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湖北省教育厅科学技术研究项目(Q20122401)
作品数:
1
被引量:2
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相关作者:
张鹏
钱航
蒋学俊
张翠珍
杨汉东
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2014
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含G0S2基因启动子的荧光素酶报告基因载体的构建
被引量:2
2014年
目的:克隆人G0S2基因启动子并构建荧光素酶报告基因载体,为进一步研究G0S2基因转录调控提供质粒。方法:利用PCR技术从人胚肾293A细胞基因组DNA中克隆获得G0S2基因启动子的DNA片段,将其克隆至pGL3-basic表达载体中,并转化人大肠杆菌DH5α,经限制性内切酶酶切、PCR及测序鉴定得到确认;将重组载体质粒与半乳糖苷酶表达质粒psV-β-Galactosidase共转染至大鼠血管平滑肌细胞(VSMC),检测细胞中荧光素酶的活性。结果:pGL3-G0S2-Promoter重组质粒插入片段和相邻序列正确,克隆的G0S2基因片段有启动子活性(P<0.05)。结论:成功构建了pGL3-G0S2-Promoter报告基因质粒,为进一步研究G0S2基因的表达奠定了基础。
张翠珍
蒋学俊
钱航
张鹏
杨汉东
关键词:
启动子
荧光素酶
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