国家自然科学基金(30871837)
- 作品数：15 被引量：79H指数：5
- 相关作者：王加启卜登攀张春林周凌云赵圣国更多>>
- 相关机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所扬州大学湖南农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金动物营养学国家重点实验室开放课题基金国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 正常生理及ISCOM疫苗免疫下小鼠乳腺Fc受体基因表达变化被引量：1
- 2010年
- 本研究对小鼠不同生理阶段以及免疫条件下,乳腺内FcRn基因mRNA表达量的变化进行了分析。选择100只健康昆明小白鼠分为4组,在其分娩后4d分别进行如下制剂处理:灭菌生理盐水、脂肪酶蛋白(Lipase)+灭菌生理盐水、空免疫刺激复合物(ISCOM)、Lipase-ISCOM。分娩后8d和12d用间接ELISA法测定乳中和血清中的特异性IgG效价,用RealTimePCR检测小鼠乳腺中FcRn基因的相对表达量,而正常生理状态乳腺内FcRn基因mRNA表达量的变化分别是在分娩后1d、4d、8d和12d进行检测。结果表明:正常状态下,乳腺B2M和FCGRT基因mRNA分别在0和1d表达最高,随后表达量下降并保持在一个稳定水平。免疫条件下,乳腺B2M和FCGRT基因mRNA显著上升。由此可知,免疫刺激可以引起小鼠乳FcRn基因表达上调。
- 张春林刘光磊王加启卜登攀赵圣国周凌云赵国琦
- 关键词：小鼠免疫刺激乳腺FCRN基因表达
- 免疫刺激复合物疫苗制备及其对小鼠免疫功能的影响被引量：5
- 2010年
- 确定了免疫刺激复合物(ISCOM)疫苗的安全有效剂量及其对小鼠免疫功能的影响。选取体重25 g左右的昆明小白鼠60只,分为12组,每组5只,腹腔分别注射不同剂量(5-200μg)的ISCOM疫苗,观察小鼠健康状态。选取体重28 g左右的昆明小白鼠60只,分为4组,分别在腹腔注射相同剂量的灭菌生理盐水,Lipase+生理盐水,空ISCOM,Lipase+ISCOM疫苗,利用间接ELISA检测血清中特异性抗体效价。结果表明,当注射剂量为5-25μg/只时,小鼠无任何异常症状。免疫后8 d,小鼠血清特异性抗体效价(log2)可以达到10.5,显著高于对照组。因此,ISCOM疫苗能有效引起小鼠的免疫反应。
- 章玉涛王加启赵圣国张春林卜登攀
- 关键词：小鼠免疫功能
- 奶牛FcRn受体α链基因启动子区的SSCP多态性研究被引量：2
- 2010年
- 以189头荷斯坦奶牛为研究对象,对FcRn受体α链基因(FCGRT)启动区采用PCR-SSCP方法进行多态性检测。结果表明,FCGRT基因启动区在P1、P2和P3引物扩增片段中存在PCR-SSCP多态性,位于引物P1扩增产物有AA、AB、BB3种基因型,其频率分别为25.40%、59.26%、15.34%;引物P2扩增产物有CC、CD、DD3种基因型,其频率分别为20.63%、56.61%、22.75%;引物P3扩增产物有EE、EF、FF3种基因型,其频率分别为1.59%、12.17%、86.24%。经克隆测序分析,在3个片段上分别发生了T→C、C→A、G→T的碱基序列突变。经χ2适合性检验,除SNP1外,荷斯坦奶牛在该基因位点上的SNP2和SNP3均处于Hardy-Weinberg平衡状态。
- 张春林王加启赵圣国赵国琦
- 关键词：荷斯坦奶牛PCR-SSCP
- 不同剂量胰岛素、胰高血糖素和甲状腺素处理对奶牛乳腺上皮细胞FcRn mRNA表达的影响被引量：3
- 2011年
- 【目的】采用real-time PCR方法检测体外激素处理对奶牛乳腺上皮细胞FcRn(neonatal Fc receptor,FcRn)mRNA表达的影响。【方法】在乳腺上皮细胞培养液中添加不同浓度胰高血糖素(0.01、0.1和1μmol.L-1)、胰岛素(0.005、0.1和0.5μmol.L-1)、甲状腺素T4(0.01、0.1和1μmol.L-1),体外培养并收集细胞,提取细胞mRNA后,利用real-time PCR检测FcRn mRNA的相对丰度。【结果】在一定添加剂量范围内,随着添加剂量的增加,甲状腺素和胰高血糖素能够显著地促进FcRn mRNA表达量升高(P<0.05),胰岛素在添加量为0.005μmol.L-1和0.5μmol.L-1时FcRn mRNA的表达量低,但在0.1μmol.L-1添加时表达量显著升高(P<0.05)。【结论】添加外源胰岛素、胰高血糖素和甲状腺素能够影响FcRn mRNA的表达,为进一步研究乳腺内FcRn受体变化以及影响因素提供了依据。
- 胡小丽张春林王加启赵圣国章玉涛卜登攀周凌云
- 关键词：荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞
- 幼龄小鼠小肠组织内参基因的选择被引量：3
- 2009年
- 选择B2 M、ACTB、GAPDH、SDHA、HPRT1和ARBP共6个内参基因,研究其在幼龄小鼠小肠组织内的表达情况.结果表明:6个内参基因均可获得特异性扩增产物;经geNorm程序和NormFinder分析,6个内参基因稳定度由高到低为SDHA=HRPT1>ARBP>ACTB>GAPDH>B2 M;基因表达的稳定值分别为0.006(SDHA)、0.006(HRPT1)、0.007(ARBP)、0.018(ACTB)、0.029(GAPDH)、0.111(B2 M),最终筛选出SDHA和HRPT1 2个内参基因适合用于校正目的基因的表达.
- 董晓丽王加启卜登攀刘光磊赵国琦张春林杨光李旦魏宏阳周凌云
- 关键词：实时定量PCR内参基因NORM
- 免疫刺激后小鼠肝脏内参基因稳定性研究被引量：7
- 2009年
- 实时定量PCR技术现已广泛应用于细胞或组织mRNA转录水平的检测和半定量。选择合适的内参基因可以消除不同标本在RNA的产量、质量以及逆转录效率上可能存在的差别,从而获得目标基因特异性表达的真正差异。本试验应用实时定量PCR技术,研究小鼠在经过免疫刺激后,B2M、ACTB、GAPDH、SDHA、HPRT1和ARBP共6个内参基因在肝脏中的表达情况。结果表明,这6个内参基因表达存在差异。经过geNorm程序统计学分析,确定了ACTB、GAPDH两个看家基因适用于校正目标基因的表达量,为研究小鼠免疫刺激后肝脏目标基因的表达奠定基础。
- 董晓丽王加启卜登攀刘光磊李旦张春刚程金波魏宏阳周凌云赵国琦
- 关键词：内参基因基因表达实时定量PCR免疫刺激
- Lipase-ISCOM免疫对小鼠乳中IgG的影响被引量：1
- 2010年
- 选择100只健康昆明小白鼠,研究小鼠不同生理阶段以及免疫条件下,乳中总IgG浓度和抗LipaseIgG类抗体效价变化。分娩后4 d分别注射灭菌生理盐水、脂肪酶(Lipase)+灭菌生理盐水、空免疫刺激复合物(ISCOM)、Lipase-ISCOM。分娩后8和12 d(即注射后4和8 d),用ELISA方法测定血清及乳中总IgG浓度和抗Lipase IgG类抗体。结果表明,Lipase-ISCOM免疫小鼠后,血清和乳中抗Lipase IgG类抗体效价(log2)分别达到4.03和3.38,显著高于对照组(P<0.05)。ISCOM为免疫乳生产候选疫苗的研究奠定了基础。
- 张春林王加启卜登攀刘光磊赵圣国周凌云赵国琦
- 关键词：小鼠免疫刺激IGG
- 基于2-DE结合质谱研究围产期奶牛血浆蛋白表达的变化被引量：7
- 2010年
- 本试验旨在揭示奶牛围产期免疫功能下降的机理。采用二维凝胶电泳方法建立了分娩前第21天、分娩后第1和21天血浆蛋白表达图谱,SYPRO ruby染色后,ImageMaster 2D platinum 6.0软件匹配检测差异表达蛋白点,液相色谱串联质谱鉴定。结果表明:与分娩前第21天和分娩后第21天相比,分娩后第1天血浆中转甲状腺素蛋白表达量下调、而结合珠蛋白和α1酸性糖蛋白表达量上调;与分娩前第21天和分娩后第1天相比,分娩后第21天载脂蛋白A1表达量增加,这些表达变化的蛋白涉及急性期应答反应及运输和代谢等生物学功能。结果提示奶牛分娩后急性期蛋白表达量的增加可能与免疫功能下降相关。
- 杨永新王加启卜登攀张乐颖李珊珊张春林周凌云
- 关键词：围产期二维凝胶电泳质谱
- 乳及乳制品中IgG含量检测方法的研究进展被引量：1
- 2010年
- 牛奶中免疫球蛋白具有良好的免疫保护功能,被越来越广泛的添加到乳制品中,而此类乳制品常常按IgG含量来定价,因此,寻求可靠的IgG检测方法越来越重要。作者就目前国际常用的检测方法进行阐述,包括层析分离法、电泳分离法、免疫学方法和物理方法,并比较了各种方法的优缺点。
- 赵圣国王加启章玉涛胡小丽卜登攀周凌云
- 关键词：IGG乳制品
- 小鼠免疫刺激后乳腺pIgR mRNA转录及乳特异性IgA含量的变化被引量：3
- 2010年
- 为了探讨免疫刺激后昆明小白鼠乳腺pIgR基因mRNA转录和特异性IgA含量变化。选择48只健康受孕昆明小白鼠,分为A、B、C、D组,分别于分娩后第4天注射灭菌生理盐水、Lipase+灭菌生理盐水、空ISCOM和Lipase+LTB+ISCOM,每组注射12只,并于分娩后第8天和12天采集小鼠乳样、血样和乳腺组织,用间接ELISA法测定乳和血浆中的特异性IgA含量,用Real Time-PCR检测小鼠乳腺中pIgR基因的相对转录水平。结果表明,免疫刺激对小鼠血浆中特异性IgA的含量无显著性影响(P>0.05),但是免疫B组和D组中小鼠分娩后12 d的乳中特异性IgA含量显著高于8 d乳中的特异性IgA含量(P<0.05)。RealTime-PCR相对定量也表明,免疫B组和D组中小鼠分娩后12 d的乳腺pIgR基因转录水平显著高于8 d乳腺pIgR基因转录水平(P<0.05)。免疫刺激后小鼠乳腺pIgR基因转录水平的提高能增加乳中特异性IgA的含量。
- 赵圣国王加启张春刚卜登攀刘光磊张春林章玉涛周凌云
- 关键词：MRNAIGA乳腺
