天津市应用基础与前沿技术研究计划(12JCQNJC07800)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：刘运德岳丹苑博张晓芳田芳更多>>
- 相关机构：天津医科大学天津医科大学总医院更多>>
- 发文基金：天津市应用基础与前沿技术研究计划国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- C1QBP在单核细胞THP-1趋化运动中的作用
- 2013年
- 目的探讨C1QBP在单核细胞THP-1中的表达及对细胞趋化运动的影响。方法利用siRNA干扰技术筛选C1QBP降表达的有效序列,趋化运动实验及肌动蛋白聚合实验检测C1QBP降表达对集落刺激因子(CSF-1)诱导的THP-1细胞趋化运动能力的影响;免疫共沉淀检测C1QBP与PKCζ的相互作用。结果利用siRNA干扰后,C1QBP表达明显下降;C1QBP表达降低后,CSF-1诱导的单核细胞的趋化运动和聚合能力明显降低(P<0.01);免疫共沉淀实验显示C1QBP与PKCζ可以相互作用。结论 C1QBP在CSF-1诱导的单核细胞的趋化运动中发挥重要作用,且可以与趋化运动相关的蛋白PKCζ相互作用。
- 岳丹苑博齐灿冯香梅刘运德王勇
- 关键词：趋化运动
- HABP1基因慢病毒干扰和表达载体的构建及表达被引量：2
- 2013年
- 目的构建慢病毒介导的透明质酸结合蛋白1基因(HABP1)干扰载体及表达载体,建立HABP1降表达及过表达的稳定肾癌细胞系786-0。方法合成人HABP1基因短发夹RNA(shRNA)干扰序列,与慢病毒载体pLKO.1-TRC连接产生重组质粒pLKO.1-shHABP1;双酶切质粒pCDNA3.1(-)-HABP1-Flag,将目的基因片段连接到pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro载体上,组成重组表达载体pCDH-HABP1;酶切鉴定及DNA测序后,转染293T细胞,收集慢病毒颗粒感染786-0细胞,嘌呤霉素筛选稳定细胞系,western blot验证HABP1蛋白的表达水平。结果构建成干扰载体pLKO.1-shHABP1及表达载体pCDH-HABP1;与随机序列对照组比较,pLKO.1-shHABP1转染的786-0细胞HABP1表达水平(0.30±0.01)明显降低(t=25.98,P<0.05),pCDHHABP1转染786-0细胞后,HABP1的表达水平(3.20±0.40)明显升高(t=10.34,P<0.05)。结论成功构建HABP1基因的干扰载体及表达载体,且786-0细胞可稳定降表达及过表达HABP1。
- 苑博张晓芳陈雅婧田芳闫雪苗刘运德岳丹
- 关键词：肾癌细胞慢病毒载体
