北京市自然科学基金(7112019)
- 作品数:7 被引量:176H指数:5
- 相关作者:孙红妹薛冠华李少丽闫超冯燕玲更多>>
- 相关机构:首都儿科研究所首都儿科研究所附属儿童医院更多>>
- 发文基金:北京市自然科学基金吴阶平医学基金会临床科研专项资助基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 肺炎支原体快速液体培养法的评价和存在的问题被引量:16
- 2016年
- 肺炎支原体( Mycoplasma pneumoniae, Mp)是引起儿童呼吸道感染的重要致病菌之一,临床症状可从轻微的咽炎、支气管炎到重症肺炎,严重感染可导致死亡[1]。北京地区2007年及2012年均出现Mp地区性流行[2-3]。 Mp感染患者的早期临床表现很难与病毒或细菌感染引起的呼吸道感染相区分,从而延误治疗,导致重症肺炎和肺外并发症的发生。因此,快速准确的实验室诊断极为重要。
- 赵汉青闫超孙红妹冯燕玲薛冠华李少丽
- 关键词:肺炎支原体MYCOPLASMA呼吸道感染早期临床表现重症肺炎肺外并发症
- 肺炎支原体P1黏附因子主要抗原表位的表达及其临床应用研究被引量:2
- 2011年
- 目的探索肺炎支原体(Mycoplasmapneumoniae,Mp)P1蛋白作为抗原成分在临床血清抗体检测中的应用。方法通过生物信息学分析P1基因主要抗原决定簇,选择其分值较高的部位进行原核表达、纯化,并进行Westernblot鉴定,用纯化后的蛋白免疫小鼠,评价其免疫原性,同时用其作为抗原,采用ELISA方法检测肺炎支原体患儿血清抗体并与全菌体抗原进行比较。结果成功构建了pET-28C.P1-534原核表达载体,经表达、纯化后获得了相对分子质量为26×10^3的融合蛋白;Westernblot检测其能与坳阳性血清发生特异性反应;利用纯化的重组蛋白免疫小鼠,能诱导小鼠产生特异性免疫应答,抗体滴度可达1:2000;用此蛋白作为抗原成分检测患儿血清,其敏感性和特异性分别为85.00%及97.67%。结论重组表达的P1—534蛋白具有良好的免疫原性,作为新的抗原成分其敏感性和特异性优于全菌体抗原,为肺炎支原体抗原成分及其蛋白保护作用的研究奠定了基础。
- 薛冠华孙红妹赵汉青王洛平冯燕玲李少丽
- 关键词:肺炎支原体黏附蛋白抗原表达纯化免疫原性
- 2010-2012年北京地区儿童肺炎支原体流行基因型监测被引量:22
- 2012年
- 目的对肺炎支原体(Mp)的暴发流行进行监测。方法采用real—timePCR法对北京地区呼吸道感染患儿进行检测;阳性标本进行M—P基因分型[M:多位点可变数目串联重复序列分析(blLVA);P:P1-限制性片段长度多态性(P1.RFLP)]分析。结果2010年1月—2012年5月446例呼吸道感染患儿中,69例经real-timePCR检测为阳性,2010、2011及2012年上半年的感染率分别为:11.69%、15.56%及20.00%;采用我们提出的新的M-P基因分型系统,69例标本可分为11个基因型,其中M43562P1和M53562P1为2010至2011年两个主要基因型;M33562P1和M63562P1在2012年有感染上升趋势。结论在本次国际Mp流行中,北京地区2011年肺炎支原体感染率也有所增加,主要基因型为b143562P1和M53562PI;其中M43562与欧洲流行基因型相同,M53562与以色列流行基因型相同。M-P基因分型系统,可以很好地监测世界不同地区肺炎支原体流行情况。
- 孙红妹薛冠华闫超冯燕玲王丽琼赵汉青李少丽曹玲
- 关键词:肺炎支原体基因分型
- 肺炎支原体主要黏附蛋白的研究进展被引量:5
- 2014年
- 肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)可引起呼吸道感染,是儿童社区获得性肺炎的常见致病菌,并且可导致多系统并发症。Mp尖端的黏附蛋白复合体与肺纤毛上皮细胞的黏附过程是其主要致病机制。P1、P30、P116等蛋白作为黏附复合体的主要成分,在感染过程中起到了关键作用。在缺失这些蛋白的突变株中,细胞结构异常,黏附能力、运动速度、致病性均表现出不同程度的下降。由于Mp生长缓慢,对营养要求苛刻,常规微生物分离培养不适用于临床快速诊断,目前亚洲地区Mp耐药率居高不下,Mp感染后又无特异性临床症状,使得临床工作中Mp感染的诊治常被延误。重组蛋白表达技术的出现,使得Mp主要蛋白可以应用在Mp诊断试剂盒和疫苗研发中,本文针对Mp主要黏附蛋白的基因结构、致病机制及其应用方面的最新研究进展进行综述。
- 王丽琼薛冠华李少丽闫超孙红妹
- 关键词:肺炎支原体黏附蛋白血清学诊断疫苗
- 肺炎支原体直接损伤及其免疫学致病机制研究进展被引量:72
- 2015年
- 肺炎支原体( Mycoplasma pneumoniae,Mp)是儿童社区获得性肺炎的主要病原体,20%-40%的儿童呼吸道感染是由Mp感染所致[1]。 Mp除可引起肺炎支原体肺炎( Mycoplasma pneumoniae pneumonia,MPP)、咽炎等呼吸系统疾病之外,还可导致皮肤损害、免疫性溶血性贫血、支原体脑炎、心肌炎等多系统的肺外并发症。近年来MPP发病率逐年上升,尤其是抗大环内酯类Mp的出现,
- 孙红孙红妹
- 关键词:肺炎支原体肺炎MYCOPLASMA致病机制免疫学PNEUMONIA免疫性溶血性贫血
- 应用套式PCR提高肺炎支原体P1-RFLP基因分型检测敏感性被引量:5
- 2014年
- 目的探索一种适用于临床标本检测的肺炎支原体套式PCR.P1一RFLP基因分型方法并对其应用进行评价。方法参考肺炎支原体标准株P1基因RepMp4及RepMp2/3序列,分别在两个序列内部设计4条内套引物,采用文献报道的外套引物及新设计内套引物进行套式PCR扩增,扩增产物混合后用HaeⅢ酶切,根据不同的酶切图谱结果判断其型别,同时采用测序验证;对标准株DNA及临床标本DNA倍比稀释后进行检测,验证新改良方法敏感性;收集2012年肺炎支原体感染阳性标本,采用研究新改良的方法进行分型检测并与现有方法进行比较。结果经测序验证,以套式PCR为基础的P1-RFLP基因分型方法能够对临床标本进行很好的扩增;与现有的分型方法相比,新改良方法敏感性提高10^3倍,差异有统计学意义;北京地区2012年儿科肺炎支原体流行基因型为I型。结论套式PCR—P1-RFLP基因分型方法敏感性高,能够对临床标本进行很好的扩增。
- 薛冠华王丽琼闫超冯燕玲赵汉青李少丽孙红妹
- 关键词:肺炎支原体基因分型套式PCR
- Surveillance of Mycoplasma pneumoniae infection among children in Beijing from 2007 to 2012被引量:61
- 2014年
- Zhao HanqingLi ShaoliCao LingYuan YiXue GuanhuaFeng YanlingYan ChaoWang LiqiongFan ZhaoyangSun Hongmei
- 关键词:支原体感染巢式聚合酶链反应大环内酯类琼脂糖凝胶电泳GENBANK