河南省高等学校青年骨干教师资助计划项目(2005461)
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
- 相关作者：杭柏林王青胡建和王三虎李任峰更多>>
- 相关机构：河南科技学院新乡市畜产品质量监测检验中心河南师范大学更多>>
- 发文基金：河南省高等学校青年骨干教师资助计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学理学更多>>
- 猪瘟野毒与疫苗弱毒鉴别方法的研究进展被引量：1
- 2011年
- 概述了当前鉴别猪瘟强弱毒的几种方法,即免疫学方法(胶体金免疫层析技术、单克隆抗体法和单抗-酶联免疫吸附试验)、核酸检测方法(RT-PCR技术、RT-PCR与其他方法的结合)和动物试验方法。同时提出了鉴别猪瘟强弱毒方法的发展方向。
- 杭柏林胡建和王青史杰李杰朱王飞
- 关键词：猪瘟病毒野毒弱毒
- 新城疫病毒核衣壳蛋白基因在大肠埃希菌中的表达、纯化及其活性分析被引量：2
- 2013年
- 构建新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)核衣壳蛋白(nucleocapsid protein,NP)基因的原核表达载体,并将其在宿主菌E.coli BL21(DE3)感受态细胞中表达。以NDV La Sota株NP基因序列为模板,设计特异性引物,通过PCR扩增获得NP蛋白全长基因片段,定向插入原核表达载体pET-30a,构建重组质粒pET-NDV NP;将构建的重组质粒转化宿主菌E.coli BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导,表达出目的蛋白,并采用亲和层析的方法纯化表达蛋白;表达蛋白采用Western blotting方法检测其反应原性。结果显示,成功克隆了新城疫病毒NP基因全长,片段序列1470bp;构建的pET-NDV NP载体经PCR、双酶切、测序鉴定均无误;转化表达宿主菌后经SDS-PAGE检测结果显示目的基因得到成功表达,且表达蛋白经Ni-NTA镍离子亲和层析法被成功纯化,蛋白质浓度为3mg/mL;Western blotting检测结果显示表达蛋白具有良好的反应原性。试验结果表明,成功构建了含有新城疫病毒核衣壳蛋白基因的原核表达载体,成功表达、纯化得到了NDV NP蛋白。
- 徐彦召王青杭柏林尚田田赵志雨胡建和
- 关键词：新城疫病毒NP蛋白纯化
- 鞅空间上加权不等式的外推
- 2006年
- 在鞅空间上对Ap权理论中的外推定理加以讨论,主要证明了加权意义下,若次线性算子T是鞅空间Lp0(ωdμ)上的强(弱)有界算子,那么对任意的p,1
- 左红亮刘培德
- 关键词：外推鞅不等式
- 猪瘟强弱毒鉴别多重RT-PCR方法的建立及应用被引量：7
- 2008年
- 【目的】建立一种能够应用于临床样本猪瘟病毒(CSFV)检测的快速、简便且标准化程度高的检测技术,以满足畜牧业生产和兽药市场的需求。【方法】根据GenBank中猪瘟病毒及近源病毒的基因组全序列,选择特异保守区域设计了2对猪瘟病毒引物,借助3′端引物碱基错配对PCR扩增效率的影响,优化筛选了能够鉴别猪瘟兔化弱毒疫苗和强毒疫苗的PCR退火温度,经多重试验组合建立了一套鉴别猪瘟强毒和弱毒的多重RT-PCR鉴别诊断方法。【结果】扩增反应条件的确定试验表明,退火温度为55℃;特异性分析表明,从弱毒C株和石门强毒株的基因组中分别扩增出1条大小为492和178 bp的特异性片段,从强弱毒株混合物中1次扩增出2条大小为492和178 bp的特异性片段,检测不到伪狂犬病病毒的RNA;敏感性分析表明,该方法能检测出0.8 pg的猪瘟病毒RNA;应用试验表明,8份疑似猪瘟病料中5份为强毒感染,2份为弱毒感染,1份为弱毒和强毒的混合感染。【结论】研究建立的多重RT-PCR方法具有敏感性、特异性强、重复性好的特点,对养猪业的发展具有十分重要的意义。
- 胡建和杭柏林王青李任峰刘兴友王三虎
- 关键词：猪瘟病毒
