国家自然科学基金(30240054)
- 作品数：6 被引量：24H指数：3
- 相关作者：凌均棨麦穗赵玮玮刘红艳刘建伟更多>>
- 相关机构：中山大学深圳市人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 携带防龋基因质粒pROSB转化番茄植株被引量：4
- 2006年
- 目的:将携带有编码嵌合体SBR-CTΔA1基因和bar基因的片段转入番茄,获得转基因番茄植株。方法:将含有携带编码嵌合体SBR-CTΔA1基因和bar基因片段的重组质粒pROSB经冻融法转化入农杆菌LBA4404,用叶盘转化法将重组农杆菌AT-RSB转化番茄子叶,得到转基因番茄株,用PCR及RT-PCR鉴定转化株。结果:获得经卡那霉素筛选的转基因株,PCR及RT-PCR均扩增出1.9kb片段。结论:获得含嵌合体SBR-CTΔA1和bar基因的转基因番茄株,为可食用防龋疫苗的研究提供实验基础。
- 麦穗凌均棨赵玮玮刘红艳
- 关键词：番茄农杆菌
- 转基因番茄可食用防龋疫苗免疫BALB/c鼠的实验初探被引量：11
- 2007年
- 目的:观察转基因番茄可食用疫苗的免疫原性和免疫反应性。方法:将60只60 d龄的雌性BALB/c小鼠随机分为4组,分别口服或腹膜下注射转基因番茄或对照番茄。35 d后取小鼠血清样本,用ELISA的方法检测其血清样本中的抗变形链球菌PAc的IgG抗体效价。结果:口服和腹膜下注射转基因番茄组小鼠的血清中均出现了抗PAc的IgG抗体,分别与对照组相比具有统计学差异(P<0.05),且口服转基因番茄组与注射转基因番茄组的小鼠血清抗体水平无统计学差异(P>0.05)。结论:转基因番茄所表达的外源蛋白具有抗原性,能够诱导实验动物产生免疫应答。
- 郑雨燕凌均棨麦穗
- 关键词：转基因番茄BALB/C鼠
- 变形链球菌表面蛋白多肽片段在转基因番茄中的表达被引量：6
- 2007年
- 目的在获得含编码变形链球菌表面蛋白唾液粘附区片段基因的转基因番茄原代种子的基础上,应用分子生物学的方法检测外源基因在转基因植株中的表达。方法用CTAB法提取子代番茄总DNA,PCR筛选含变形链球菌PAc基因唾液粘附区片段的转基因番茄子代植株;用Trizol提取番茄总RNA,RT-PCR检测外源基因的转录情况;提取番茄果实总蛋白,用Bradford法测定番茄果实总蛋白含量;通过Western blot检测外源蛋白的表达情况,并用ELISA法对外源蛋白含量进行定量测定。结果获得植物细胞染色体上整合有外源基因并发生表达的转基因番茄子代植株;Western blot和ELISA分析表明含编码变形链球菌表面蛋白唾液粘附区片段基因的转基因番茄子代植株能有效表达外源蛋白,该蛋白含量占番茄可溶性总蛋白的1.2%。结论含编码变形链球菌表面蛋白唾液粘附区片段基因的转基因番茄子代植株能有效表达外源蛋白。
- 郑雨燕凌均棨麦穗
- 关键词：转基因番茄基因表达
- 可生物降解聚合物载体微球口服防龋疫苗免疫效果被引量：3
- 2007年
- 【目的】以PAc多肽(301～319)作为抗原,PBLG-PEG-PBLG做载体制备防龋微球疫苗,口服免疫SD大鼠,观察其对变链菌在大鼠牙面的黏附及对龋病发生的影响效果。【方法】28只出生30d的雄性SD大鼠随机分成4组建立龋模型,对各组大鼠口腔中变链菌的黏附菌落计数,根据Keyes评分标准做龋齿记分。【结果】PAc多肽抗原微球疫苗口服组的变形链球菌数为(13.2±8.16)×104CFU/ml;磨牙龋齿Keyes计分为31.8±6.77,均显著低于对照组(P<0.01)。【结论】口服PAc多肽抗原微球防龋疫苗均能减少龋模型大鼠龋齿的发生,以光滑面龋的减少更显著。
- 刘建伟凌均棨
- 关键词：龋病变形链球菌
- 嵌合体SBR-CT^(ΔA1)植物表达质粒的构建被引量：2
- 2003年
- 目的 构建含编码嵌合体SBR_CTΔA1 基因的植物表达质粒。方法 用PCR扩增的含编码嵌合体SBR_CTΔA1 基因的P2片段 (34 98～ 5 378bp) ,经TA克隆与pGEM_easy载体结合得到pTSC质粒 ,pTSC质粒经BamHⅠ和KpnⅠ双酶切后得到P2片段 ,P2片段与BamHⅠ和KpnⅠ双酶切后的植物高效表达质粒pPOKⅡ定向克隆 ,构建pROSC表达质粒 ;且将此质粒与bar基因 (抗除草剂基因 )连接 ,构建重组质粒pROSB ,并经酶切电泳及DNA序列测定鉴定。结果 含编码嵌合体SBR_CTΔA1 基因的P2片段整合到pPOKⅡ的适当部位 ,插入相位正确 ,未改变目的基因的阅读框架 ;从pBARGUS分离出的bar基因整合到pROSC ,构成重组质粒pROSB。结论 本实验成功构建了携带编码嵌合体SBR_CTΔA1 基因的植物表达质粒pROSC和pROSB。
- 麦穗凌均棨
- 关键词：嵌合体龋病
- 果实特异性启动子驱动的含sbr基因植物高效表达载体的构建被引量：2
- 2005年
- 目的构建果实特异性启动子驱动的含编码变形链球菌唾液粘附区(sbr)植物表达载体,进一步提高外源目的基因的表达,为研制有效的转基因植物防龋疫苗打下基础。方法提取番茄基因DNA,利用PCR技术扩增果实特异性启动子E8和2A11基因,双酶切质粒PROP及PROSC,分别与目的基因连接,构建重组植物表达载体。结果通过双酶切鉴定,目的基因片段已正确整合到植物表达载体中。结论本实验成功构建了果实特异性启动子驱动的含sbr基因的植物表达载体。
- 赵玮玮凌均棨杨国平
- 关键词：果实特异性启动子植物表达载体
