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热休克蛋白70入核转位参与缺血再灌注损伤的脱氧核糖核酸修复的实验研究被引量：4: 2019年; 目的观察肝脏缺血再灌注损伤条件下HSP70改变细胞周期动力学影响的核机制。方法雄性SD大鼠随机分为5组:HSP70抑制组(H-/P+组)、热休克组(H+/P+组)、PARP-1蛋白抑制组(H+/P-组)、缺血再灌注组(PC组)、阴性对照组(NC组)。造模成功后取肝脏组织免疫组化染色检测PARP-1的表达;提取核蛋白,免疫共沉淀法检测HSP70与PARP-1的结合;免疫荧光组织化学双染法显示HSP70与CyclinD1的表达时间点。结果NC组与其他组比较PARP-1的表达低(P<0.01);免疫共沉淀提示HSP70进入细胞核中与PARP-1结合;免疫荧光组织化学双染显示HSP70回归胞质的时间点在IR1-2h与CyclinD1出现时间一致。结论可复性肝脏缺血再灌注损伤,HSP70进入细胞核与PARP-1结合,对于G2/M期进行负调控,抑制细胞进行DNA复制重组,阻滞其进入有丝分裂,修复受损DNA链;缺血再灌注对于G1/S期进行正调控,促进肝细胞再生和肝脏功能代偿。; 张劭张静张晓宁金春梅詹翔李豪; 关键词：HSP70热休克蛋白质类再灌注损伤 DNA修复

缺血再灌注损伤致Hsp ala蛋白在肝小叶中央静脉区早期表达的动态观察: 2012年; 研究结果显示在大鼠肝脏缺血再灌注损伤（IRI）过程中，早期有885个基因上调，包括细胞周期相关基因和热休克家族基因等。实验检测到Hsp ala较灌注前上调10．9倍，发挥保护作用。本研究旨在检测Hsp ala、细胞周期蛋白D1（CCND1）的表达，探讨IR对细胞周期的影响。; 张劭张静; 关键词：HSP 细胞周期相关基因中央静脉 LA蛋白动态观肝小叶

缺血再灌注损伤对大鼠肝细胞周期G2／M期相关基因Gadd45a和Egr-1表达的影响被引量：2: 2012年; 目的观察缺血再灌注损伤（IRI）对大鼠肝组织内细胞周期调控相关基因转录和表达的影响，探讨生长阻滞和DNA损伤修复基因（Gadd45a）和早期生长反应基因1（Egr-1）参与DNA损伤后修复的可能机制。方法按随机成组对照设计将大鼠平均分为正常对照组、缺血组、再灌注30min、1h、2h、3h及24h组，于相应时间点获取大鼠肝组织样本，将利用芯片实验筛选出的关键基因Gadd45a和Egr-1作为目的基因，并采用RNA印迹法和实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）验证基因芯片筛查的结果，采用荧光免疫组织化学染色检测冰冻新鲜肝组织样本Egr-1的表达，采用免疫组织化学染色检测肝组织样本Gadd45a的表达。结果RNA印迹检测结果显示，RT-PCR产物与待测的目标基因一致；表达谱芯片信号与RT-PCR的检测显示，目的基因的表达变化特征均为再灌注早期（1h）升高4倍以上，其中Egr-1的表达上调9．39倍，Gadd45a的表达上调8．28倍及热休克蛋白70—1a的表达上调10．8倍；再灌注后24h均降至正常水平，芯片初筛结果与RT-PCR的检测结果一致，是准确、可靠的。荧光免疫组织化学检测显示，再灌注1h组和2h组肝组织细胞核Egr-1的表达均为阳性；免疫组织化学检测显示，随着再灌注时间的增加，细胞核和细胞浆内Gadd45的表达逐渐升高。结论Gadd45a和Egr-1基因均是核因子κB调控通路的关键基因，在大鼠肝脏IRI中参与调控了细胞周期G2／M期的停滞和修复受损的DNA。; 张劭张静; 关键词：缺血再灌注

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湖南省自然科学基金(09JJ3061)

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