国家自然科学基金(30871778)
- 作品数：10 被引量：13H指数：2
- 相关作者：孙金海吴明明孙泰雷柏蒙蒙侯永刚更多>>
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- 发文基金：国家自然科学基金转基因生物新品种培育专项山东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金更多>>
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- 转外源基因(pGH)在猪染色体上整合状况被引量：1
- 2013年
- 应用地高辛标记技术,对通过睾丸注射法制备的转基因猪进行荧光原位杂交,确定外源pGH(猪生长激素)基因在染色体上的整合位点及数目。选用睾丸注射法制备的140日龄转基因长白猪6头与同期同龄非转基因猪2头进行血细胞培养及荧光原位杂交。结果显示,外源基因已整合于染色体上,但在染色体上的整合位点具有随机性,而且不同的转基因猪阳性个体外源基因在染色体上的整合位点有差异,但集中分布于1、6、8、13号染色体上;非转基因猪染色体上无杂交信号;个体杂交信号数越多,其生长速度越快。
- 蒋亚军吴明明孙金海
- 关键词：转基因猪整合位点地高辛荧光原位杂交
- 家猪13/17罗伯逊易位染色体着丝粒DNA的FISH检测
- 2009年
- 根据已报道的家猪着丝粒卫星DNA序列设计引物,对家猪基因组DNA进行PCR扩增,得到AC2卫星DNA序列。用PCR法将D ig-dUTP插入目的片段中得到标记DNA,然后利用荧光原位杂交方法检测13/17易位染色体。研究结果显示杂交信号位于所有端着丝粒染色体和13/17易位染色体的着丝粒区域,表明13号染色体和17号染色体虽然融合为一条亚中着丝粒染色体,但仍含有端着丝粒AC2卫星DNA,13/17易位染色体的AC2卫星DNA未发生缺失。
- 何晓波侯永刚孙泰雷柏蒙蒙孙金海
- 关键词：家猪罗伯逊易位荧光原位杂交
- 13/17罗伯逊易位猪NCOA1基因的多态性与产仔性状的相关分析
- 2010年
- 柏蒙蒙侯永刚孙泰雷吴明明孙金海
- 关键词：候选基因产仔性状罗伯逊易位母猪多态性雌激素受体
- 猪NCOA1基因PCR-RFLP多态性分析(摘要)(英文)
- 2010年
- [目的]研究猪NCOA1基因的PCR-RFLP多态性,为猪的分子育种和标记辅助选择提供理论依据。[方法]以81头山东寿光六和原种猪场的长白猪为研究对象,采取常规酚-氯仿抽提法从猪耳组织提取基因组DNA,以基因组DNA为模板进行PCR扩增获得440 bp的NCOA1基因目的片段,利用限制性内切酶RsaⅠ对PCR产物进行酶切和琼脂凝胶电泳检测,并计算各等位基因频率和基因型频率。[结果]琼脂糖电泳检测酶切产物出现3种基因型:AA型(1条带:440 bp)、AB型(3条带:440、282、158 bp)、BB型(2条带:282、158 bp);基因型频率分别为0.54、0.43和0.03;A和B 2个等位基因的基因频率分别为0.76和0.24。[结论]该研究猪群中,A为优势等位基因,AA基因型频率较高。
- 侯永刚闫守庆何晓波柏蒙蒙孙泰雷吴明明孙金海
- 关键词：NCOA1基因PCR-RFLP多态性
- 13/17罗伯逊易位猪CMYA3基因多态性分析(摘要)(英文)被引量：2
- 2010年
- [目的]对13/17罗伯逊易位杂合子猪[2n=36,rob(13;17)]互交后代中的148个体进行CMYA3基因的多态性分析。[方法]采用PCR-RFLP方法分析CMYA3基因在13/17罗伯逊易位猪群中的多态性。用酚-氯仿抽提法从猪耳组织中提取基因组DNA。以基因组DNA为模板进行PCR扩增,反应体系为25μl:dNTPs 2μl,上下游引物各0.5μl,Taq酶1 U,模板DNA1μl,用ddH2O补足至25μl。PCR反应条件为:94℃预变性5 min;94℃变性30 s,53℃退火45 s,72℃延伸30 s,共35个循环;72℃延伸10 min。PCR产物经PCR纯化试剂盒纯化,限制性内切酶Bsh1236 I 37℃酶切过夜后,1%琼脂糖凝胶电泳,检测酶切结果。[结果]通过PCR扩增所有个体均能获得507 bp的目的片段,PCR产物经限制性内切酶Bsh1236I酶切,琼脂糖凝胶电泳结果表明该基因在此群体中具有A和B 2个等位基因,基因频率分别为0.699和0.301,具有AA、AB和BB 3种基因型,基因型频率分别为0.615、0.169和0.216。因此,在该试验猪群中,A为优势等位基因,AA基因型频率最大。[结论]该研究为13/17罗伯逊易位猪的分子育种和标记辅助选择提供了理论依据。
- 孙泰雷闫守庆柏蒙蒙侯永刚吴明明李戈孙金海
- 关键词：罗伯逊易位PCR-RFLP
- 家猪13/17罗伯逊易位染色体着丝粒的研究
- 引言罗伯逊易位(Robertsonian translocation)是近端着丝粒染色体中的任何两条,通过着丝粒融合(centric fusion)形成的染色体结构异常。虽然目前还没有确切的理论能解释各种罗伯逊易位产生的...
- 侯永刚迟晓瑶吴明明孙静刘剑飞曹月胜蒋亚军孙金海
- 文献传递
- 猪NCOA1基因PCR-RFLP多态性分析被引量：6
- 2010年
- [目的]研究猪NCOA1基因的PCR-RFLP多态性,为猪的分子育种和标记辅助选择提供理论依据。[方法]以81头山东寿光六和原种猪场的长白猪为研究对象,采取常规酚-氯仿抽提法从猪耳组织提取基因组DNA,以基因组DNA为模板进行PCR扩增获得440bp的NCOA1基因目的片段,利用限制性内切酶RsaⅠ对PCR产物进行酶切和琼脂凝胶电泳检测,并计算各等位基因频率和基因型频率。[结果]琼脂糖电泳检测酶切产物出现3种基因型:AA型(1条带:440bp)、AB型(3条带:440、282、158bp)、BB型(2条带:282、158bp);基因型频率分别为0.54、0.43和0.03;A和B2个等位基因的基因频率分别为0.76和0.24。[结论]该研究猪群中,A为优势等位基因,AA基因型频率较高。
- 侯永刚闫守庆何晓波柏蒙蒙孙泰雷吴明明孙金海
- 关键词：NCOA1基因PCR-RFLP多态性
- AC2卫星DNA在家猪13/17罗伯逊易位研究中的应用
- ＜正＞引言罗伯逊易位包含罗伯逊融合和罗伯逊断裂两个内容,融合和断裂的位置都位于着丝粒处。目前尚无确切的理论来解释各种罗伯逊易位产生的分子机制以及所带来遗传效应,但比较肯定的是各种罗伯逊易位所产生
- 何晓波侯永刚孙泰雷柏蒙蒙孙金海
- 关键词：家猪卫星DNA荧光原位杂交
- 文献传递
- 猪pGH基因真核表达载体的构建及其表达被引量：2
- 2010年
- 从120日龄的长白猪脑垂体组织中扩增出pGH基因的cDNA,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,通过DNA重组技术将该基因片段重组于pEGFP-N1真核表达载体上,构建pEGFP-N1-pGH重组质粒。通过PCR扩增、酶切电泳分析和测序的方法对重组DNA进行鉴定,并将其转染PK15细胞,通过荧光素酶活性检测特异性表达强度.结果表明,成功构建了pEGFP-N1-pGH真核表达载体,为转基因猪的研究奠定了基础。
- 吴明明闫守庆孙金海
- 关键词：猪生长激素基因真核表达克隆转基因
- 13/17罗伯逊易位猪CMYA 3基因多态性分析
- 2010年
- [目的]对13/17罗伯逊易位杂合子猪[2n=36,rob(13;17)]互交后代中的148个个体进行了CMYA3基因的多态性分析。[方法]采用PCR-RFLP方法。[结果]通过PCR扩增所有个体均能获得507bp的目的片段,PCR产物经限制性内切酶Bsh1236I酶切,琼脂糖凝胶电泳结果表明该基因在此群体中具有A和B2个等位基因,基因频率分别为0.699和0.301;具有AA、AB和BB3种基因型,基因型频率分别为0.615、0.169和0.216。因此,该试验猪群中,A为优势等位基因,AA基因型频率最大。[结论]该研究为13/17罗伯逊易位猪的分子育种和标记辅助选择提供理论依据。
- 孙泰雷闫守庆柏蒙蒙侯永刚吴明明李戈孙金海
- 关键词：罗伯逊易位PCR-RFLP
