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湛江市财政资金科技专项竞争性分配项目([2009]163-10)
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1
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相关作者:
孙欣
陈思圆
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2013
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转染骨形态发生蛋白-2基因的血管内皮祖细胞的构建
2013年
目的通过克隆、构建pEGFP-BMP-2表达质粒载体,观察骨形态发生蛋白-2(BMP-2)基因在血管内皮祖细胞(EPCs)中的表达与分布。方法采用密度梯度法分离兔骨髓的单个核细胞,应用细胞荧光化学法及DAPI染细胞核法鉴定培养的细胞;BMP-2重组于pEGFP-C3中,经酶切、测序分析鉴定后,将其转染入EPCs内并筛选稳定转染细胞。结果鉴定培养的细胞为EPCs;pEGFP-C3-BMP-2表达质粒载体经双酶切鉴定、测序分析证实其构建成功;成功转染的EPCs中绿色荧光弥散分布于细胞胞质内,表明pEGFP-C3-BMP-2蛋白高表达,表达率为46%。结论分离与培养出EPCs;构建的pEGFP-C3-BMP-2表达质粒载体转染后,BMP-2蛋白高效表达于EPCs胞质中。
孙欣
曾荣
吴浩俊
胡资斌
陈思圆
魏劲松
林颢
关键词:
血管内皮祖细胞
骨形态发生蛋白-2
质粒构建
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