国家自然科学基金(90919005)
- 作品数：5 被引量：5H指数：2
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- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- SAFB1蛋白的表达纯化及其对乳腺癌细胞抑制作用的验证被引量：2
- 2010年
- 利用RT-PCR方法从7721细胞系中分离野生型SAFB1基因,将该基因分别克隆入PET28a和pcDNA3.1载体来构建原核表达及真核表达载体.重组质粒经IPTG诱导表达后亲和层析纯化,用Western印迹实验验证蛋白表达的正确性.将SAFB1基因转入MCF7中,以RT-PCR的方法检测蛋白的表达,检测其对XOR基因的调控作用及做生长曲线验证其对乳腺癌细胞抑制作用.结果证实了SAFB1对乳腺癌细胞生长抑制作用非常明显,且对XOR基因的表达有一定的抑制作用.
- 季雯娟张磊王慧娟刘挺柏庆然吴传芳
- 关键词：肿瘤抑制表达纯化
- RBM5蛋白调控c-FLIP差异性剪切及其抑制A549增殖的研究被引量：2
- 2010年
- 本文试探讨RBM5蛋白对肺腺癌细胞A549增殖的影响及其作用机制,以期为开辟肺癌基因治疗新途径提供帮助.本研究构建了表达RBM5基因的真核表达载体,并转染A549细胞株,增强其中该基因的表达量.采用RT-PCR检测转染后A549细胞中c-FLIP基因不同剪切体的表达量,并绘制生长曲线.结果表明,RBM5基因在A549细胞中的高表达,可以调控c-FLIP的差异剪切,减少c-FLIPs的表达量,激活细胞程序化死亡相关通路,抑制肺腺癌细胞恶性增殖.
- 张磊季雯娟柏庆然王慧娟吴传芳
- 关键词：细胞程序化死亡恶性增殖C-FLIP
- 新型靶向性药物VEGF-hFc的抗肿瘤研究
- 2011年
- 生物机体内天然存在许多受体与配体,它们之间亲和结合力远远高于抗体亲和力(K_d=10^(-8)～10^(-9)).本实验根据VEGFR和VEGF之间的高亲和力(K_d=1.6×10^(-11)),以新生血管细胞表面的VEGFR为靶点,设计VEGF-hFc融合蛋白作为靶向抗肿瘤药物.在本实验中构建pcDNA3.1-IgG leader-VEGF-hFc重组载体,转染CHO/dhFr^-细胞真核表达融合蛋白VEGF-hFc,并通过Protein A纯化.使用A549细胞构建人非小细胞肺癌裸鼠肿瘤模型,小鼠静脉注射10μg VEGF-hFc融合蛋白用以抗肿瘤研究.连续给药4次后,肿瘤生长曲线表明,与对照组相比,实验组小鼠的肿瘤生长得到明显的抑制甚至消退;数据统计显示,VEGF-hFc肿瘤抑制率达90%.
- 邹利平栾广信俸婷婷徐弈江吴传芳
- 关键词：VEGFVEGFRHFC靶向性肿瘤抑制
- piggyBac共转染系统的构建以及转座活性的验证被引量：1
- 2011年
- piggyBac(PB)转座子的末端反向重复序列(ITR)和转座酶编码序列(PBase)分别克隆于质粒PB1156、atub-pBac-K10.1TR与包含红色荧光蛋白表达序列(RFP)的质粒pmClherry-N1重组构成供体质粒(Donor);PBase与真核表达载体pEFrF-PGK重组构成辅助质粒(Helper).使用由供体质粒与辅助质粒组成的PB二元共转染系统转染HEK293细胞,结果表明该二元共转染系统具有较好的转座活性,并且在分子水平验证了转座的发生以及使用反向PCR(IPCR)定位了其中一个转座插入位点在HEK293基因组DNA上的位置.
- 缪辉刘华华吴传芳
- 关键词：转座子共转染
- LAGE-1DNA肿瘤疫苗的抗肿瘤治疗效果研究
- 2011年
- 以LAGE-1转染EMT6构建小鼠乳腺癌肿瘤模型;将BalB/c小鼠随机分为4组,以pcDNA3.1/LAGE-1及对照pcDNA3.1分别接种实验组和对照组各三次.于末次免疫后10 d在小鼠左背部、右背部皮下分别种植EMT6肿瘤细胞和EMT6/LAGE-1肿瘤细胞.荷瘤后观察成瘤时间、肿瘤大小,并对小鼠脾细胞进行CTL细胞杀伤活性实验来观察DNA疫苗引起的免疫反应.结果显示LAGE-1DNA疫苗在体内能诱导有效的特异性肿瘤免疫应答,该疫苗简便有效.
- 徐弈江顾杨卓俸婷婷吴传芳
- 关键词：免疫应答
