中央高校基本科研业务费专项资金(KYZ201312)
- 作品数：4 被引量：13H指数：3
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- T-RFLP分析厌氧真菌传代频率对共存产甲烷菌菌群的影响被引量：5
- 2015年
- 【目的】建立瘤胃产甲烷菌T-RFLP多样性分析方法,并研究厌氧真菌与产甲烷菌共培养液在不同时间传代对共存产甲烷菌菌群的影响。【方法】利用产甲烷菌mcrA基因特异性引物PCR扩增后,选择合适内切酶对扩增产物进行内切,分析内切后末端片段长度多态性,测定共培养液在不同传代频率时共存产甲烷菌多样性的变化。【结果】利用MspI内切酶分析发现,末端片段长度约为470bp的产甲烷菌为共培养液中的优势甲烷菌,共培养液传代至第15代时,片段长度约为130bp和200bp的产甲烷菌也成为共培养中的优势菌株;比较发现,TaqI能更好地内切共培养液中甲烷菌mcrA基因序列,瘤胃内容物及3d传代共培养液中产甲烷菌主要为末端片段长度约为70、100、200、270、300、330和470bp的菌株,共培养液在体外传代培养过程中,末端片段长度约为70、100、270和470bp的产甲烷菌变化更为显著。TaqI比较分析不同传代频率(3、5和7d)对共培养液中产甲烷菌菌群结构的影响表明,3d传代的共培养液中产甲烷菌菌群与瘤胃内容物较为相似,而5d和7d传代的共培养液中产甲烷菌菌群间差异较小,但与瘤胃内容物差异较大,导致不同传代频率的共培养液中产甲烷菌菌群间显著差异的最主要菌株为末端片段长度约为100bp的产甲烷菌,其次为末端片段长度约为70bp和270bp的产甲烷菌。【结论】利用建立的快速可行的瘤胃产甲烷菌T-RFLP方法分析表明,传代频率显著影响厌氧真菌与产甲烷菌共培养液中产甲烷菌的菌群结构,3d传代共培养液内产甲烷菌菌群与瘤胃内容物更相似。
- 李袁飞成艳芬朱伟云
- 关键词：厌氧真菌产甲烷菌
- 高效液相色谱法研究甲烷菌共存对厌氧真菌葡萄糖代谢的影响
- 本试验旨在利用高效液相色谱建立一种能够快速检测厌氧真菌代谢产物中6种有机酸(甲酸、乳酸、乙酸、a-酮戊二酸、柠檬酸和琥珀酸)的方法,并利用该方法研究厌氧真菌发酵上清液中6种有机酸的代谢情况以及甲烷菌共存对厌氧真菌葡萄糖代...
- 李袁飞成艳芬朱伟云
- 关键词：高效液相色谱法有机酸厌氧真菌甲烷菌共培养
- 文献传递
- 动态发酵研究甲烷菌共存对厌氧真菌葡萄糖代谢产物的影响
- 本试验旨在探究甲烷菌共存对厌氧真菌葡萄糖代谢产物的影响。试验菌株为本实验室从山羊瘤胃液中分离得到的厌氧真菌和甲烷菌共培养。其中厌氧真菌为Piromyces属,甲烷菌为Methanobrevibacter属。试验分为两个组...
- 李袁飞成艳芬朱伟云
- 关键词：厌氧真菌共培养葡萄糖苹果酸甲烷菌
- 文献传递
- 高效液相色谱法研究瘤胃甲烷菌共存对厌氧真菌代谢产生有机酸特性的影响被引量：5
- 2017年
- 本试验旨在利用建立的高效液相色谱法研究瘤胃甲烷菌共存对厌氧真菌代谢产有机酸特性的影响。根据6种有机酸的化学特性确定紫外检测波长、缓冲液浓度、p H、流速、柱温和进样量等液相色谱条件;利用建立的高效液相色谱法检测厌氧真菌纯培养及厌氧真菌与甲烷菌共培养上清液中6种有机酸的含量。结果表明,高效液相色谱采用的条件为:5 mmol/L磷酸二氢钾-磷酸缓冲液(p H=2.4)作为流动相,流速为0.5 m L/min,柱温25℃,进样量为20μL,214 nm波长检测。6种有机酸能够在30 min内得到良好分离。各种有机酸的线性相关系数均大于0.999,检测限为0.20~1.00μmol/L,定量限为0.667~3.333μmol/L,回收率为92.17%~101.61%。甲烷菌共存影响了厌氧真菌的代谢产物。厌氧真菌利用葡萄糖的主要水溶性代谢产物为甲酸、乳酸、乙酸,以及微量琥珀酸、柠檬酸、α-酮戊二酸及乙醇;甲烷菌共存显著降低了上清液中甲酸和乳酸的含量(P<0.05),显著增加了乙酸含量(P<0.05)。综上,本试验利用建立的高效液相色谱法可快捷、灵敏、有效地检测厌氧真菌代谢葡萄糖产生的6种有机酸的含量,并发现甲烷菌共存显著促进了厌氧真菌氢化酶体对碳水化合物的代谢。
- 李袁飞孙美洲成艳芬朱伟云
- 关键词：高效液相色谱法有机酸厌氧真菌甲烷菌共培养
- 共存甲烷短杆菌Methanobrevibacter thaueri F1提高梨囊鞭菌Piromyces sp.F1对硝呋烯腙的耐受性被引量：1
- 2018年
- 【背景】硝呋烯腙能够抑制厌氧真菌。共存甲烷菌可以促进厌氧真菌的生长以及对木质纤维素的降解,然而关于共存甲烷菌对厌氧真菌抗逆性影响的研究较少。【目的】旨在研究甲烷菌共存对厌氧真菌耐受硝呋烯腙的影响。【方法】采用体外批次培养,以稻草为底物,添加不同浓度的硝呋烯腙(0、5、10、25 mg/L),分别接种厌氧真菌纯培养和厌氧真菌与甲烷菌共培养悬浮液,于39°C静置培养96 h。测定不同时间点的产气量和甲烷产量,结束后测定p H、干物质降解率(DMD)、中性洗涤纤维消失率(NDFD)、半纤维素消失率(ADSD)、酸性洗涤纤维消失率(ADFD)以及上清液中甲酸、乳酸和乙酸的浓度。【结果】添加5、10和25 mg/L硝呋烯腙皆显著降低了厌氧真菌纯培养的发酵活性(P<0.05);添加5 mg/L硝呋烯腙没有显著降低厌氧真菌与甲烷菌共培养的发酵活性(P>0.05),添加10和25 mg/L硝呋烯腙则显著降低了共培养发酵活性(P<0.05);比较5、10 mg/L硝呋烯腙对纯培养和共培养发酵活性影响的结果表明,共培养发酵活性显著高于纯培养发酵活性(P<0.05)。【结论】硝呋烯腙对厌氧真菌纯培养和厌氧真菌与甲烷菌共培养的抑制作用都存在剂量效应,在一定添加浓度范围内(<25 mg/L),甲烷菌共存可以显著提高厌氧真菌对硝呋烯腙的耐受性。
- 李袁飞成艳芬朱伟云
- 关键词：厌氧真菌甲烷菌共培养稻草硝呋烯腙
- 瘤胃降解粗纤维产甲烷的厌氧真菌与甲烷菌共培养物的分离鉴定被引量：5
- 2014年
- 【目的】本试验从瘤胃中分离鉴定降解粗纤维产甲烷的厌氧真菌与甲烷菌共培养物,为深入探究甲烷菌对厌氧真菌代谢途径的影响及相关调节机制奠定基础。【方法】利用厌氧滚管技术从荷斯坦奶牛瘤胃内容物中分离厌氧真菌与甲烷菌共培养物,通过形态学观察和DAPI染色以及甲烷菌16S rRNA基因序列分析方法分别对厌氧真菌及甲烷菌进行鉴定。【结果】从荷斯坦奶牛瘤胃中共分离到28株厌氧真菌与甲烷菌共培养物。共培养物中的厌氧真菌均为单中心菌株,分别属于Piromyces,Neocallimastix和Caeomyces属,所占百分比为53.57%,42.86%及3.57%。甲烷菌16S rRNA基因序列分析结果表明,共培养物中的甲烷菌均为甲烷短杆菌。本研究共获得四种不同的厌氧真菌与甲烷菌组合,分别为Piromyces/类Methanobrevibacter olleyae菌株,Neocallimastix/类Methanobrevibacter olleyae菌株,Neocallimastix/类Methanobrevibacter thaueri菌株及Caecomyces/类Methanobrevibacter olleyae菌株,分别占总数的53.57%,39.29%,3.57%及3.57%。【结论】分离得到的28株厌氧真菌和甲烷菌共培养物中,占优势的为具有丰富丝状假根的厌氧真菌Piromyces和Neocallimastix以及类Methanobrevibacter olleyae属的甲烷短杆菌。本研究为进一步研究瘤胃内厌氧真菌与甲烷菌相互代谢关系奠定基础。
- 孙美洲金巍李袁飞毛胜勇成艳芬朱伟云
- 关键词：厌氧真菌甲烷菌共培养
