艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项(2008ZX10004-004)
- 作品数：5 被引量：14H指数：3
- 相关作者：周小棉雷秀霞王秋平陈斌刘大渔更多>>
- 相关机构：广州市第一人民医院广州市第八人民医院广东省妇幼保健院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基于DNA杂交CD式微流控芯片筛查苯丙酮尿症方法的建立被引量：1
- 2010年
- 目的 建立一种基于往复流的DNA杂交CD式微流控芯片技术,用于PKU基因突变快速筛查.方法 设计并加工一种具有12个微通道的CD式微流控芯片,芯片采用PDMS-玻璃双层结构,分别含有微通道和水凝胶结合探针区.探针区包括R243Q、V245V和空白对照.将PAH外显子7扩增产物加入芯片的进样孔,在离心力的作用下进入杂交微通道区.芯片在离心机中交替旋转或暂停从而进行杂交反应.杂交后将芯片置于荧光显微镜下观察结果并分析荧光信号.评价该方法检测特异性、检测限及重复性.对30例疑似PKU孕妇DNA标本进行检测,并将检测结果与测序比较.结果 利用基于往复流的DNA杂交CD式微流控芯片只需1.5μl样品,杂交时间为15 min,杂交检测限为0.7 ng/μl.对于PKU患者组与健康对照组,芯片检测结果与测序结果一致.挑选不同批次的5张芯片及每张芯片内5个微通道重复检测同一V245V突变PKU患者DNA标本,结果均为阳性,说明重复性较好.对30例疑似PKU孕妇标本进行检测,筛查出4例携带V245V突变,1例携带R243Q突变.结论 建立了一种基于往复流的DNA杂交CD式微流控芯片检测PKU基因突变的方法,该方法简便、快速、高灵敏,可以用于PKU产前筛查.
- 陈斌王秋平李春宇邹晓雷秀霞周小棉江剑辉刘大渔
- 关键词：苯丙酮尿症苯丙氨酸羟化酶核酸杂交
- 量子点标记单病毒示踪流感病毒侵染过程
- 为了有效地预防和控制病毒性疾病的传播,深刻认识病毒感染宿主等传播过程的机制显得尤为重要。对病毒侵染宿主细胞动态过程及机制的诠释,将为认识病毒致病机制及防治病毒性疾病,奠定重要的理论基础。病毒侵染宿主细胞的过程非常复杂,往...
- 刘书琳张志凌孙恩泽张万坡刘海斌赵海粟谢敏王汉中肖庚富庞代文
- 文献传递
- 芯片电泳快速检测乙型肝炎病毒YMDD变异
- 目的:利用芯片电泳高分辨力和分析快速的优点,建立一种基于芯片电泳的乙型肝炎病毒YMDD耐药性突变的检测方法。方法:利用序列特异性PCR联合芯片电泳检测乙型肝炎病毒YMDD变异。将YVDD、YIDD标准质粒分别按梯度稀释1...
- 王秋平
- 关键词：乙型肝炎病毒
- 肿瘤学基础研究进展-2011
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- 李雁
- 文献传递
- 芯片电泳快速检测乙型肝炎病毒YMDD变异
- 目的:利用芯片电泳高分辨力和分析快速的优点,建立一种基于芯片电泳的乙型肝炎病毒YMDD耐药性突变的检测方法。方法:利用序列特异性PCR联合芯片电泳检测乙型肝炎病毒YMDD变异。将YVDD、YIDD标准质粒分别按梯度稀释1...
- 王秋平
- 关键词：乙型肝炎病毒
- 乙型肝炎病毒YMDD变异检测方法的新进展被引量：3
- 2011年
- 乙型肝炎病毒（HBV）感染是导致肝硬化和肝癌的重要因素,但长期接受拉米夫定治疗的患者会产生耐药变异,一般服用拉米夫定〉6～9个月,部分患者可发生耐药变异,并随治疗时间延长而突变率逐渐增高。
- 王秋平周小棉
- 关键词：乙型肝炎病毒YMDD变异
- 液体人血浆HCV-RNA质控品临床应用探讨被引量：2
- 2010年
- 目的 探讨液体人血浆HCV-RNA质控品临床应用的可行性。方法 用实时荧光定量PCR检测液体人血浆HCV-RNA质控品在不同存放时间和温度下HCV-RNA含量的变化情况,同时对同一管质控品进行3个复孔检测,考察其管内RNA分布的均一性。结果 多批次质控品在4℃存放半个月后HCV-RNA含量均有将近1个数量级的下降;存放6个月以上有1～2个数量级的下降;质控品置-20℃存放较4℃稳定;同一质控品3个复孔管内RNA分布均一性检测结果表明最高值与最低值之间相差1～2个数量级。结论 液体人血浆HCV-RNA质控品稳定性和均一性欠佳,目前尚不适合作为HCV-RNA室间质控品广泛应用。
- 雷秀霞王敏玲胡秀梅明凯华王秋平周小棉
- 关键词：丙型肝炎病毒稳定性均一性
- 多重聚合酶链反应联合芯片电泳在人乳头瘤病毒基因分型检测中的应用被引量：4
- 2010年
- 研究证实HPV感染是CIN和宫颈癌的主要病因，而且不同HPV亚型感染的致病性和后果也有差异。HPV分型检测对临床CIN和宫颈癌筛查和评估、病程的进展监测、治疗后的随访、以及人群的流行病学状态和病毒疫苗的研制都有重要意义。目前用于临床的HPV检测技术主要有杂交法与实时荧光定量PCR，但这2种方法存在操作复杂、检测时间较长等不足。
- 陈斌周小棉刘大渔雷秀霞汪安石张佳宇尹爱华
- 关键词：基因分型检测多重聚合酶链反应人乳头瘤病毒实时荧光定量PCRHPV感染宫颈癌筛查
- 芯片电泳快速检测乙型肝炎病毒YMDD变异被引量：4
- 2011年
- 目的利用芯片电泳高分辨力和分析快速的优点,建立一种基于芯片电泳的乙型肝炎病毒YMDD耐药性突变的检测方法。方法利用序列特异性PCR联合芯片电泳检测乙型肝炎病毒YMDD变异;将YVDD、YIDD标准质粒分别按梯度稀释108～100进行检测,将105拷贝/μl YVDD、YMDD质粒及YIDD、YMDD质粒分别按99∶1、50∶50、20∶80、10∶90、5∶95、1∶99混合检测,评价该方法的灵敏度;用芯片电泳法检测86份经拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患者血清样品中YMDD突变情况,并将其结果与荧光定量PCR比较;两种方法结果不一致的标本进行DNA测序鉴定。结果芯片电泳法能够在3 min内实现HBV YMDD变异检测,标准YVDD、YIDD质粒的检测限均为101拷贝/μl;不同比例(V∶M或I∶M)的混合质粒,最小比例突变检测率YVDD为5.0%,YIDD为10.0%;在86份标本中,芯片电泳检出总变异65份,突变率为75.6%,其中YVDD变异32份、YIDD变异23份、YVDD+YIDD混合变异为10份,荧光定量PCR检出总变异62份,突变率为72.1%,其中YVDD变异30份、YIDD变异29份、YVDD+YIDD混合变异为3份,两种方法检测结果差异无统计学意义(Kappa=0.609);两种方法检测结果不一致的标本20份,经测序结果显示,YMDD野生株6份、YVDD变异7份、YVDD+YIDD混合变异7份。结论芯片电泳法检测YMDD变异具有简单、快速、灵敏度和准确度高的优点,适合于临床实验室开展乙型肝炎病毒YMDD变异的检测。
- 王秋平陈斌雷秀霞刘大渔魏绍静周小棉
- 关键词：乙型肝炎病毒
