肇庆市科技创新计划项目(2006E1818)
- 作品数:1 被引量:2H指数:1
- 相关作者:谭海芳丁丽娜林凤孔秀珍谭翰清更多>>
- 相关机构:肇庆市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金:肇庆市科技创新计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 诺如病毒遗传组Ⅱ型TaqMan-MGB探针实时荧光PCR的检测研究被引量:2
- 2008年
- 目的建立特异、灵敏的诺如病毒遗传组Ⅱ型TaqMan-MGB探针实时荧光PCR快速检测方法。方法根据GenBank诺如病毒遗传组Ⅱ型代表株保守序列设计特异引物对和TaqMan-MGB探针,调整引物、探针浓度,优化最佳反应条件,建立一步法实时荧光PCR快速检测反应体系,进行灵敏度、特异性、稳定性试验,以评价反应体系,并与引物P289/P290常规RT-PCR进行灵敏度比较。结果诺如病毒遗传组Ⅱ型TaqMan-MGB探针实时荧光PCR检测时限短,仅1h就出结果;最低检出下限为100拷贝/mL,比引物P289/P290常规RT-PCR灵敏度高100倍;与轮状病毒、腺病毒、星状病毒、甲肝病毒无交叉反应;4份核酸含量不同的标本重复检测5次,平均Ct值变异系数范围0.96%~2.27%。结论诺如病毒遗传组Ⅱ型TaqMan-MGB探针实时荧光PCR快速、特异、灵敏、稳定性好,可应用于突发公共卫生应急检测,提高快速检测能力。
- 陈华谭翰清郭赐贶谭海芳程洁萍林凤孔秀珍丁丽娜
- 关键词:人类杯状病毒诺如病毒实时荧光PCRTAQMAN