国家科技攻关计划(BA518A04)
- 作品数：2 被引量：7H指数：1
- 相关作者：宫强刘思国郭设平迟磊王勇更多>>
- 相关机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所河南科技大学更多>>
- 发文基金：国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 牛分枝杆菌esat-6和mpb70-mpb83基因DNA疫苗的免疫效果被引量：6
- 2007年
- 用PCR技术和重叠延伸剪接技术获得牛分枝杆菌esat-6基因和mpb70-mpb83融合基因,连接真核表达载体pcDNA3.1(+),构建了重组质粒pCE6和pC70-83-E6。分4组免疫小鼠:pCE6组、pC70-83-E6组、pcDNA3.1(+)和PBS对照组,采用间接ELISA法检测免疫小鼠血清特异性抗体水平,MTT法检测免疫小鼠脾淋巴细胞增殖情况和IFN-γ分泌情况。结果表明,2重组质粒免疫组小鼠的血清抗体水平持续上升,而2对照组始终维持在较低水平,且pC70-83-E6组小鼠的抗体水平高于pCE6组。经PPD刺激后,pCE6组和pC70-83-E6组小鼠的SI值与2对照组均差异显著(P<0.05),2重组质粒免疫组间差异不显著(P>0.05);2重组质粒免疫小鼠脾细胞产生的IFN-γ均显著高于2对照组(P<0.05),且pC70-83-E6组明显高于其他3组(P<0.05)。证实本试验构建的2种牛分枝杆菌DNA疫苗可有效诱导实验动物产生体液免疫和细胞免疫应答。
- 宫强刘思国郭设平王春来王勇刘建东赵昆迟磊孔宪刚
- 关键词：牛分枝杆菌DNA疫苗免疫应答
- 牛结核杆菌MPB64蛋白的真核表达被引量：1
- 2009年
- 利用PCR技术扩增出牛结核杆菌mpb64基因片段,克隆到真核载体pcDNA3.1(+)上,构建重组质粒pCM64,将该重组质粒转染SP2/0细胞,间接免疫荧光试验和Western blotting检测目的基因的表达情况。结果表明,在转染了重组质粒pCM64的SP2/0细胞中出现绿色荧光,转染的SP2/0细胞泳道23 kDa处出现特异条带,说明mpb64基因在SP2/0细胞中成功进行了瞬时表达。
- 宫强曲宁刘思国
