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ETEC粘附素蛋白亚基Fae G在乳酸乳球菌中的表达及免疫反应性分析被引量：3: 2009年; 为探索研制预防仔猪腹泻口服基因工程疫苗,本研究根据GenBank中登录的产肠毒素大肠杆菌(ETEC)Fae G基因序列设计一对引物,以ETEC C83907菌株为模板,通过PCR方法扩增出K88菌毛粘附素主要蛋白亚基Fae G的基因,将其定向克隆到乳酸乳球菌(L.lactis)分泌表达载体pNZ8112中,构建了分泌表达载体pNZ8112-fae G,并转化到L.lactis NZ9000中。重组菌株经5ng/mL nisin诱导3h后,仅在L.lactis菌体内检测到Fae G的表达,上清液中未检测到Fae G蛋白。SDS-PAGE电泳检测结果显示,表达的目的蛋白分子量大小约为27ku,表达产物的量达到了菌体总蛋白的13.56%。Western blot分析结果表明,表达蛋白具有免疫反应性。本实验为进一步研究FaeG在L.lactis中分泌表达的影响因素奠定了基础。; 刘淑杰李永明徐子伟王一成; 关键词：产肠毒素大肠杆菌 FAE 乳酸乳球菌

饲用益生素在畜禽健康养殖中的应用被引量：25: 2012年; 益生素是一种新型无毒、绿色的微生物类饲料添加剂,具有调节动物机体微生态平衡、预防疾病、提高饲料转化率、促进动物健康和保护生态环境等多方面功能。因其在使用过程中无毒副作用、无药物残留、不产生耐药性,而成为抗生素的理想替代品,广泛应用于畜禽生产中。文章综述了饲用益生素的起源、种类及作用机理,探讨了益生素在畜禽健康养殖中的应用前景及发展趋势。; 吕玉丽徐子伟吴建良李永明邓波; 关键词：益生素畜禽健康养殖

产肠毒素大肠杆菌K88黏附素蛋白亚基Fae G在L.lactis中的表达及其抗原性: 2009年; 在构建L.lactis表达载体pNZ8148-faeG的基础上,将该载体转化到L.lactisNZ9000中,重组菌经5μg/Lnisin诱导3 h,SDS-PAGE结果显示,Fae G在L.lactis中表达的目的蛋白相对分子质量大小约为27 000,表达产物的量达菌体可溶性总蛋白的10.89%。Western blot分析结果表明,该目的蛋白具有良好反应原性。将重组L.lactis口服免疫BALB/c小鼠,小鼠产生特异性IgG及黏膜sIgA。本试验为进一步研究仔猪口服重组L.lactis疫苗,诱导其产生抗ETEC K88黏膜免疫的同时,发挥L.lactis的益生功能,预防仔猪腹泻奠定了基础。; 刘淑杰李永明徐子伟王一成; 关键词：产肠毒素大肠杆菌 FAE LACTOCOCCUS LACTIS 口服免疫

乳酸乳球菌作为基因工程受体菌研究进展被引量：6: 2010年; 乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)是一种"公认安全"的革兰氏阳性细菌,广泛存在于人、畜的肠道中并发挥许多重要的生理功能。由于它兼具安全性与益生性,近几年来研究者们开始关注用乳酸乳球菌作为受体菌来表达外源蛋白。随着生物技术的发展,人们对乳酸乳球菌基因表达及调控过程的认识不断深入并构建了一系列表达,成功地表达了许多外源蛋白,初步展示出良好的应用前景。主要对近年来国内外将乳酸乳球菌作为外源蛋白表达受体菌方面的研究进展做简要综述。; 李芳李永明徐子伟张磊; 关键词：乳酸乳球菌受体菌外源蛋白

K88菌毛及其在仔猪断奶腹泻预防制剂开发中的应用被引量：5: 2010年; K88大肠杆菌是引起仔猪断奶后腹泻(PWD)的主要病原。现有商业疫苗通过母猪免疫能有效控制新生仔猪大肠杆菌性腹泻,而对PWD却难以奏效。口服疫苗能诱导肠粘膜产生局部抗体,阻止致病性大肠杆菌的粘附,进而预防PWD。从分子水平认识K88菌毛及其受体的生物学特性,对口服疫苗的研制具有重要意义。文章概述国内外关于K88菌毛基本特性、蛋白亚基及受体的研究,就K88菌毛在PWD预防制剂研发中的应用的进展作了综述,并探讨分析了口服基因工程细菌疫苗和植物疫苗的前景。; 张磊李永明徐子伟李芳; 关键词：断奶后腹泻 K88 菌毛

表达大肠杆菌黏附素的重组乳酸菌注射接种断奶仔猪的试验研究: 菌毛黏附素是产肠毒素大肠埃希氏菌(enterotoxigenic Escherichia coli, ETEC)感染仔猪并导致其腹泻的重要致病因子,研究表明口服免疫F4菌毛或菌毛黏附素主要蛋白亚基FaeG可诱导仔猪产生特...; 刘淑杰李永明徐子伟; 关键词：乳酸乳球菌免疫反应肌肉注射

少量动物粪便细菌总DNA提取方法的研究被引量：6: 2009年; 本研究首先采用棉签直接插入肛门法采集仔猪粪便样品,继而通过酚-氯仿抽提法、CTAB法和试剂盒法等3种方法提取样品中细菌总DNA。结果表明:UNIQ-10柱式细菌基因组DNA抽提试剂盒更适宜于提取少量动物粪便细菌总DNA及后续的分子生物学试验。; 陶新徐子伟邓波李永明刘敏华; 关键词：粪便细菌 DNA 仔猪

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国家自然科学基金(30871799)