长春市科技发展计划项目(03-170509)
- 作品数：4 被引量：14H指数：2
- 相关作者：贺冰孟祥俊李光源冯非毕军更多>>
- 相关机构：吉林大学第一医院吉林大学第二医院辉南县中医院更多>>
- 发文基金：长春市科技发展计划项目吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 单纯疱疹病毒Ⅰ型截短糖蛋白B基因序列的克隆及鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的构建单纯疱疹病毒Ⅰ型(herpes simplex virus I,HSV-I)SM44株截短糖蛋白B基因序列,为研制联合基因疫苗奠定基础,用于角膜炎的防治。方法利用聚合酶链反应(polymerase chain response,PCR)技术从感染HSV-I SM44株的vero细胞中扩增出HSV-gBt编码基因,经双酶切鉴定后将目的基因定向插入真核表达质粒pcDNA3载体中,构建出重组真核表达质粒pcDNA3-gBt,并对其进行酶切分析和测序鉴定。结果对pcDNA3-gBt双酶切后,电泳可见目的基因(1.5kb)和线性质粒pcDNA3(5.4kb)两条带;测序结果表明,克隆基因插入方向正确,与基因库中登录的HSV-1F株gB基因序列比较,同源性达99.5%。结论经证实成功地构建了重组真核表达质粒pcDNA3-gBt。
- 冯非贺冰孟祥俊李光源
- 关键词：单纯疱疹病毒属角膜炎糖蛋白类
- 单纯疱疹病毒1型糖蛋白B基因疫苗的构建被引量：11
- 2004年
- 目的 :构建用于治疗和预防单纯疱疹病毒性角膜炎的核酸疫苗 ,探讨单纯疱疹病毒 1型糖蛋白 B(HSV-1gp B)基因作为基因疫苗的可能性。方法 :利用 PCR技术从 HSV- 1SM4 4毒株基因组中扩增出编码 HSV- 1gp B去除 N端部分信号肽序列 (39bp)的基因片断 (2 6 73bp) ,定向插入真核表达质粒 pc DNA3载体中 ,构建出重组真核表达质粒 pc DNA- gp B,并对其进行酶切分析、PCR鉴定及测序鉴定。结果 :双酶切重组质粒 pc DNA- gp B,电泳可见两条带 ,分别为目的基因 (2 70 0 bp)和线性质粒 pc DNA3(5 4 0 0 bp) ;以重组质粒 pc DNA- gp B为模板进行 PCR扩增 ,在 2 70 0 bp位置扩增出特异的产物 ;测序结果表明 ,克隆基因插入方向正确 ,与 Gen Bank中登录的 HSV- 1F株 gp B基因序列比较 ,同源性达 99.5 %。结论 :利用 PCR技术从 HSV- 1SM4 4株基因组中扩增出编码 HSV- 1gp B去除 N端部分信号肽序列 (39bp)的基因片断 (2 6 73bp) ,成功地构建了 HSV- 1基因疫苗pc DNA- gp B。
- 孟祥俊贺冰冯非李光源毕军
- 关键词：单纯疱疹病毒1型DNA疫苗
- 单纯疱疹病毒Ⅰ型糖蛋白B核酸疫苗对小鼠血液学指标的影响被引量：1
- 2007年
- 目的检测单纯疱疹病毒Ⅰ型糖蛋白B核酸疫苗(pcDNA3-gB)对小鼠血液生理学和血液生化学指标的影响,探索其安全性及实用性。方法将不同浓度pcDNA3-gB(1 mg/ml3、mg/ml5、mg/ml)通过肌肉注射免疫健康小鼠,对照组使用等量生理盐水,每10天免疫一次,共3次。末次免疫后24 h,检测各组小鼠9项血常规指标和9项血液生化学指标。结果各组小鼠的全部血液生理、生化指标均较稳定,各试验组与对照组之间均无显著差异(P>0.05)。结论不同剂量pcDNA3-gB免疫小鼠后,对小鼠的血液生理生化指标均无明显影响,初步证实了其安全性。
- 于芳贺冰胡艳波张冬艳刘朝霞
- 关键词：核酸疫苗血液理化指标
- 单纯疱疹病毒Ⅰ型糖蛋白B基因疫苗的初步免疫学研究被引量：3
- 2009年
- 目的利用构建成功的重组真核表达质粒pgB免疫小鼠,探讨单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSVⅠ-)gB基因作为基因疫苗的可能性。方法用重组真核表达质粒pgB免疫小鼠,通过中和试验、ELISA方法检测pgB接种小鼠的免疫效果,并对免疫的小鼠进行病毒攻击。结果实验小鼠产生了对HSV-1特异性的抗体(抗体滴度:ELISA法1∶273,中和试验法:1∶49),实验组中和效价显著高于载体对照组和阴性对照组(P<0.01);对病毒的攻击并有免疫保护作用,实验组和空白对照组比较(P<0.01)。结论证明pgB真核表达质粒,具有DNA疫苗作用,可在小鼠体内诱发保护性免疫反应,pgB有可能作为基因疫苗用于单纯疱疹病毒性角膜炎预防和治疗,为进一步构建单纯疱疹病毒糖蛋白联合疫苗并最终用于单疱病毒角膜炎奠定了理论基础。
- 孟祥俊苏云贺冰吴雅臻
- 关键词：单纯疱疹病毒性角膜炎基因疫苗
