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美洲商陆谷氧还蛋白基因PaGRXC13的克隆与生物信息学分析被引量：3: 2016年; 谷氧还蛋白(Glutaredoxin,GRX)是一类小分子氧化还原酶,能够调节蛋白质的氧化还原状态,在逆境胁迫中发挥重要的作用。本研究从美洲商陆鉴定克隆了一个重金属镉诱导表达的谷氧还蛋白基因Pa GRXC13。该基因全长306 bp,编码101个氨基酸。Pa GRXC13蛋白分子量约为11.189 k D,属于典型的CC型谷氧还蛋白。Pa GRXC13与不同来源CC型谷氧还蛋白的氨基酸序列保守性较高,一致率介于67.0~83.5%之间。系统进化分析显示,Pa GRXC13与菠菜(Spinacia oleracea)、中粒咖啡(Coffea canephora)和克莱门柑橘(Citrus clementina)的GRXC13处在同一个进化分支上。该基因在美洲商陆的叶和须根中具高转录水平,在块根和茎中表达量低。; 陈永坤赵启红刘海珍周天行徐吉臣; 关键词：美洲商陆克隆生物信息学

不同草地早熟禾品种愈伤组织再生体系研究被引量：4: 2012年; 草地早熟禾(Poa pratensisL.)是一种复杂的多倍体植物且具有兼性无融合生殖方式,建立高效的愈伤组织培养体系是进行基因工程育种的重要环节。本研究利用生产中常用的6个草地早熟禾品种为材料,经愈伤组织诱导后,对其愈伤组织分化及再生体系进行了研究。结果发现,不同草地早熟禾品种的分化再生能力具有明显的差异,不同激素处理组合对草地早熟禾愈伤组织的分化有显著的影响:品种如"帝王"、"超级伊克利"、"蓝鸟"等较易分化和再生,品种如"盛宴"、"布鲁克"等则只在特定条件下分化和再生;培养基激素处理组合Ⅴ(2mg/L6-BA+0.1mg/L2,4-D)较适合于所有检测的品种,处理组合Ⅳ(2mg/L6-BA)和Ⅵ(2mg/L6-BA+0.2mg/L2,4-D)对部分品种的分化有较大的促进作用。研究同时评估了2种激素配比(6-BA和2,4-D)对早地早熟禾愈伤分化再生的影响,发现不同草坪草品种对单独使用的6-BA浓度敏感性不同,补加2,4-D后不同品种的分化率也存在明显差异。研究建立的不同草地早熟禾品种的高效再生体系,不仅有利于这些品种的基因工程改造,也为草地早熟禾愈伤组织再生体系研究奠定了重要的理论基础。; 雷炳琪代亮柳玉霞刘洁徐筱徐倩徐吉臣; 关键词：草地早熟禾

垂序商陆抗坏血酸过氧化物酶(APX1)基因克隆及表达分析被引量：2: 2016年; 从垂序商陆中克隆了抗坏血酸过氧化物酶基因PaAPX,CDS(coding sequence)全长为753 by,可编码250个氨基酸,预测蛋白分子质量为27.54 kD,等电点为5.39,二级结构主要由α螺旋和无规则卷曲组成。生物信息学分析显示,在氨基酸水平上PaAPX1蛋白与菠菜的同源性达到93.2%,系统进化树显示与菠菜、盐地碱蓬、甜菜等物种的亲缘性较近;实时荧光定量PCR结果显示,PaAPX1在块根、须根、茎、叶中均有表达,茎和叶中的表达量高于根连;镉胁迫处理后,PaAPX1在块根、须根中上调表达,茎和叶中下调表达,且根中的表达量高于茎和叶。; 赵启红张皓刘海珍徐吉臣; 关键词：抗坏血酸过氧化物酶基因克隆

草坪草AsEXP1基因片段的序列多样性分析: 2011年; 草坪草的种类繁多,包含禾本科十几个属。本研究根据已报导的AsEXP1基因序列设计引物,扩增并测序了草坪草3个属共计6个品种植物材料约460 bp的AsEXP1基因片段。序列比对显示,不同草坪草品种间存在基因序列的差异,并呈现种属特征,即同属品种存在特定的碱基插入、缺失或替换等,同属品种间同源率超过97%,不同属品种间同源率在91%~94%之间。据此设计3对特异引物cAs3F/cAs3R、cAs4F/cAs4R和cAs5F/cAs5R,并利用6个主要草坪草属的32个草坪草品种进行了验证,结果表明,引物组合cAs3F/cAs3R可以鉴定剪股颖属品种,引物组合cAs4F/cAs4R能鉴定早熟禾属品种,而引物组合cAs5F/cAs5R只在羊茅属和黑麦草属中有扩增。本研究结果表明,通过AsEXP1基因片段序列多样性分析,可以较好的鉴别常见草坪草品种的种属亲缘关系,确定不同种属间的进化路线,为有效利用草坪草种质资源并进行分子育种提供理论依据。; 徐倩徐筱白晨喜王署辉徐吉臣; 关键词：草坪草分子标记

12个草地早熟禾品种愈伤组织诱导体系的研究被引量：4: 2012年; 以生产中常见的12种草地早熟禾(Poa pratensis L.)成熟种子为外植体,对其愈伤组织诱导及愈伤组织增殖生长体系进行了优化试验.结果表明,在愈伤组织诱导试验中,单纯使用2,4-D时,不同品种愈伤组织诱导率在60%～93%之间,2,4-D质量浓度3 mg/L时12个早熟禾品种的愈伤组织诱导率均值最高,达到86%;在2,4-D基础上添加少量6-BA(0.1～0.2 mg/L)后,不同品种愈伤组织诱导率在30%～92%之间,12个品种的愈伤组织诱导率均值有所降低(3.1%～25.4%).在愈伤组织增殖试验中,单纯使用2,4-D时,不同品种愈伤组织增殖率在38%～164%之间,12个早熟禾品种的愈伤组织增殖率均值在3 mg/L 2,4-D时最高,达到81%;在3 mg/L 2,4-D基础上施加少量的6-BA(0.05～0.2 mg/L)后,愈伤组织增殖率均值有所降低,但存在品种的差异性.研究结果还显示,热激处理对部分草地早熟禾愈伤组织诱导及增殖有一定的促进作用.; 代亮柳玉霞刘洁李昊阳王晓桐徐吉臣; 关键词：草地早熟禾愈伤组织诱导增殖率

单基因型匍匐翦股颖茎段的愈伤组织诱导和植株再生被引量：1: 2016年; 为建立匍匐翦股颖愈伤组织再生体系,通过种子愈伤组织诱导和再生实验,筛选出克隆系Penn A4-1。进一步以克隆系的茎段为材料,建立了高效稳定的单一基因型Penn A4-1愈伤组织诱导和再生体系。愈伤组织诱导和愈伤组织增殖的最适培养基均为MS+1 mg/L 2,4-D,出愈率和增殖率分别达到91.67%和169.25%;愈伤组织分化的最适培养基为MS+2 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,分化率达到52.38%。高效愈伤组织再生体系的建立,为匍匐翦股颖品种Penn A4持续稳定的基因工程研究奠定了重要的基础。; 刘海珍施杨梁中银支俊凯徐吉臣; 关键词：匍匐翦股颖基因型茎段愈伤组织

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北京市自然科学基金(5112015)