国家自然科学基金(20872180)
- 作品数：8 被引量：33H指数：5
- 相关作者：丁媛媛王四旺杨凡赵钢涛许景峰更多>>
- 相关机构：北京军区总医院第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省中医药管理局科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 桂皮醛及其代谢产物肉桂酸体外抗柯萨奇病毒B_3的作用机制研究被引量：7
- 2010年
- 目的探讨桂皮醛(cinnamaldehyde,CA)及其代谢产物肉桂酸(cinnamic acid,CD)体外抗柯萨奇病毒B3(CVB3)的作用机制。方法用CVB3感染SD乳鼠心肌细胞,建立病毒性心肌炎(VMC)细胞模型。1)MTT法测定CA和CD对正常心肌细胞的IC50;2)MTT法测定不同剂量CA、CD对CVB3感染心肌细胞72h存活率;3)分别于接种CVB3的同时(0h)、接种前1h(-1h)和接种后1h(1h)给予100μmol/LCA、CD各100μl,观察CPE,MTT测定72h细胞存活率,并进行病毒中和抗体、免疫荧光和电镜观察。结果 1)CA对正常心肌细胞的LogIC50为-4.125,0.1～1000μmoL/L剂量的CD组心肌细胞存活率显著高于CA组(P<0.01);2)10～1000μmol/LCD组细胞存活率高于CA各组和CVB3组,心肌细胞病毒滴度差异有统计学意义(P<0.01)。100～1000μmol/LCA组病毒滴度低于CVB3组(P<0.01),细胞存活率与CVB3组比较差异无统计学意义(P>0.05);3)接种CVB3-1h、0h和1h,分别给予100μmol/LCD100μl,其病毒滴度均显著低于CVB3组(P<0.01),细胞存活率高于CA组和CVB3组(P<0.01),不同时间接种CVB3组与CD组比较差异无统计学意义(P>0.05),电镜和免疫荧光试验显示,CD对CVB3有直接灭活和抑制细胞内复制作用。接种CVB30和1h给予CA,其病毒滴度低于CVB3组(P<0.01),但细胞存活率与CVB3组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 CA在体外可直接灭活CVB3,但对心肌细胞具有明显毒性,可能与其醛基结构相关。CD可直接杀灭CVB3,抑制CVB3在细胞内的复制,但对CVB3感染无预防作用。
- 丁媛媛赵钢涛杨凡王四旺
- 关键词：桂皮醛肉桂酸病毒性心肌炎柯萨奇病毒B3
- 桂皮醛对小鼠柯萨奇病毒诱发病毒性心肌炎的作用(英文)被引量：7
- 2010年
- 已知Toll样受体4(Toll-like receptors 4,TLR4)及其下游信号组分在柯萨奇病毒(CoxsackievirusB,CVB)诱发的病毒性心肌炎中扮演重要的角色,其在治疗中的作用仍不明确。桂皮醛具有抗病毒以及成剂量依赖性抑制由TLR4诱导的核因子活性的作用,而其对病毒性心肌炎的作用机制尚不明确。我们的实验结果显示:在体外,桂皮醛对正常心肌细胞的IC50为15μM;100-1000μM桂皮醛能显著抑制心肌细胞中的病毒滴度(P<0.01),而细胞存活率与CVB组无统计学差异(P>0.01)。而在病毒性心肌炎小鼠体内,与模型组比较,20和40mg/kg桂皮醛i.p.使第7 d血清中NO的含量以及心肌中诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS),肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF-α),核因子κB P65(nuclear factor-κB P65,NF-κB P65)和TLR4蛋白质表达显著降低(P<0.05)。降低第21 d心脏体重比(Heat Weight/Body Weight,Hw/Bw)比值,提高小鼠生存率,减轻病理损伤的作用。这些结果显示桂皮醛虽在体外无抗病毒活性,但其在体内具有降低病毒滴度和抑制TLR-4-NF-κB信号传导的作用,对病毒性心肌炎小鼠具有治疗作用。桂皮醛可能通过对TLR-4-NF-κB信号传导抑制作用,作为一种新的方法治疗病毒性心肌炎。
- 丁媛媛赵钢涛杨凡王四旺
- 关键词：桂皮醛柯萨奇病毒B3病毒性心肌炎TOLL样受体4
- 肉桂油对病毒性心肌炎小鼠心肌中TLR4-NF-κB信号转导的影响被引量：13
- 2010年
- 目的探讨肉桂油(OC)治疗病毒性心肌炎(VMC)的作用机制。方法经腹腔注射0.1mL柯萨奇病毒B组3型(CVB3)建立小鼠VMC模型。于接种病毒72h后,OC(30mg·kg-1肉桂油)、肉桂醛(CA)治疗组(30mg·kg-1桂皮醛)、模型组与正常对照组(等体积生理盐水),连续给药至第21天。在病毒感染后第10天(n=9)和第21天、各组随机取小鼠称体重,摘眼球取血后处死,取心脏,计算心脏质量/体重比;心脏一分为二,一半用作CVB3mRNA的RT-PCR检测和WESTERNBLOT技术检测以及诱导型一氧化氮合酶(iNOS),肿瘤坏死因子(TNF)-α,NF-κBP65和TLR4蛋白质的表达水平;另一半作石蜡切片,HE染色和iNOS免疫组化染色;试剂盒检测第10天血清中NO水平;整个实验期间观察纪录小鼠累积死亡数及存活时间。结果与模型组相比,OC和CA治疗组小鼠的死亡率均显著降低(P<0.01),中位生存时间延长,第10天心肌中CVB3mRNA含量下降(P<0.05)和血清NO含量下降(P<0.01)。心肌中iNOS,TNF-α,NF-κBP65和TLR4蛋白质表达显著降低(P<0.05);第10天和第21天病理评分显著降低(P<0.05),组间比较无统计学差异(P>0.05)。结论证实OC治疗VMC的作用机制可能与其有效成份CA抑制体内TLR4-NF-κB信号转导有关。
- 丁媛媛赵钢涛杨凡王四旺
- 关键词：肉桂油桂皮醛病毒性心肌炎诱导型一氧化氮合酶核因子
- Toll-NF-κB信号转导通路与病毒性心肌炎研究现状
- 2009年
- Toll样受体是天然免疫系统识别病原微生物的主要受体,在天然免疫反应中具有重要的作用。研究发现Toll-NF-κB信号转导通路能够引起一系列细胞因子合成增加,而这些细胞因子在病毒性心肌炎(viral myocard itis;VMC)的发病过程中发挥重要作用。探讨VMC时Toll-NF-κB信号转导通路的作用,对于揭示VMC的发病机制和筛选有效治疗药物具有重要意义。
- 刘欣欣王四旺
- 关键词：信号转导通路病毒性心肌炎细胞因子
- 纳洛酮治疗小鼠柯萨奇病毒诱发病毒性心肌炎的实验研究
- 2009年
- 目的:研究纳洛酮治疗病毒性心肌炎(viralmyocarditis,VMC)小鼠的作用机制。方法:120只BALB/c小鼠以柯萨奇病毒(coxsackievirus B3,CVB3)诱导制作VMC模型,在隔离实验室饲养。分别在接种病毒后72h各组给药至21d,CVB3组i.p.2500mg/kg生理盐水(n=60);纳络酮组i.p.2mg/kg(n=60);另取40只BALB/c小鼠作为对照组,同法接种100μL不含病毒的Eagle液,72h后i.p.给予2500mg/kg生理盐水。在病毒感染第5、7、14、21、28天,各组随机取8只小鼠,处死,留取心肌组织。观察小鼠死亡率与心肌组织病理改变,并采用RT-PCR和Western blot技术检测CVB3感染后各时间点小鼠心肌组织中κ-阿片受体(κ-opioid receptor,κOR)mRNA和蛋白质的表达水平。结果:CVB3感染后第5、7、14、21天,CVB3组κOR mRNA表达量显著高于对照组(P<0.01);κOR蛋白质的表达量在CVB3感染后第7、14、21天明显高于对照组(P<0.05)。CVB3感染后第7、14、21天纳洛酮组小鼠死亡率和病理组织改变低于CVB3组,κOR mRNA和蛋白质的表达量低于CVB3组(P<0.05)。结论:CVB3诱导性VMC小鼠心肌细胞的κOR基因和蛋白质水平明显上调,纳洛酮对VMC小鼠保护作用与抑制κOR基因和蛋白质水平有关。
- 丁媛媛王淑梅赵钢涛杨凡王四旺
- 关键词：Κ-阿片受体病毒性心肌炎纳洛酮
- 桂皮醛衍生物的合成及其对CVB_3的作用
- 2010年
- 目的:合成桂皮醛衍生物,观测其对心肌细胞的毒性及抗CVB3病毒的作用。方法:化学合成6种桂皮醛衍生物,其中3种进行了红外、质谱等结构表征;MTT法检测被CVB3病毒感染和用桂皮醛衍生物治疗后的心肌细胞活性。结果:α-溴代对氯肉桂醛、α-溴代对甲基肉桂醛、对氯肉桂醛3种桂皮醛衍生物对心肌细胞的半数毒性浓度(TC50)分别为2151.28μg·mL-1,1475.32μg·mL-1,22460.32μg·mL-1;对CVB3病毒的半数抑制浓度(IC50)分别为178.94μg·mL-1、173.35μg·mL-1、6045.25μg·mL-1;对CVB3病毒的治疗指数(TI)分别为12.02,8.51,3.71。结论:桂皮醛3种衍生物具有直接抑制CVB3病毒作用,但对病毒的细胞合成和吸附无明显作用。
- 刘欣欣孙晓莉张松丁媛媛王四旺
- 关键词：CVB3
- 肉桂油抗柯萨奇病毒B_3的血清药理学研究被引量：5
- 2012年
- 目的利用血清药理学方法探讨肉桂油抗柯萨奇病毒B3(CVB3)的作用机制。方法制备SD大鼠乳鼠心肌炎细胞模型,72 h后,加入肉桂油静脉给药所得的大鼠含药血清至感染细胞模型,同时设立模型组与空白对照组,测定血清中不同时间点桂皮醛与肉桂酸的含量,并采用实时定量聚合酶链反应(PCR)法测定各组CVB3mRNA的相对含量,噻唑蓝(MTT)比色法测定各组心肌细胞存活率。采用SPSS统计学软件对其进行单因素相关性分析。结果肉桂油含药血清对心肌细胞存活率和CVB3mRNA的相对含量的影响与肉桂酸的浓度相关(P<0.05或P<0.01),而与桂皮醛的浓度无显著相关。结论肉桂油对病毒性心肌炎具有抗病毒活性,肉桂酸是肉桂油抗病毒的活性成分。
- 丁媛媛邱麟曾明许茜许景峰
- 关键词：肉桂油桂皮醛血清药理学
- 桂皮醛治疗CVB_3诱发的小鼠病毒性心肌炎研究被引量：6
- 2009年
- 目的探讨桂皮醛(CA)对柯萨奇病毒B3(CVB3)诱发的小鼠病毒性心肌炎(VMC)作用及其机制。方法除正常对照组外,其他小鼠经腹腔注射CVB3m0.1mL建立病毒性心肌炎BALB/c小鼠模型。于接种病毒72h后,CA不同剂量治疗组分别灌胃给予CA22.5,28.1,37.5mg·kg-1,RA组腹腔注射黄芪注射液50mg·kg-1,模型组与正常对照组灌胃给予0.9%氯化钠溶液2500mg·kg-1,连续给药21d。观察接种病毒后第7天心肌组织病理学变化,测定血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)含量;测定接种病毒后第14天血清一氧化氮(NO)含量,第14天心肌诱导型一氧化氮合酶(iNOS)以及核因子κB(NF-κB)表达,行心肌组织光镜病理检查与评分;第21天行心肌组织光镜病理检查。计算小鼠累积死亡率和中位生存时间。结果与模型组比较,CA28.1,37.5mg·kg-1治疗组小鼠死亡率显著降低(均P<0.01),中位生存时间延长,感染第7天心肌病毒滴度降低,血清CK、CK-MB、LDH释放减少(均P<0.05)。血清NO含量明显降低(P<0.01),感染第14天心肌iNOS、NF-κB表达(P<0.05)与病理评分均明显改善。结论CA有治疗CVB3m诱发的小鼠病毒性心肌炎作用,其作用机制可能与抑制NF-κB与iNOS表达相关。
- 丁媛媛邱麟王四旺赵钢涛杨凡许景峰
- 关键词：桂皮醛诱导型一氧化氮合酶核因子ΚB
