辽宁省自然科学基金(20072201)
- 作品数：5 被引量：20H指数：3
- 相关作者：穆长征马云胜王征王亚光李晓龙更多>>
- 相关机构：辽宁医学院更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金辽宁省高校创新团队支持计划辽宁省教育厅基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胶原蛋白复合壳聚糖支架的制备及生物学性状:壳聚糖及胶原比例筛选被引量：9
- 2010年
- 背景:壳聚糖和胶原类支架已成为组织工程常用的载体材料。但是,现阶段如何能够通过调节二者比例而达到理想的细胞载体仍是目前需要解决的问题之一。目的:调节胶原与壳聚糖二者配制比例制备支架材料,检测及对比不同比例支架材料生物学性质。方法:制备1∶1,1∶2,1∶3,1∶4,1∶5比例的壳聚糖、Ⅰ型胶原蛋白成分,经紫外线交联后冷冻干燥,再将其用NAOH与蒸馏水进行中和,二次冻干制备好支架。观察不同比例支架的材料性质、孔隙率、降解率、溶胀率;扫描电镜观察孔径的大小及形态。结果与结论:在壳聚糖含量固定,支架的大体孔径经统计比较差异有显著性意义(P<0.05)。1∶3比例制备的孔径最大,达到(298.0±36.0)μm;支架总体的孔隙率为93.9%～97.5%,胶原比例的增加对支架孔隙率的影响较轻微。各组支架的溶胀率可达到80%左右,支架的溶胀程度随胶原比例增加而减少。在支架的降解率随着胶原比例增加而增加,而壳聚糖含量越高,降解速度越慢。结果证实,通过紫外光交联法,按照1∶3配比的胶原和壳聚糖的支架材料更加适合软骨组织工程的要求。
- 王征马云胜穆长征王亚光
- 关键词：壳聚糖胶原蛋白
- 人脐血CD44^+细胞的分离培养及其分化潜能的初步鉴定
- 2010年
- 目的分离培养人脐静脉血CD44+细胞,并且诱导其向骨、神经和脂肪组织分化。方法采集的脐血用免疫磁珠阳性筛选法分离CD44+细胞后进行培养。细胞分别行成骨、成神经和成脂诱导分化。观察细胞形态学特征,流式细胞仪检测细胞周期、免疫原性。免疫组化及蛋白印记法检测细胞分化蛋白表达。结果人脐血CD44+细胞贴壁生长,长梭形,传代后细胞增殖迅速。细胞表型为CD44+、CD29+、CD166+、CD34-。在成骨诱导后碱性磷酸酶染色阳性,Von-Kossa染色提示钙化结节形成。成神经诱导后Nestin、NSE、GFAP阳性;Tau和β-tubulin蛋白表达阳性。脂肪诱导后油红O染色阳性。结论脐血中可分离出CD44+细胞,体外诱导可向神经、骨和脂肪方向分化。
- 马云胜秦书俭穆长征
- 关键词：脐血CD44^+诱导分化种子细胞
- 海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠微囊内细胞浓度与胰岛素和C肽的释放被引量：4
- 2011年
- 背景:微囊化已经普遍应用于各种实验研究,微囊包裹的干细胞治疗糖尿病问题也成为当今的热点,但是囊内包裹的细胞浓度与胰岛素释放量的关系成为目前需要解决的问题之一。目的:运用海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠微囊包裹胰岛素产生细胞,观察细胞浓度对胰岛素和C肽释放情况的影响。方法:制备大鼠胰腺损伤提取物,将小鼠骨髓间充质干细胞诱导分化为胰岛素产生细胞。免疫荧光和双硫腙染色鉴定诱导后细胞内胰岛素的表达。然后将胰岛素产生细胞制成浓度分别为1×107L-1,5×107L-1,1×108L-1,5×108L-1,1×109L-1,5×109L-1的细胞悬液,气体吹喷法制成微囊,用6-羧基乙二酸荧光素检测囊内细胞活力,用葡萄糖刺激微囊内细胞检查其胰岛素和C肽的分泌情况。结果与结论:胰腺损伤提取物诱导后双硫腙染色和细胞免疫荧光鉴定出胰岛素产生细胞内有胰岛素的表达;胰岛素产生细胞制成的微囊直径约为400μm,大小均一,6-羧基乙二酸荧光素检测到囊内细胞的活力很好。用葡萄糖刺激不同细胞浓度的微囊,发现细胞浓度为1×108L-1时,胰岛素和C肽的分泌达到最高。
- 王雅光马云胜穆长征蔡红玉王征
- 关键词：微囊化骨髓间充质干细胞胰岛素产生细胞胰岛素C肽
- 软骨源形态发生蛋白基因转染自体骨髓间充质细胞修复关节软骨缺损被引量：1
- 2010年
- 背景:以支架或干细胞在一定程度上能够修复软骨缺损,但是研究中发现较大块的缺损修复效果还达不到令人满意的程度。基因转染后的干细胞能够不断的释放生长因子有可能够为软骨缺损研究带来突破。目的:进一步验证软骨源形态发生蛋白转染的骨髓间充质干细胞是否会促进体内兔软骨修复。方法:从兔骨髓内分离获得骨髓间充质干细胞,脂质体感染的方法将软骨源形态发生蛋白基因转染到骨髓间充质干细胞中。实验组移植转染后的细胞;单纯骨髓间充质干细胞组移植未转染的骨髓间充质干细胞;空白对照组缺损区不移植细胞。术后行组织学检测及组织学评分分析修复情况。结果与结论:体内修复过程中,软骨源形态发生蛋白转染的骨髓间充质干细胞促进了软骨再生。透明软骨填充了软骨缺损区,并且深部区域显示了软骨下成骨。透明软骨的重建区域优于单纯骨髓间充质干细胞移植组。组织学评分实验组高于骨髓间充质干细胞对照组和空白组。提示转染软骨源形态发生蛋白基因的骨髓间充质干细胞能够促进和提高关节软骨的改建和修复。
- 穆长征马云胜王征
- 关键词：软骨缺损骨髓间充质细胞软骨分化基因转染
- 胶原-壳聚糖支架材料与间充质干细胞的组织相容性被引量：7
- 2011年
- 背景:近年来一些研究发现胶原蛋白-壳聚糖复合支架材料可作为神经组织工程的支架材料,但相关细胞相容性研究较少。目的:观察兔骨髓间充质干细胞在胶原蛋白-壳聚糖复合支架材料表面生长及分化情况。方法:分离培养兔骨髓间充质干细胞,无血清培养液培养,流式细胞仪检查细胞表型;然后,将其接种到凝胶支架材料表面(实验组)及多聚赖氨酸包被的盖玻片表面(对照组),神经诱导培养基内培养,倒置相差显微镜观察干细胞的生长及分化情况。结果与结论:细胞表型为CD29+、CD44+、CD166+。倒置相差显微镜观察:实验组中,接种的骨髓间充质干细胞生长良好,7d后可见有突起神经细胞,细胞生长情况与对照组未见有明显差别。证实胶原蛋白-壳聚糖复合支架材料对骨髓间充质干细胞有良好细胞相容性。
- 李晓龙穆长征马云胜
- 关键词：胶原蛋白壳聚糖骨髓间充质干细胞组织相容性
