国家自然科学基金(30800785)
- 作品数:3 被引量:4H指数:2
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- 猪卵母细胞核质蛋白及Npm基因表达检测研究
- 本实验以猪体外成熟卵母细胞为材料,检测猪卵母细胞质中核质蛋白的定性定量表达,同时检测其编码基因Npm基因的表达量,为今后体细胞核移植过程中核重新编程研究提供理论依据。
- 成文敏潘伟荣卿玉波信吉阁魏红江
- 关键词:胚胎学猪卵母细胞基因表达体细胞核移植
- 猪孤雌激活早期胚胎线粒体分布及mtDNA拷贝数变化的研究被引量:2
- 2012年
- 本研究通过线粒体分子探针标记技术检测孤雌激活早期胚胎线粒体的分布变化,运用实时荧光定量PCR技术检测mtDNA拷贝数的变化,揭示早期胚胎发育过程中线粒体分布、mtDNA拷贝数变化趋势。结果表明,成熟卵母细胞电激活后,由2-细胞胚胎开始,卵裂球内线粒体分布均匀且密集,每个细胞均有分布,卵裂球之外的空隙未见线粒体分布,直到囊胚形成,线粒体均有分布。孤雌激活4-细胞胚胎mtDNA拷贝数显著高于8-细胞胚胎mtDNA拷贝数(907210.77±145520.77,186224.33±103308.00,P<0.05),但显著低于2-细胞胚胎、桑椹胚、囊胚的mtDNA拷贝数(1563422.54±224666.51、1697626.25±176999.53和1752301.29±101146.64,P<0.05)。孤雌激活扩张囊胚mtDNA拷贝数最高,为2812545.67±156819.31,显著高于其他发育时期胚胎的mtDNA拷贝数(P<0.05)。由此可见,孤雌激活早期胚胎发育进程中线粒体分布及mtDNA拷贝数会发生变化。
- 成文敏魏红江潘伟荣信吉阁黄言曾养志
- 关键词:猪卵母细胞孤雌激活
- 猪卵母细胞Npm基因及其编码核质蛋白表达研究
- 2013年
- 核质蛋白是广泛存在于卵母细胞中的由Npm基因编码的一种酸性、磷酸化的蛋白质,为分子伴侣家族的一员。本研究通过RT-PCR检测成熟不同时期卵母细胞Npm mRNA基因表达,同时采用免疫组化以及Western blot检测成熟不同时期卵母细胞核质蛋白定性和定量表达。结果:成熟不同时期卵母细胞中均可检测到Npm基因mRNA表达。采用免疫组化的方法在体外成熟0 h和11 h卵母细胞中可检测到核质蛋白表达,但成熟22 h、33 h、44 h的卵母细胞检测不到核质蛋白表达;采用Western blot技术在体外成熟0 h和11 h卵母细胞中检测不到核质蛋白,成熟22 h、33 h、44 h卵母细胞可检测到核质蛋白。结果说明随着卵母细胞体外成熟进程的推进,Npm基因及其编码的核质蛋白表达量不断增加,可为受精后精子核解聚或体细胞核重编程做准备。
- 成文敏潘伟荣卿玉波魏红江曾养志
- 关键词:NPM卵母细胞
- 猪卵母细胞线粒体分布及线粒体DNA拷贝数变化被引量:3
- 2011年
- 本研究旨在观察猪卵母细胞线粒体分布及线粒体DNA拷贝数变化,以期作为判定哺乳动物卵母细胞胞质成熟的指标,同时也为今后克隆技术的发展和相关基因表达调控的研究提供基础。运用线粒体分子探针标记技术检测体外成熟不同时期卵母细胞中线粒体的分布变化,运用实时荧光定量PCR技术检测其线粒体DNA拷贝数的变化趋势,揭示线粒体分布、线粒体DNA拷贝数变化与卵母细胞发育潜能的关系。结果表明,猪卵母细胞成熟前后,线粒体分布由未成熟的周边分布变为成熟后的均匀分布,并且线粒体簇变大,着色变深。卵母细胞成熟0、11、22h的mtDNA拷贝数分别为(2 519.52±940.39)、(3 421.47±345.71)和(9 747.58±1 928.24),他们之间无显著性差异(P>0.05)。卵母细胞成熟33h的mtDNA拷贝数为(39 913.61±1 180.26),显著高于成熟0、11和22h的mtDNA拷贝数(P<0.05)。卵母细胞成熟44h的mtDNA拷贝数为(130 074.30±78 119.45),显著高于成熟33h的mtDNA拷贝数(P<0.05)。由此可见,随着卵母细胞成熟进程的推进,线粒体活性增强,线粒体DNA拷贝数明显增加。
- 成文敏霍金龙信吉阁潘伟荣黄言魏红江曾养志
- 关键词:猪卵母细胞体外成熟