深圳市科技计划项目(200903090)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
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- sh-hnRNP-E2逆转录病毒对32D-P210细胞诱导的白血病模型小鼠的保护作用
- 2011年
- 目的探讨sh-hnRNP-E2逆转录病毒对32D-P210细胞诱导的白血病模型小鼠的保护作用。方法建立32D-P210转化细胞株在C3H等基因小鼠体内定殖的慢性粒细胞白血病(Chronic myeloid leukemia,CML)模型,并进行鉴定;sh-hn-RNP-E2逆转录病毒感染32D-P210细胞24 h后,经尾静脉移植入C3H等基因雌性小鼠中,观察sh-hnRNP-E2对CML模型小鼠的保护作用。结果经鉴定已成功建立32D-P210转化细胞株在C3H等基因小鼠体内定殖的CML模型;sh-hnRNP-E2逆转录病毒预感染32D-P210靶细胞,可促进靶细胞向粒系分化,并显著延长模型小鼠的生存期。结论 sh-hnRNP-E2逆转录病毒感染对CML模型小鼠具有显著的保护效应,是一种有效的CML体内治疗策略。
- 韩红星张文萍张秋萍杨燕单万水
- 关键词：细胞分化
- 建立BCR-ABL逆转录病毒介导的小鼠慢性粒细胞白血病模型的实验条件优化被引量：1
- 2010年
- 目的 探讨构建BCR-ABL逆转录病毒介导的小鼠慢性粒细胞白血病模型最佳实验条件,以简化实验过程、节约成本并提高建模成功率.方法 不同剂量5-氟脲嘧啶（5-FU）注射受体鼠后观察骨髓中原始细胞占有核细胞百分比;纤维连接蛋白（FN）铺板后观察逆转录病毒感染效率的变化;分别用不同数量的骨髓细胞（0.2～0.6）×106个进行移植后通过形态学观察和荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization,FISH）鉴定移植小鼠成模状况.结果 研究剂量范围内5-FU量不影响骨髓原始细胞相对数量;纤维连接蛋白铺板后可使活细胞数量增加30%～50%,感染效率提高10%～20%;移植0.5×106个成功感染了BCR-ABL逆转录病毒的供体鼠骨髓细胞入受体小鼠即可成功建模.结论 优化后的实验条件简化了程序,节约了成本,大大提高了建模成功率,为相关研究提供了良好的实验参考.
- 张文萍韩红星杨燕陈荣贵单万水
- 关键词：纤连蛋白类小鼠
- 多聚胞嘧啶结合蛋白E2的RNA干扰对白血病32DP210细胞分化影响的分子机制探讨被引量：1
- 2010年
- 目的:Bcr/abl诱导多聚胞嘧啶结合蛋白E2[poly(rC)-binding protein-E2,hnRNP-E2]的异常表达在慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)急变中起着重要作用。本研究旨在探讨hnRNP-E2特异性小发夹RNA(shor thairpin RNA,shRNA)对小鼠白血病32DP210细胞分化的影响,并初步探讨其可能的分子机制。方法:构建能表达特异性抑制小鼠hnRNP-E2基因表达的shRNA(即sh-hnRNP-E2)反转录病毒载体,经Phoenix-Ampho细胞包装后,取上清液感染小鼠白血病32DP210细胞,然后采用RT-PCR和Western印迹法验证sh-hnRNP-E2对hnRNP-E2 mRNA的干扰以及蛋白表达抑制效果,瑞氏染色法观察靶细胞分化情况,FCM法检测粒系分化抗原Gr-1表达情况,Western印迹法检测下游野生型CCAAT增强子结合蛋白α(CCAAT/enhancer-binding protein α,C/EBPα)的表达情况。结果:sh-hnRNP-E2反转录病毒感染32DP210细胞后,显著抑制靶细胞内hnRNP-E2 mRNA和蛋白的表达;靶细胞形态学出现粒系分化特征,细胞表面粒系分化抗原Gr-1表达被诱导;同时,靶细胞内野生型C/EBPα蛋白的表达恢复。结论:sh-hnRNP-E2特异性沉默靶细胞内hnRNP-E2基因表达后,可促进32DP210细胞向粒系分化;其机制可能与hnRNP-E2表达受抑制后,不能再对C/EBPα的翻译模式进行异常调控,从而恢复野生型C/EBPα的表达有关。
- 张文萍韩红星陈荣贵杨燕单万水
- 关键词：RNA干扰细胞分化
