国家高技术研究发展计划(2001AA249030)
- 作品数：19 被引量：179H指数：10
- 相关作者：张改平王自良杨艳艳张海棠邓瑞广更多>>
- 相关机构：河南科技学院河南省农业科学院河南省动物免疫学重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生化学工程轻工技术与工程更多>>
- 苯巴比妥多克隆抗体的制备及其免疫学特性鉴定被引量：2
- 2006年
- 王自良王建华张海棠柴书军张改平
- 关键词：免疫学检测多克隆抗体苯巴比妥动物性食品毒性作用食品动物
- 磺胺类药物在饲料和畜产品中的残留、危害与检测被引量：17
- 2007年
- 药物性饲料添加剂的应用，造成畜产品中药物残留，从而造成的环境危害以及“三致”[致癌（Car-cinogenic effect）、致畸（Teratogenic effect）、致突变（Mutagenicity）]作用等已经成为人们关注的焦点问题。磺胺类药物作为应用广泛的抗菌素,由于其具有较强的抗细菌作用，常被用作饲料添加剂广泛地添加到畜禽饲料中，
- 刘庆堂职爱民邓瑞广张改平
- 关键词：饲料添加剂磺胺类药物药物残留环境危害畜产品
- 猪旋毛虫病快速检测试纸条的研制及特性测定被引量：22
- 2004年
- 以旋毛虫重组分泌(excretingsecretion,ES)抗原为基础,采用免疫金技术成功研制出旋毛虫病快速检测试纸条,试验结果显示试纸条与猪肺线虫、猪囊尾蚴、猪细颈囊尾蚴、猪米氏住肉孢子虫、猪蛔虫无交叉反应。证明旋毛虫病试纸条具有良好的特异性和敏感性,其敏感性与ELISA相当,与ELISA及消化法的检测结果符合率为100%。5min内肉眼观察获得结果,具有特异、敏感、快速、简单等特点,不需要任何专业技能和其他试剂。本方法的建立对猪旋毛虫病诊断和流行病学调查具有很大的应用价值。
- 李学伍张改平邓瑞广肖治军杨艳艳李青梅
- 关键词：旋毛虫病快速检测试纸条特异性敏感性流行病学调查
- 氯霉素单克隆抗体免疫金标快速检测试纸的研制及性能测定被引量：15
- 2006年
- 以分泌抗氯霉素单克隆抗体(CAP mAb)杂交瘤细胞株的建立为基础,应用胶体金免疫层析试验(GICA)成功研制出CAP残留快速检测试纸(CAP_Strip),并对其性能进行了测定。结果表明,CAP_Strip的标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,目测检测限为0.5μg/L;与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应为160%,与其他酰胺醇类和抗菌药物无交叉反应;其敏感性与竞争ELISA试剂盒相当,符合率为100%;10 min内显示结果,具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合CAP残留快速检测的推广应用。
- 王自良张改平杨艳艳张海棠杨继飞刑广旭柴书军
- 关键词：氯霉素单克隆抗体快速检测试纸
- 抗氯霉素单克隆抗体杂交瘤细胞株的筛选及金标试纸检测方法的建立被引量：15
- 2006年
- 以BSA-CAP-HS免疫Balb／C小鼠,用细胞融合技术筛选抗氯霉素单克隆抗体(CAP mAb)杂交瘤细胞,体内诱生腹水法制备cAP mAb,并鉴定其免疫学特性;依据胶体金免疫层析试验(GICA)原理,以CAP mAb 为金标抗体,研制CAP残留快速检测金标试纸(CAP-Strip),并对其性能进行测定。结果表明,筛选出了3株杂交瘤细胞,其中最好的4F9-B2株间接ELISA效价细胞培养上清为1:1 280,腹水为1:640 000,亲和常数(Ku)为 1．84×1010 L/mol,对CAP的半数抑制浓度(IC50)为0．88μg/L,与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应(CR%)为150%,与其他酰胺醇类和抗菌素类药物无交叉反应;CAP-Strip的标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit拟合曲线,目测检测限为0．5μg/L;其敏感性与竞争ELISA试剂盒相当,符合率为100％;可见CAP-Strip具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合于CAP残留的快速检测,具有较高的推广应用价值。
- 王自良王建华杨艳艳杨继飞张海棠范国英张改平
- 关键词：氯霉素细胞融合单克隆抗体快速检测试纸
- 莱克多巴胺的毒性及其残留免疫学检测技术研究进展被引量：17
- 2006年
- 综述了莱克多巴胺(RCT)的化学结构、理化特性、构效关系、毒性作用、在动物体内的代谢残留及其免疫学检测技术研究进展。
- 张海棠王自良王艳荣李学武张改平
- 关键词：莱克多巴胺毒性理化特性构效关系毒性作用
- 氯霉素多克隆抗体的制备及其免疫学特性鉴定被引量：6
- 2006年
- 将氯霉素(CAP)进行化学修饰引入羧基活性基团,合成具有半抗原结构特征的氯霉素半琥珀酸酯(CAP-HS);采用混合酸酐(MA)法将CAP-HS与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联合成人工免疫原BSA-CAP-HS和包被原OVA-CAP-HS,用红外(IR)、紫外(UV)、凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定;用BSA-CAP-HS免疫新西兰白兔和SPF鸡制备多克隆抗体(pAb),间接ELISA测定其效价,阻断ELISA鉴定其敏感性,琼脂双扩散试验、WestGold膜杂交试验和交叉反应试验鉴定其特异性。结果表明,BSA-CAP-HS偶联成功,其分子结合比为15.6∶1,获得了高价、敏感、特异的CAPpAb,为CAP残留免疫学检测方法的建立奠定了基础。
- 王自良张海棠王艳荣刘俊伟吴玉平柴书军张改平
- 关键词：氯霉素半抗原人工免疫原多克隆抗体免疫学特性
- 苯巴比妥单克隆抗体的研制及竞争ELISA血药浓度监测方法的建立被引量：5
- 2006年
- 目的研制苯巴比妥单克隆抗体(PBmAb),建立PB血药浓度竞争ELISA监测方法。方法将PB改造成对氨基苯巴比妥(pAPB),用重氮化法合成免疫原BSA-pAPB并免疫Balb/c小鼠;细胞融合技术筛选PBmAb杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备PBmAb;应用PBmAb研制PB血药浓度监测竞争ELISA试剂盒(PB-Kit),并测定其性能。结果BSA-pAPB偶联成功;筛选出4株杂交瘤细胞,应用其中最好的4E6株制备的PBmAb间接ELISA效价为1∶6·4×105,亲和常数(Ka)为2·08×1010L·moL-1,50%抑制浓度(IC50)为9·84μg·L-1,与巴比妥的交叉反应率(CR)为7·9%,与其他化合物无CR;PB-Kit的检测范围为1·0~128μg·L-1,灵敏度为0·89μg·L-1,检测限为1μg·L-1,血清样添加回收率为94·7%,批内和批间变异系数均<10%;PB-Kit与差示分光光度法(DS)的符合率为100%。结论成功研制出高价、敏感、特异的PBmAb,建立了PB血药浓度竞争ELISA监测方法。
- 王自良王建娜张海棠王选年杨艳艳张改平
- 关键词：苯巴比妥单克隆抗体竞争ELISA血药浓度
- 链霉素金标单克隆抗体快速检测试纸的研制及其特性鉴定被引量：2
- 2010年
- 建立了分泌抗链霉素单克隆抗体(STRmAb)杂交瘤细胞株并生产了STRmAb,采用胶体金免疫层析试验(GICA)技术成功研制出STR残留快速检测试纸(STR-Strip),并对其性能进行了鉴定。结果显示,目测检测限为12.5μg/kg;与氯霉素等药物无交叉反应;其敏感性与竞争ELISA试剂盒相当,符合率为100%。研制的快速检测试纸可以在10min内显示结果,具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合STR残留的现场快速检测。
- 刘庆堂职爱民邓瑞广杨艳艳杨继飞柴书军张改平
- 关键词：链霉素单克隆抗体
- 氯霉素单克隆抗体的研制及其免疫学特性鉴定被引量：6
- 2006年
- 将氯霉素(CAP)中的羟基(-OH)与琥珀酸酐反应引入活性基团羧基形成具有半抗原结构特征的氯霉素半琥珀酸酯(CAP-HS);采用混合酸酐(MA)法将CAP-HS与BSA和OVA偶联合成人工免疫原BSA-CAP-HS和包被抗原OVA-CAP-HS,采用红外(IR)、紫外(UV)、凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定;用BSA-CAP-HS免疫BALB/C小鼠,间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠;应用杂交瘤技术制备氯霉素单克隆抗体(CAPmAb),并对其效价、亲和性和特异性等进行鉴定。结果表明,BSA与CAP-HS偶联成功,分子结合比为1∶15.6;筛选出1A10、2B5、4F9共3株敏感特异的杂交瘤细胞,间接ELISA效价细胞培养上清分别为1∶6.4×102、1∶3.2×102、1∶1.28×103,腹水分别为1∶1.6×105、1∶8×104、1∶6.4×105,同种型分别为IgG1/κ、IgG2a/λ、IgG2a/κ,亲和常数(Ka)分别为2.14×108、1.68×109、1.84×1010(L/mol);亲和力最高的4F9株对CAP的IC50为7.54ng/ml,经WestGold鉴定与CAP特异性结合,与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应分别为150%,与其它CAP类药物和抗菌素无交叉反应性。通过试验获得了抗CAP高价、敏感、特异的mAb,可用于CAP残留检测的免疫学试验。
- 杨艳艳张改平王自良邓瑞广王选年柴书军范国英
- 关键词：氯霉素人工免疫原单克隆抗体免疫学特性
