国家自然科学基金(81171171)
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
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- LINGO-1基因沉默对自身免疫性脑脊髓炎小鼠运动功能的影响被引量：1
- 2015年
- 目的 探讨沉默LINGO-1基因表达对自身免疫性脑脊髓炎（EAE）小鼠运动功能的影响.方法 通过MOG35-55诱导雌性C57/BL6小鼠建立EAE小鼠模型.将EAE小鼠（105只）完全随机分为5组：A组（21只）：侧脑室注入5μl滴度为5×109 Tu/ml编码LINGO-1shRNA的慢病毒载体（LV/LINGO-1-shRNA）;B组（21只）：侧脑室注入5μl滴度为5×10s Tu/ml LV/LINGO-1-shRNA;C组（21只）：侧脑室注入5μl滴度为5×107 Tu/ml LV/LINGO-1-shRNA;D组（21只）：侧脑室注入5μl无义序列的LVCON053;E组（21只）：未治疗组.动态观察干预后不同时间点小鼠神经功能评分情况及LINGO-1蛋白表达水平,并行髓鞘快蓝染色了解各组髓鞘脱失情况.结果 侧脑室注射LV/LINGO-1-shRNA组EAE小鼠脑组织内LINGO-1蛋白表达从干预后第7天起可见明显下调,其中以B组和C组下调最明显（1.99±0.13,2.08±0.10,P＜0.05,P＜0.01）.从第7天开始,相比较于D组和E组,A组、B组和C组运动功能评分有不同程度地下降[（3.11 ±0.13）分,（2.42 ±0.13）分,（2.96 ±0.10）分比（3.56 ±0.15）分,（3.87 ±0.12）分,P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05].30 d时A组和B组髓鞘密度明显高于未治疗组（0.72±0.09,0.83 ±0.11比0.56±0.10,P＜0.05,P＜0.01）.结论 侧脑室注射LV/LINGO-1 shRNA是一种沉默EAE小鼠脑内LINGO-1表达的有效方式.LINGO-1下调可改善EAE小鼠运动功能及促髓鞘修复,但效果并不随LV/LINGO-1-shRNA剂量增加而增强.
- 郭守刚张杰汪春娟杜怡峰
- 关键词：实验性自身免疫性脑脊髓炎LINGO-1基因沉默髓鞘
- NT-3基因修饰OECs-NSCs-复合细胞支架自体移植治疗脑出血的实验研究被引量：2
- 2014年
- 目的 观察神经营养因子-3（NT-3）基因修饰嗅鞘细胞-神经干细胞（OECs-NSCs）复合细胞支架自体移植对脑出血大鼠运动功能的影响.方法 建立Wistar大鼠尾状核脑出血模型,完全随机化分为A组：NT-3基因修饰的OECs-NSCs-复合细胞支架移植组;B组：NT3-OECs-NSCs-复合细胞移植组;C组：支架移植组;D组：空白对照组.各组移植后第1、3、7、14和30天进行运动神经功能评分,并经免疫组织化学染色及荧光染色鉴定移植细胞在大鼠脑内的生存、分布及分化情况.结果 A、B组在移植后第7、14、30天神经功能评分分别为（2.12 ±0.12、1.50±0.11、0.52±0.08）、（2.10±0.16、1.79±0.09、0.91±0.10）明显低于C、D组;C组与D组间差异无统计学意义（P＞0.05）.在第14天和第30天,A组评分明显低于B组（P ＜0.05,P＜0.01）.免疫组织化学方法证实A组移植后存活的NSCs数量较多、向损伤区迁徙的细胞较多.结论 NT-3基因修饰OECs-NSCS-复合细胞支架移植治疗能显著改善脑出血大鼠的运动功能,且移植的NSCs具有较强的存活、迁移及分化能力.
- 汪春娟杨锦珊林华伟付佩彩郭守刚唐荣华
- 关键词：嗅鞘细胞脑出血神经营养因子-3
- 自身免疫性脑脊髓炎小鼠脑内LINGO-1的表达被引量：4
- 2014年
- 目的观察自身免疫性脑脊髓炎（EAE）小鼠发病后不同时间大脑组织中LINGO-1表达水平的变化。方法将C57／BL6小鼠完全随机化分为EAE模型组（15只）、佐剂组（15只）和对照组（15只），在发病第1、7、14、21、30天取大脑半球组织进行实时定量RT—PCR和Western印迹检测，观察LINGO-1的表达差异。同时应用Western印迹检测不同时间点RhoA、RhoA磷酸化形式（P—RhoA）的变化。结果EAE模型组小鼠发病后第1、7、14天LINGO-1mRNA表达水平是对照组的（4．63±0．25）、（2．72±0．12）和（1．98±0．16）倍（P〈0．01，P〈0．01，P〈0．05），至第30天时接近于对照组（P〉0．05）；模型组LINGO—1蛋白表达在发病后第1、7、14、21、30天分别为对照组的（2.11±0．15）、（3．15±0．09）、（2．45±0．12）、（1．89±0．17）和（1．21±0．05）倍（P〈0．05，P〈0．01，P〈0．05，P〈0．05，P〈0．05，P〈0．05）；模型组小鼠p-RhoA蛋白表达也呈上调趋势，在造模成功1、7d上调最明显（P〈0．01）。而RhoA蛋白的表达无明显变化。结论LINGO-1在EAE小鼠脑组织中表达上调并呈-定规律性改变，可能通过RhoA激活抑制髓鞘修复。临床上针对多发性硬化的LINGO-1阻断治疗应在发病后尽早进行。
- 汪春娟郭守刚屈传强张杰付佩彩唐荣华
- 关键词：多发性硬化
- NT-3基因修饰的嗅鞘细胞移植对自身免疫性脑脊髓炎大鼠神经修复及功能恢复的影响被引量：4
- 2015年
- 目的探讨神经营养因子-3（NT-3）基因修饰的嗅鞘细胞（OECs）对自身免疫性脑脊髓炎（EAE）大鼠神经修复及运动功能恢复的促进作用。方法构建Lewis大鼠EAE模型，采用完全随机化法分为对照组、OECs组及OECs-NT-3组，每组20只，分别将生理盐水、OECs、OECs-NT-3移植入大鼠侧脑室内，每日进行神经功能缺损评分（NDS）评估大鼠肢体功能恢复情况，应用免疫组织化学检测及辣根过氧化物酶（HRP）逆行示踪技术对EAE神经纤维修复进行形态学观察。结果细胞移植后，OECs-NT-3组大鼠神经功能评分明显低于OECs组，差异有统计学意义（P〈0．05）；第28天，大鼠体内OECs-NT-3存活数量较多，可向病灶远端扩散、迁徙；OECs-NT-3组单位面积内的神经纤维数目[第28天，（38．8±3．4）个]明显高于OECs组[第28天，（32．5±2．8）个]（P〈0．05）；OECs-NT-3组HRP标记的神经元数目多于OECs组，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论NT-3基因修饰的OECs可在EAE大鼠体内存活、迁移，并可促进神经纤维再生，减轻皮质神经元的逆行性损伤，改善EAE大鼠的运动功能。
- 郭守刚汪春娟董泗芹丛琳刘光云
- 关键词：神经营养因子3嗅鞘细胞脑脊髓炎自身免疫性
