组、模型组及治疗组;同时分别将注射二甲基亚硝胺、肝复康的大鼠设定为模型组及治疗组,并将各组大鼠肝脏取出。分别提取以上各组的总蛋白质并进行等电聚焦电泳,随后进行SDS-PAGE电泳。凝胶染色后比对蛋白质斑点,找出上调和下调的蛋白质。结果:随着治疗时间的不断延长,HSC的蛋白质表达在不同时间有了不同变化。大鼠造模4周后,模型组与治疗组肝组织总蛋白质图谱存在着一定差异,部分蛋白质在两组中表现出不同的丰度。结论:肝纤维化的发生与多种蛋白质的作用有关。中药肝复康治疗肝纤维化是通过调节多个蛋白质表达产生的。; 李骢湛垚垚姜妙娜崔小栋张彩华徐婷婷赵赫男孙杰贾玉杰; 关键词：中药血小板衍生生长因子蛋白质组学

肝复康对肝纤维化大鼠肝组织TIMP-1表达的影响被引量：1: 2009年; 目的通过观察中药肝复康对肝纤维化大鼠肝组织金属蛋白酶组织抑制因子-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)表达的影响,探讨肝复康抗肝纤维化的可能机制。方法采用10%四氯化碳皮下注射制备肝纤维化模型,于造模第9周给予肝复康治疗12周。通过测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性及白蛋白和总蛋白的含量来反映肝脏功能,HE染色法观察肝组织病理学变化,免疫组化方法观察肝组织TIMP-1的表达。结果经肝复康治疗后,中剂量治疗组与模型组相比较,肝脏的组织学和血清学指标均明显改善,肝组织TIMP-1蛋白的表达显著减少(P<0.01)。结论肝复康对肝纤维化有疗效,其作用机制可能与降低肝组织TIMP-1蛋白的表达有关。; 李晋白玉姜妙娜贾玉杰; 关键词：肝纤维化肝复康 TIMP-1

肝复康对肝纤维化大鼠肝组织JAK2和STAT3表达的影响被引量：4: 2010年; 目的观察中药肝复康对肝纤维化大鼠肝组织Janus激酶2(JAK2)及信号转导子和转录激活子3(STAT3)表达的影响,并对其在JAK2/STAT3信号通路上治疗肝纤维化的作用机制进行初步探讨。方法采用10%四氯化碳皮下注射制备肝纤维化模型,于造模第9周给予肝复康治疗12周。通过测定血清中ALT、AST活性及白蛋白和总蛋白的含量来反映肝脏功能,HE染色法观察肝组织病理学变化,RT-PCR观察JAK2和STAT3 mR-NA的表达。结果经肝复康治疗后,中剂量治疗组与模型组相比较,肝脏的组织学和血清学指标均明显改善,肝组织JAK2、STAT3 mRNA的表达显著减少(P<0.01)。结论 (1)JAK2/STAT3信号通路在肝纤维化的形成过程中起重要作用;(2)肝复康对肝纤维化有疗效,其作用机制可能与降低肝组织JAK2和STAT3的表达,阻断JAK2/STAT3信号通路有关。; 李晋姜妙娜贾玉杰; 关键词：肝复康反式激活因子类蛋白酪氨酸激酶类 JAK2/STAT3

中药肝复康对血小板衍化生长因子介导的肝星状细胞信号转导的影响及意义被引量：6: 2006年; 中药肝复康是本研究室多年来通过反复实验总结出的抗纤维化经验方，既往的动物实验已多次成功证实其对肝组织纤维化具有预防及治疗作用，临床实践也充分表明了该方具有明显的阻断病毒性乙型肝炎慢性化、减轻肝纤维化及保护肝功能的作用。本研究从分子水平观察该方抗纤维化的药理作用。从而进一步揭示中药肝复康对肝星状细胞（HSC）在肝纤维化中的分子调节机制。; 李骢罗建湛垚垚崔小栋姜妙娜贾玉杰; 关键词：肝复康生长因子介导血小板衍化中药病毒性乙型肝炎肝组织纤维化

肝复康在肝纤维化进程中对肝星状细胞的分子调节机制: 目的通过观察肝复康含药血清在肝纤维化不同阶段对肝星状细胞株(HSC-T6)Ⅰ和Ⅲ型胶原、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、基质金属蛋白酶抑制物(TIMP-1)基因表达的影响,探讨其抗纤维化的作用及分子机制。方法常规方法制...; 崔晓栋姜妙娜李骢贾玉杰; 关键词：肝复康肝星状细胞肝纤维化血小板衍生生长因子; 文献传递

肝复康对PDGF介导的肝星状细胞信号转导的分子机制被引量：3: 2008年; 目的:通过观察中药肝复康含药血清对肝星状细胞(HSC-T6)细胞株Ⅰ、Ⅲ型胶原、α-SMA基因表达的影响。探讨其抗纤维化的作用机制。方法:常规方法制备肝复康含药血清,并用不同浓度肝复康含药血清干预HSC-T6细胞株,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)观察分析Ⅰ、Ⅲ型胶原、α-SMA mRNA表达的变化。以Western blotting检测ERK蛋白在不同干预情况下的表达。结果:经肝复康含药血清处理,可下调HSC-T6细胞株Ⅰ、Ⅲ型胶原、α-SMA mRNA表达以及ERK蛋白表达水平,不同浓度含药血清作用强度也有所不同。结论:中药肝复康对肝纤维化具有明显的抑制作用,其作用机制可能是通过非特异性干扰PDGF功能,抑制Ⅰ、Ⅲ型胶原、α-SMA mRNA的转录,以达到抗纤维化的作用。; 李骢湛垚垚姜妙娜崔晓栋贾玉杰; 关键词：肝复康肝星状细胞血小板源性生长因子

JNK和MMP-2、TIMP-2在大鼠肝脏纤维化模型中的表达及中药肝复康对其的影响被引量：3: 2009年; 目的:研究JNK和MMP-2、TIMP-2在肝脏纤维化大鼠模型中的表达以及中药复方制剂肝复康对肝脏纤维化的治疗作用及其机制。方法:大鼠肝脏纤维化模型采用CCl4作用12周(0.5mg/kg,2次/周);治疗组大鼠在CCl4作用同时从第9周开始,给予肝复康(31.25,312.5 and 3125mg/kg/d,po);设立正常对照组;所有大鼠于20周末处死;HE染色光镜观察肾脏病理改变,并进行组织学评分;RT-PCR检测肝组织JNK和MMP-2、TIMP-2mRNA水平。对三者的mRNA水平进行相关性分析。结果:HE染色观察到显著肝脏纤维化改变,肝脏纤维化模型复制成功;模型组JNK和MMP-2、TIMP-2基因表达较正常对照组明显增加(P<0.01);三者的mRNA水平在各组间均呈显著正相关;GFK中剂量治疗组二者表达显著降低。结论:GFK可以通过抑制JNK和MMP-2、TIMP-2的mRNA表达,发挥抗纤维化的作用。; 娄晶磊陈泓姜妙娜周情贺欣雷鸿燕李晋贾玉杰; 关键词：肝脏纤维化 JNK MMP-2 TIMP-2 肝复康

肝复康不同浓度含药血清对肝星状细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原及细胞基质的影响被引量：2: 2008年; 背景：既往的动物实验已多次证实了肝复康对肝纤维化组织具有预防及治疗作用。目的：观察中药肝复康不同浓度含药血清对肝星状细胞T6细胞株Ⅰ、Ⅲ型胶原、a-平滑肌肌动蛋白和金属蛋白酶组织抑制因子1基因表达的影响，以及探讨其抗纤维化的作用及分子机制。设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2005-07／2006—07在大连医科大学病理生理学教研室完成。材料：清洁级SD大鼠25只，体质量300～350g，用于制备含药血清；鼠肝星状细胞T6细胞株由上海中医药大学肝病研究所徐列明教授惠赠；中药肝复康由柴胡、当归（补血合血）、黄芪（益气）、赤芍、白芍（活血化瘀）、丹参（活血化瘀）等组成。方法：按肝复康高、中、低剂量（8．32，4．16，2．08mL／只）灌胃制备药物血清。实验分为5组，空白对照组：加含体积分数0．1正常对照血清的DMEM；模型对照组：加含体积分数0．1正常对照血清＋60ug／L血小板衍生生长因子的DMEM；肝复康低、中、高剂量组：分别加含体积分数0．1低、中、高剂量药物血清＋60ug／L血小板衍生生长因子的DMEM；各组均培养24h。主要观察指标：反转录-聚合酶链反应检测不同浓度肝复康药物血清干预后Ⅰ、Ⅲ型胶原、a-平滑肌肌动蛋白和金属蛋白酶组织抑制因子1mRNA的表达。结果：空白对照组肝星状细胞T6细胞各指标表达呈相对低水平，而模型对照组表达明显升高（P〈0．01）；肝复康各剂量组则均具有能明显抑制这种升高的作用（P〈0．01），其中以中剂量组干预效果最为明显。结论：中药肝复康对肝纤维化具有明显的抑制作用，其作用机制可能是通过抑制Ⅰ、Ⅲ型胶原、a-平滑肌肌动蛋白及金属蛋白酶组织抑制因子1mRNA的转录，从而减少细胞外基质的形成，以达到抗纤维化的作用。; 张彩华崔晓栋姜妙娜李骢赵赫男贾玉杰; 关键词：肝复康肝星状细胞血小板衍生生长因子

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国家教育部博士点基金(20050161003)

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